乙型肝炎标志物检测及质量控制

乙型肝炎标志物检测及质量控制第一页，共八十九页，2022年，8月28日1主要内容乙型肝炎病毒标志物检测质量控制室间质量评价（EQA）室内质量控制（IQC）第二页，共八十九页，2022年，8月28日Daneparticle小球形颗粒管状和线状颗粒HBVParticlesElectronmicrographHepatitisBVirus

第三页，共八十九页，2022年，8月28日

HBV为DNA病毒，球形颗粒，结构包括外壳蛋白（HBsAg，前S1、前S2）和核心颗粒（HBeAg，HBcAg，DNA聚合酶）。乙型肝炎病毒标志物检测第四页，共八十九页，2022年，8月28日GeographicDistributionofChronicHBVInfectionHBsAgPrevalence>8%-High

2-7%-Intermediate

<2%-Low全球约有20亿人曾感染过乙肝其中3.5亿人为慢性HBV感染者每年约有100万人死于HBV感染所致得肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌。第五页，共八十九页，2022年，8月28日HepatitisBVirusSources:WHO/CSR/LYO/2002:HepatitisBCDC1992年流行病学调查结果我国HBV感染率为：57.6%HBsAg携带者：9.75%,1.2亿我国慢性乙肝病人：2000万采取措施乙型肝炎疫苗是最有效的防止HBV感染的方式2006年流行病学调查我国1-59岁人群HBsAg携带率为7.18%，5岁以下儿童的HBsAg仅为0.96%。第六页，共八十九页，2022年，8月28日人群HBsAg携带率下降

第七页，共八十九页，2022年，8月28日血清标志物检测

经典乙肝“两对半”乙肝表面抗原(HBsAg)：最早出现在血液中的病毒抗原乙肝表面抗体（抗HBs）：中和或保护抗体乙肝e抗原（HBeAg）：第二个出现在血液中的病毒抗原乙肝e抗体（抗HBe）乙肝核心抗体（抗HBc、抗HBcIgM）：最早出现在血液中的抗体（IgM）乙肝病毒前S1、S2抗原及抗体乙肝病毒大蛋白第八页，共八十九页，2022年，8月28日第九页，共八十九页，2022年，8月28日HBsAg的发现1964年Blumberg（39岁）用琼脂扩散法（immunodiffusion,ID），从1名澳大利亚土著输血患者血清中发现一种特殊抗原（BullNYAcadMed1964;40:377-386）1967年Blumberg（42岁）报告，从Down综合征、白血病和肝炎患者血清中也发现该抗原（AnnIntMed1967;66:924-931）第十页，共八十九页，2022年，8月28日HBsAg的发现1970年Blumberg（45岁）报告澳大利亚抗原是肝炎病毒1972年正式命名为HBsAg1976年荣获诺贝尔生理学和医学奖（51岁）2011年逝世，享年86岁BaruchBlumberg第十一页，共八十九页，2022年，8月28日HBV感染后绝大多数感染者外周血中可出现HBsAg，含量在5ng～600μg/ml之间。最低含量为0.2ng/ml以下，高者可达2000μg/ml以上。HBV的前S/S基因编码HBsAg，构成病毒外膜，根据所带亚型决定簇的不同分为adw、adr、ayw和ayr。我国绝大多数地区以adr为主，adw次之。HBsAg不仅存在于血液中，而且还存在于许多体液和分泌物中，如唾液、尿液、乳汁、精液等。乙肝病毒表面抗原（HBsAg）第十二页，共八十九页，2022年，8月28日鉴别乙型肝炎与其他病毒性肝炎病毒性肝炎HBsAg阴性HBsAg阳性其他病毒性肝炎乙型肝炎乙肝病毒表面抗原的应用第十三页，共八十九页，2022年，8月28日鉴别急性与慢性HBV感染急性乙型肝炎感染（<6个月）WeeksafterExposureSymptomsHBeAganti-HBeTotalanti-HBcIgManti-HBcanti-HBsHBsAg0481216202428323652100TiterCDC第十四页，共八十九页，2022年，8月28日WeeksafterExposureRelativeConcentrationofReactantsIgMAnti-HBcTotalAnti-HBcHBsAgAcute(6months)HBeAgChronic(Years)Anti-HBe0481216202428323652YearsHBVDNALimitofDetection慢性乙肝感染（>6个月）第十五页，共八十九页，2022年，8月28日HBsAg检测方法进展定性定性定性定量70年代80年代90年代2000年以后

