标准解读
《GB/T 31801-2015 丁香疫霉菌检疫鉴定方法》是一项国家标准,主要针对丁香疫霉菌(Phytophthora syringae)的检疫和鉴定提供了一套标准化的方法。该标准适用于进出境植物及其产品的检验检疫工作,以及国内相关领域对丁香疫霉菌进行检测时参照使用。
标准中详细规定了从样品采集、处理到最终结果判定的一系列步骤。首先,在采样环节,明确了不同类型的植物材料应如何正确地获取样本;接着是样本的预处理过程,包括清洗、切割等操作,以确保后续实验的有效性。对于病原体的分离培养,则介绍了适宜的培养基种类及条件设置,以便于观察到典型菌落特征。此外,还列举了几种常用的分子生物学技术如PCR扩增等,用于进一步确认疑似病例是否确实为丁香疫霉菌感染。最后,根据上述各阶段所获得的数据信息,结合形态学特征与基因序列比对结果,给出明确的鉴定结论。
整个流程涵盖了传统微生物学方法与现代分子生物学手段相结合的方式,旨在提高检测准确性的同时也保证了效率。通过遵循此标准指导下的操作规程,可以有效地识别并控制丁香疫霉菌的传播风险,从而保护农作物免受其侵害。
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....
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- 现行
- 正在执行有效
- 2015-07-03 颁布
- 2015-11-27 实施
文档简介
ICS6502001
B16..
中华人民共和国国家标准
GB/T31801—2015
丁香疫霉菌检疫鉴定方法
DetectionandidentificationofPhytophthorasyringaeKleb.
2015-07-03发布2015-11-27实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
中国国家标准化管理委员会
中华人民共和国
国家标准
丁香疫霉菌检疫鉴定方法
GB/T31801—2015
*
中国标准出版社出版发行
北京市朝阳区和平里西街甲号
2(100029)
北京市西城区三里河北街号
16(100045)
网址
:
服务热线
:400-168-0010
年月第一版
20159
*
书号
:155066·1-49875
版权专有侵权必究
GB/T31801—2015
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任
。。
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口
(SAC/TC271)。
本标准起草单位中国检验检疫科学研究院中华人民共和国天津出入境检验检疫局
:、。
本标准主要起草人杜洪忠罗加凤吴品珊严进
:、、、。
Ⅰ
GB/T31801—2015
丁香疫霉菌检疫鉴定方法
1范围
本标准规定了丁香疫霉菌的检疫鉴定方法
。
本标准适用于针对丁香疫霉菌寄主的苗木枝条枝叶果实及其夹带土壤和介质中丁香疫霉菌的
、、、
鉴定
。
2仪器和用具
21仪器
.
生物显微镜超净工作台光照培养箱电子天平高压灭菌锅冰箱扩增仪荧光
,,,(1/1000g),,,PCR,
扩增仪电泳仪凝胶成像仪高速冷冻离心机恒温水浴锅
PCR,,,,。
22用具
.
烧杯三角瓶量筒试管培养皿酒精灯镊子剪刀解剖刀接种针载玻片盖玻片塑料研杵
,,,,,,,,,,,,,
移液器移液器吸头离心管液氮罐
,,,。
3试剂材料和培养基
、
31试剂
.
β谷甾醇匹马霉素氨苄青霉素钠盐利福平钠盐五氯硝基
-,(pimaricin),(ampicillin),(rifampicin),
苯恶霉灵琼脂糖乙二胺四乙
(pentachloronitrobenzene),(hymexazol),CaCO3,,Tris-HCl,MgCl2,HCl,
酸四钠盐十六烷基三甲基溴化铵无水乙醇
(EDTA),NaOH,NaOAc,KCl,Tris,(CTAB),TAE,(etha-
三氯甲烷异丙醇异戊醇核酸染料
nol),(chloroform),(isopropanol),(isoamylalcohol),SYBRGreenI,
蛋白酶Taq聚合酶通用引物和实时荧光引物和及
K,DNA,dNTP,ITS5ITS4,PCRPS-FPS-RTaq-
探针
Man-MGBPS-Pr。
32材料
.
琼脂粉汁夏栎叶片或苹果或梨鲜橙皮或杜鹃叶片
,V8,,。
33培养基
.
培养基培养基鲜橙皮培养基杜鹃叶片培养基选择性培养基具
PDA,V8,V8,V8,PARPH-V8。
体配方参见附录
A。
4检疫鉴定方法
41症状检查
.
检查寄主植物的根茎叶果实等部位对有枯萎
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