琼脂扩散反向血凝时间分辨对流免疫电泳放射免疫酶联免疫或化学发光第十六页，共八十九页，2022年，8月28日免疫耐受期免疫清除期（活动期）非活动或低（非）复制期再活动期不需要治疗需要治疗不需要治疗需要治疗HBV自然感染史第十七页，共八十九页，2022年，8月28日

感染乙肝病毒2-11周后血清开始出现HBsAg，之后出现转氨酶异常和临床症状。（1）HBsAg定性检测阳性：见于急性乙肝患者，慢性乙肝患者，无症状乙肝病毒携带者。HBsAg的临床意义

第十八页，共八十九页，2022年，8月28日（2）HBsAg定量检测------老指标新意义

参考值：0-0.05IU/mL

临床意义：可作为HBV携带者乙肝病毒复制的参考指标评价拉美呋定的治疗效果监测应用α-干扰素治疗病人的乙肝病毒复制确定肝移植病人免疫球蛋白的使用剂量对患者的应答情况进行预测对接受治疗患者的免疫控制（HBsAg转阴）结局进行预测。第十九页，共八十九页，2022年，8月28日HBsAg定量检测的临床应用

-作为HBV携带者乙肝病毒复制的参考指标HBeAg是反映病毒复制的指标,并且HBeAg转阴通常是预示着HBVDNA水平降低到低于105copies/ml的标志。然而，一部分HBeAg阴性但是HBVDNA仍然保持较高的滴度(>106copies/ml)。HBsAgandHBVDNA水平有较高的显著性相关.作为一种替代检测，HBsAg的定量检测能够准确地预测HBV的复制。HBsAg高于15000IU/ml可能反应HBVDNA处于较高水平的滴度以及HBeAg处于阳性的状态。如果HBsAg滴度在1600至15000IU/ml之间，应该考虑检测HBVDNA。第二十页，共八十九页，2022年，8月28日

HBsAg定量检测的临床应用

--评价拉美呋定的治疗效果当出现YMDD突变出现的时候,通常在生化指标出现异常之前血清HBsAg浓度和HBVDNA滴度增加。在YMDD突变出现之后，血清HBVDNA持续升高,然而HBsAg的增加是瞬时的,与ALT的升高相似。(A)在大部分病人中,血清HBsAg的增加是由于HBVDNA的增加.然而在某些病人中,血清HBsAg在HBVDNA增加几个月之前便增加。(B).除了监测HBVDNA水平之外，同时监测血清HBsAg浓度或许能够有利于较早地发现在拉美呋定治疗中的耐药突变。第二十一页，共八十九页，2022年，8月28日HBsAg定量检测的临床应用

--监测应用a-干扰素治疗病人的乙肝病毒复制量化评估乙肝病毒表面抗原的出现是大有应用前景的，因为该方法是一简单而廉价的方法，可以用于慢性乙型肝炎患者接受干扰素治疗时监测病毒复制的指标。第二十二页，共八十九页，2022年，8月28日乙肝病人肝移植后使用乙肝免疫球蛋白可以有效地防止再感染的发生。HBsAg降低至1IU/ml以下时，HBsAg和HBIG的呈高度相关（r=0.97,r=1.00）；Anti-HBs升高至大于1000IU/L时，HBsAg和HBIG的呈高度相关（r=0.94,r=1.00）。在移植期间，用于降低HBsAg增加anti-HBs的HBIG的剂量取决于HBsAg的水平而不是HBVDNA水平。HBsAg定量检测的临床应用

-确定肝移植病人免疫球蛋白的使用剂量第二十三页，共八十九页，2022年，8月28日对患者的应答情况进行预测

2010年，Sonneveld等研究结果表明：HBeAg（+）患者，用干扰素治疗12周时HBsAg未下降的患者中97%为无应答，且最终无一例获得HBsAg转阴。因此认为治疗12周时HBsAg无下降的患者获得持续病毒应答（SVR）的几率非常小，同时不大有HBsAg转阴的机会，所以临床医生可以根据12周时患者的HBsAg降低情况来决定是否继续接受治疗。第二十四页，共八十九页，2022年，8月28日对患者的应答情况进行预测干扰素治疗HBeAg（+）

乙肝患者12周时HBsAg水平是今后HBsAg清除的预测指标治疗12周时HBsAg无下降（>20000IU/ML）可预测低应答，可作为停药规则。治疗过程中HBsAg无下降，复发率高。治疗12周时HBsAg明显下降（<20000IU/ML）可预测高应答，治疗效果较好，继续用药，完成疗程。第二十五页，共八十九页，2022年，8月28日对患者的应答情况进行预测干扰素治疗HBeAg（-）

慢性乙肝患者，12周时无HBsAg下降、HBV-DNA下降<2Logcp/mL，可作为停药指标治疗12周时HBsAg下降（<1500IU/mL），HBV-DNA下降<2Logcp/mL，血清型转换为0%，可作为停药规则。第二十六页，共八十九页，2022年，8月28日用核苷类似物治疗慢性乙肝时HBsAg下降模式与HBsAg长期清除有关HBsAg被清除的患者可能停药快速下降HBsAg>1Log（1年内下降），3年时HBsAg消失在25%。缓慢下降HBsAg<1Log（1年内下降），3年时HBsAg消失在1.4%。稳定，无变化，3年时HBsAg消失在0%。HBsAg消失患者的HBsAg呈快速和持续下降。第二十七页，共八十九页，2022年，8月28日对接受治疗患者的免疫控制（HBsAg转阴）结局进行预测2009年Heathcote等研究结果表明，与所有患者的总体水平相比，发生HBsAg转阴患者的HBsAg水平在治疗期间明显下降，而HBVDNA水平则无明显差异。这说明通过HBsAg定量检测提前预测患者获得免疫清除的可能性，从而提高患者的治疗信心和疗效。Wursthorn等在2010年研究结果显示，口服抗病毒治疗中，HBsAg的水平下降尤其是迅速下降与HBsAg清除密切相关，认为HBsAg清除的患者可以考虑停止治疗。第二十八页，共八十九页，2022年，8月28日HBsAg清除和血清学转换是理想的治疗终点持久免疫控制是达到HBsAg清除的重要条件HBsAg下降HBVDNA抑制治疗中持久免疫控制HBsAg清除减少肝硬化和肝癌，提高存活率第二十九页，共八十九页，2022年，8月28日HBsAg清除和血清学转换是理想的治疗终点HBsAg血清转换可作为持久免疫控制指标即使使用高敏度试剂测不到HBVDNA并不表示无循环的HBV和/或HBV感染已清除时点评价病毒载量可作为抗病毒治疗有效和持续应答HBsAg定量检测可确定宿主免疫系统是否已有效控制HBV感染第三十页，共八十九页，2022年，8月28日HBsAg检测在个体化卫生保健中的作用健康无症状疾病有症状疾病慢性疾病或治愈危险性评价筛查诊断预后评价治疗应答预测监测发生疾病倾向早检测预测可能的病情预测对治疗的可能应答检测治疗效果/疾病复发第三十一页，共八十九页，2022年，8月28日HBsAg测定中可能存在的挑战：假阴性HBsAg含量低于所用方法的测定下限之下。如感染的“窗口期”、急性期后或恢复期、自限性感染末期的携带者等编码HBsAg的HBV-S基因的突变HCV/HDV重叠感染对HBV复制和/或HBsAg的表达的抑制作用

测定方法所用抗体对HBV不同基因型检测敏感性的不同钩状效应（HOOKEFFECT）第三十二页，共八十九页，2022年，8月28日HBsAg的变异所致的不常见的HBV

标志物模式或不一致的结果单独抗HBc阳性。HBsAg阴性但HBeAg阳性。HBsAg（HBeAg）和抗HBs（大多为<100IU/ml的低滴度）同时存在。使用不同厂家的HBsAg试剂盒得到的不一致结果。第三十三页，共八十九页，2022年，8月28日

抗-HBs是HBsAg刺激机体产生的特异性抗体，是一种保护性抗体，能中和HBV，初感染2-6月出现。抗-HBs阳性见于HBV既往感染者，乙肝恢复期及乙肝疫苗免疫后。乙肝病毒表面抗体（HBsAb）第三十四页，共八十九页，2022年，8月28日

乙肝病毒表面抗体（HBsAb）

抗-HBs定量测定：（1）抗-HBs含量在0-10mIU/ml，表示不具有保护性，需要注射乙肝疫苗（3针：0-1-6方案）。（2）抗-HBs含量在10-100mIU/ml，表示具有保护性，但较弱，需要乙肝疫苗强化注射（1针）。（3）抗-HBs含量大于100mIU/ml，表示具有很强的保护性，不需要注射乙肝疫苗。第三十五页，共八十九页，2022年，8月28日乙肝病毒表面抗体（HBsAb）接受乙肝疫苗接种者，体内血循环中除了抗HBs外，不应出现其它乙肝病毒感染血清免疫学标志物，如抗HBe、抗HBc等，一旦出现除抗HBs以外的标志物，则应视为既往HBV感染。血清中抗HBs和HBsAg同时检出，可能为抗HBs产生的早期，或属于不同亚型的HBV感染，或由HBV的S基因变异所致。自然发生的逃逸变异株可使某些慢性携带者同时存在HBsAg和抗HBs，产生的抗体直接针对血循环中HBsAg抗原不含的表位，因而不具保护作用。第三十六页，共八十九页，2022年，8月28日乙肝病毒核心抗原（HBcAg）和核心抗体（抗HBc）机体对HBV抗原的免疫应答最早出现的是对HBcAg的细胞免疫应答，随后是体液免疫应答产生抗HBc，总抗HBc包括抗HBc-IgM和HBc-IgG等。抗HBc不是保护性抗体。抗HBc在血中呈低滴度且与抗HBs同时存在，是既往感染的标志。在HBV高流行人群中，抗HBc常作为疫苗免疫前的筛检方法。在欧洲和美国，抗HBc还是血液筛查的一个指标。在我国，抗HBc没有作为血液筛查指标，其主要原因可能是抗HBc检测的假阳性导致血液废弃过多。第三十七页，共八十九页，2022年，8月28日乙肝病毒核心抗原（HBcAg）和核心抗体（抗HBc）HBcAg是构成病毒核心颗粒部分，其活性部分位于颗粒内部，外周血没有游离的HBcAg，经过特殊处理后HBcAg可释放出来。HBcAg阳性表示病毒在复制，传染性强。抗-HBc：不是中和抗体，有IgG和IgM两种形式。IgM在早期出现，而IgG在恢复期出现，可持续多年或终身存在。第三十八页，共八十九页，2022年，8月28日抗-HBc水平-研究展望：未来的研究角度乙肝感染的不同时期抗-HBc水平及其意义急性乙肝转归过程的抗-HBc水平乙型重型肝炎（肝衰竭）抗-HBc水平既往感染者和隐匿性乙肝抗-HBc水平抗-HBc水平与肝脏病理的联系抗-HBc水平与T细胞免疫水平的联系抗-HBc水平与长期转归预后的关系第三十九页，共八十九页，2022年，8月28日

乙肝病毒e抗原和e抗体

HBeAg为可溶性，可分泌到细胞外，是病毒复制的标志。HBeAg刺激机体产生抗-HBe抗体。（1）e抗原可作为急性乙肝辅助诊断和预后的指标。HBeAg在乙型肝炎潜伏期后期出现，晚于HBsAg，它随着HBsAg的消失而消失，若急性肝炎发病3-4个月后HBeAg转阴，则预后良好。第四十页，共八十九页，2022年，8月28日

乙肝病毒e抗原和e抗体（2）HBeAg存在于HBsAg阳性的病人和携带者的血液中，其中大多数伴有HBV-DNA，DNA多聚酶阳性。HBeAg阳性说明病毒复制，具有很强的传染性。抗-HBe阳性者传染性较低。（3）当乙肝病毒的前核心区发生点突变时，可使得HBeAg无法表达，表现为血清HBeAg或抗HBe测定持续为阴性，但血清HBsAg或HBV-DNA可表现为阳性。(4）抗HBe阳性说明病毒复制减少，传染性弱，但并非没有传染性。抗HBe不是保护性抗体。第四十一页，共八十九页，2022年，8月28日HBeAg定量检测的应用HBsAg转阴或血清学转换是理想终点，但是非常难以达到。临床已经证实，在HBeAg阳性患者，可以把持久的HBeAg血清学转换作为满意治疗终点来指导治疗。目前看来对HBeAg阳性患者，HBeAg血清学转换是一个可以参考的重要时间表。HBeAg滴度下降可以非常好的预测72周时是否发生HBeAg血清学转换。研究还发现，干扰素治疗时HBeAg水平明显下降的患者，其HBsAg转阴也明显增加。如果在24周时患者HBeAg依然>100PEIU/mL，则建议调整治疗方案。第四十二页，共八十九页，2022年，8月28日HBV变异的检测

HBV突变的原因乙肝病毒的复制是通过用逆转录酶（RT）由RNA到DNA，由于逆转录酶缺乏必要的校正能力。逃避机体清除病毒的压力。第四十三页，共八十九页，2022年，8月28日HBsAg突变

定义：HBsAg的突变是乙肝病毒的表面抗原蛋白的决定簇的结构改变，这个结构的改变是由病毒核酸和氨基酸序列出现的替代，删除或插入性的变化所引起。位置:报道中最常见的变异位于“a”决定簇即有双环结构的乙肝病毒S基因的124–147a.a.报道中最常见的变异株是Gly（甘氨酸）145Arg（精氨酸）。原理:“a”决定簇具有很强的抗原性，所以是中和抗体的诱导位和作用靶位，在这个区域的发生变异可以逃逸宿主产生的中和性抗体的中和作用。第四十四页，共八十九页，2022年，8月28日HBsAg逃逸突变的影响逃避宿主的中和作用，导致HBV突破性感染。在有HBsAg变异株检测能力的测试中发现HBsAg和anti-HBs共存。在无HBsAg变异株检测能力的测试中出现假阴性结果，可能在临床诊断和血液筛查中造成严重后果。乙肝疫苗接种加速了HBsAg的突变，乙肝的免疫治疗和抗病毒治疗也会导致HBsAg的突变。第四十五页，共八十九页，2022年，8月28日常见乙肝病毒标志物检测模式HBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBcAb病程-----未感染+-+--急性感染初期+-+-+急性或慢性乙型肝炎，高传染性（大三阳）+---+急性、慢性乙型肝炎或HBsAg携带者+--++急性乙肝趋向恢复或慢性乙肝，弱传染性（小三阳）第四十六页，共八十九页，2022年，8月28日HBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBcAb病程----+急性HBV感染“核心窗口期”或既往曾感染过乙肝，有流行病学意义

---++乙肝恢复期，弱传染性-+-++急性乙肝康复期，开始产生免疫力-+--+急性HBV感染康复期或有既往感染史，目前保持免疫力-+---疫苗接种后或HBV感染后康复常见乙肝病毒标志物检测模式第四十七页，共八十九页，2022年，8月28日结果的报告与解释结果解释的责任属于临床实验室，应根据所检测的人群解释结果。临床解释的责任属于临床医生，其应根据临床信息解释结果。临床实验室与临床医生的对话对适当利用实验室数据非常重要。第四十八页，共八十九页，2022年，8月28日乙肝“两对半”结果解释的困扰HBsAg和抗-HBs同时出现HBeAg和抗-HBe同时出现HBeAg阳性但HBsAg阴性只有抗-HBe和抗-HBc阳性单项抗-HBe阳性单项抗-HBc阳性第四十九页，共八十九页，2022年，8月28日单独HBsAg阳性出现特点可能的解释实验室检测原因高流行地区：70%HBsAg单独阳性是假阳性结果低流行地区：50%的少见的HBV血清学模式为HBsAg单独阳性(1)HBV急性感染早期(2)HBV疫苗接种后的抗原血症

(3)由于机体对HBcAg免疫耐受、感染有缺陷的HBV病毒株导致机体不产生HBsAg假阳性结果第五十页，共八十九页，2022年，8月28日HBsAg和抗-HBs同时阳性出现特点可能的解释实验室检测原因可出现于无症状携带者、急慢性和隐匿性感染者，发生率在5%-30%不等（1）pre-S基因、S基因的突变，使得突变型HBsAg和针对野生型HBsAg的抗体同时存在（2）产生亚型特异的HBsAb。（3）新的HBV病毒株感染（4）HBV隐匿性感染中，免疫抑制下HBV复发感染（1）HBsAg假阳性结果（2）HBsAb假阳性少见。第五十一页，共八十九页，2022年，8月28日单独HBcAb阳性出现特点可能的解释实验室检测原因低流行地区：献血员人群的发生率为1%HBV流行地区：献血员人群的发生率为20%可见于HBV急性感染恢复的“窗口期”、HBV感染恢复多年以后或慢性HBV感染。慢性HBV感染中单独HBcAb阳性可能是：（1）隐匿性感染：血清中HBsAg阴性、血清或组织中HBVDNA阳性，HBV其它血清学标志物可以是阳性也可以是阴性。例如合并感染其他肝炎病毒可造成隐匿性感染。（2）形成HBsAg-HBsAb免疫复合物（1）HBcAb假阳性（2）HBsAg变异导致假阴性结果（3）抗-HBs浓度低于检测限。第五十二页，共八十九页，2022年，8月28日HBeAg和HBeAb同时阳性出现特点可能的解释实验室检测原因HBeAg和HBeAb同时阳性抗原抗体转换过程中HBeAg浓度过高导致的HBeAb假阳性：竞争法检测HBeAb时，样本中的HBeAg的量足以同时结合酶标板上的HBeAb和游离的酶结合物，使得酶结合物不能与结合于固相上的HBeAg相结合，造成不显色的结果，导致HBeAb假阳性。第五十三页，共八十九页，2022年，8月28日单独HBeAg阳性出现特点可能的解释实验室检测原因单独HBeAg阳性HBeAg阳性的孕妇，可通过胎盘将HBeAg传给胎儿，造成新生儿HBeAg单独阳性。（1）HBsAg变异导致HBsAg假阴性结果；（2）HBeAg假阳性。第五十四页，共八十九页，2022年，8月28日单独HBeAb阳性出现特点可能的解释实验室检测原因单独HBeAb阳性无（1）HBsAg变异导致HBsAg假阴性结果；（2）HBeAb假阳性第五十五页，共八十九页，2022年，8月28日如何正确地理解和应用乙肝血清学标志物检测结果：临床实验室方面应在充分阅读理解试剂盒说明书的基础上，建立检测报告的标准操作程序（SOP）。与相应的临床科室医生充分交流沟通，使得临床医生能充分理解结果的报告方式及内在含义，以及在标本采集、患者用药上可能对检验结果的影响，从而尽可能避免标本收集环节可能给结果带来的影响。可能的话，在结果报告单上加上对结果的综合解释。第五十六页，共八十九页，2022年，8月28日如何正确地理解和应用乙肝血清学标志物

检测结果：临床医生方面根据检验目的，正确地开出检验申请单。

最重要的是要明确检测乙肝“两对半”的目的！是诊断是否感染？还是抗病毒治疗预后判断？对检验结果不应是固定的静止的去看待，应以动态的纵向的和横向的方式去看。

作为一个特定的HBV感染者，某一次检测乙肝“两对半”，什么样的模式组合都有可能出现。出现某种罕见模式，既可能是由于患者感染后的免疫状态的反映，也可能是标本中的干扰因素所致的假阳性或假阴性，或实验室不可知原因的检测错误。第五十七页，共八十九页，2022年，8月28日质量控制的目的：给临床和患者提供准确的检测结果，进而为疾病的诊断提供有利依据。质量控制第五十八页，共八十九页，2022年，8月28日质量管理概览QM分析前分析中分析后样本采集样本前处理样本运输仪器状态QC样本保存报告发放临床沟通CQI维护保养试剂管理耗材管理人员管理定标、校准定标验证室内质控室间质控方法学验证QA投诉处理························第五十九页，共八十九页，2022年，8月28日质控目的的新理解规范所有人：主任操作者病人临床厂家很大程度上，质控的目的是为了失控第六十页，共八十九页，2022年，8月28日质控品精密度评价室内质控(精密度控制)质控品定标(正确度控制)定标液（校准品）标准品（标准物质）正(准)确度评价室间质评（比对计划）第六十一页，共八十九页，2022年，8月28日室间质量评价（实验室间比对）：使检验结果具有可比性，保证检验结果的准确性。如参加卫生部临检中心及省临检中心的室间质评。室内质量控制：使检验结果具有很好的重复性，决定当日结果能

否发出。质量控制第六十二页，共八十九页，2022年，8月28日室间质评：如参加卫生部临检中心及省临检中心的室间质评。室内质控：

1、原厂质控品2、第三方质控品：从卫生部临检中心及省临检中心购买；商品化质控品

3、自制：利用试剂盒内的阴阳性对照或患者的血清进行配置质控品来源第六十三页，共八十九页，2022年，8月28日定性、半定量与定量项目的质量控制定性试验：报告“阴性-”或者“阳性+”的试验。半定量试验：报告“x+”、“阴性-”或者“滴度”的试验。定量试验：报告定量检测项目的试验。质量控制第六十四页，共八十九页，2022年，8月28日常见定性、半定量及定量试验的检测报告方式定性检测肉眼判读结果，无法（需）读取检测信号大小（强弱），直接报告阴阳性的。如：ENA抗体、金标法项目、免疫印迹法项目。仪器判读连续检测信号，使用Cut-off判断阴阳性的。如：ELISA、发光仪等。半定量检测肉眼或者仪器判读，判别颜色强弱并报告“x+”或报告稀释度的。如：尿干化学、凝集试验。定量检测第六十五页，共八十九页，2022年，8月28日定性、半定量及定量项目的质控方法定性检测：直接报告阴阳性的注意“质控品”与“阴阳性对照”的区别。需要阴性和阳性质控各一。最好有弱阳性质控。无法统计质量控制，但须回顾性统计符合率。定性检测：以Cut-off值报告阴阳性结果的。用阴性质控、弱阳性质控（如不可取得，只用阳性质控）来控制。夹心法弱阳性质控的S/CO约为1.5-4，视不同方法而定，如竞争法：S/CO约为。用“符合度”判断质控情况。用L-J图控制精密度：定性sAg、sAb、eAgCV%<15%左右。eAb、cAbCV%<20%定量sAg、sAb<10%第六十六页，共八十九页，2022年，8月28日定性、半定量及定量项目的质控方法半定量检测：报告“x+”或稀释度的选择阴性和适中浓度质控品。如2+。1+~3+为在控。无法统计质量控制，但须回顾性统计各结果比率。定量检测使用定量质控方法第六十七页，共八十九页，2022年，8月28日定性项目质控还因注意的几个问题质控判断和精密度控制分开。推荐用S/CO值建立均值、SD、CV%。因为有些读数值很低的项目是不符合相应统计要求的。如过低值的CV%会很大。加心法使用弱阳性和阳性统计。竞争法用阴性和弱阳性统计。避开极低的S/CO。最好附加极高值质控排除钩状效应。第六十八页，共八十九页，2022年，8月28日乙肝标志物质量控制主要包括三个方面：（1）测定前的质量控制；（2）统计学质量控制；（3）质量控制的评价。第六十九页，共八十九页，2022年，8月28日测定前的质量控制实验室设施、仪器设备及管理理想的试剂和操作方法人员培训第七十页，共八十九页，2022年，8月28日实验室设施、仪器设备及管理实验室空间及工作流程的设计实验室环境条件的控制：温湿度控制设备、稳压或不间断电源仪器设备及管理：酶标仪、洗板机、全自动免疫分析仪、加样器等应建立技术档案，并定期维护和校准第七十一页，共八十九页，2022年，8月28日理想的试剂试剂的质检(确认)

测定下限(Detectionlimit)

批内变异(<10%)和批间变异(<15-20%)“钩状”效应(Hookeffect)

变异体的检测能力(HBsAg)对本室所用室内质控血清检测的一致性第七十二页，共八十九页，2022年，8月28日理想的操作方法按照试剂盒说明书操作即可吗?操作中影响测定结果的关键环节写出具有可操作性的SOP第七十三页，共八十九页，2022年，8月28日人员培训培训所涉及的范围:仪器设备使用、维护和校准；试剂、方法原理；质量管理体系；相关法律法规、相关领域的新技术、新理念和新进展；实验操作技能等。如何培训：讲座、讨论、自学和参加培训班等。培训的评估：书面考试、实验考核、讨论心得、论文、综述等。对培训者的评估：培训者的背景、资历、在相关领域内的成就、所接受过的相关领域外部培训情况等。第七十四页，共八十九页，2022年，8月28日统计质控方法定性免疫测定质控物浓度的选择室内质控物的质检(确认)每块板质控物的数量质控规则Levey-Jennings质控图方法第七十五页，共八十九页，2022年，8月28日定性免疫测定质控物浓度的选择可选择S/CO值减去精密度测定中得到的三倍批间CV（通常的ELISA测定批间变异（CV%）在15%左右）与该S/CO值的乘积（意即三倍SD）仍大于1的质控血清作监测重复性的室内质控用

计算公式：S/CO（1-3CV%）=S/CO-3SD

S/CO比值可在1.5～4之间。同时选择S/CO处于1.0～1.5左右的质控血清以判断每次测定时试剂盒测定下限的有效性。第七十六页，共八十九页，2022年，8月28日室内质控物的质检(确认)使用前的质检：检测的S/CO比值是否合适、与前一批质控物的S/CO比值的比较使用中的确认：