版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
关于生物样本样品前处理第一页,共十五页,2022年,8月28日简介第二页,共十五页,2022年,8月28日前处理技术1、直接稀释法:简单、回收率高、成本低,但选择性差,应用有限2、超滤法:多用于测定游离药物浓度3、蛋白沉淀法:几乎适用于所有小分子化合物,简单快速,回收率高,但选择性差,基质效应严重4、液液提取法:基质效应降低,低成本,重复性好;但难以自动化,不适用于水溶性化合物的提取,极性相差较大的化合物同时提取困难5、固相萃取法:可实现自动化,基质效应降低,同时完成样品的富集与净化;但成本较高第三页,共十五页,2022年,8月28日液液提取法利用目标化合物在生物基质和与水不互溶的有机溶剂中溶解度或分配系数的不同,使化合物从生物基质中转移至有机相中。两相的分离需借助两相的密度差来实现原理:相似相溶分配系数:kA=yA/xAyA和xA分别表示在萃取相和萃余相中的质量比率选择性系数(分离系数):β=kA/kB=萃取剂的选择:1、选择性好:表现为选择性系数大。2、萃取容量大:表现为分配系数大。3、萃取剂与原溶剂的互溶度。4、萃取剂和原溶剂有较大的密度差。5、化学稳定性耐酸耐碱、抗氧化还原、耐热、无腐蚀。6、安全性好。7、经济性好。Tips:PH和温度对萃取有一定影响。第四页,共十五页,2022年,8月28日常用液液提取溶剂溶剂名称分子量沸点(℃)密度(g/mL)偶极矩(D)二氯甲烷84.9401.331.60乙酸乙酯88.177.10.901.78氯代正丁烷92.6770.89乙醚74.134.50.711.15戊烷72.236.10.630
环己烷84.280.70.780正己烷86.2690.660.08甲苯92.2110.60.870.36异丙醇*60.182.40.791.66四氢呋喃*72.1660.891.63乙腈*41.181.60.783.92正丁醇*74.11171.001.50水*18.01001.001.84注:“*”表示与水互溶偶极矩越小,极性越小第五页,共十五页,2022年,8月28日固相提取法
HLB(Hydrophilic-LipophilicBalanceCopolymer)材料的优点△水可浸润△反相保留△PH1-14范围内稳定△没有裸露硅羟基第六页,共十五页,2022年,8月28日固相提取法第七页,共十五页,2022年,8月28日固相提取法第八页,共十五页,2022年,8月28日固相提取法改变化合物PH,酸性保留,碱性洗脱第九页,共十五页,2022年,8月28日固相提取法改变化合物PH,碱性保留,酸性洗脱第十页,共十五页,2022年,8月28日固相提取法改变吸附剂PH,碱性保留,酸性洗脱第十一页,共十五页,2022年,8月28日固相提取法改变吸附剂PH,酸性保留,碱性洗脱第十二页,共十五页,2022年,8月28日LC-MS-MS方法需考虑的问题
基质效应※样品中除被检测化合物外的成分,对化合物测定造成影响的效应。※两种方式检测基质效应:柱后灌流法(定性),样品处理比较法(定量)。※解决方案:1、改变样品前处理方法。(液液提取和固相提取法可降低基质效应)2、优化色谱条件。(将干扰物和待测物分离)3、优化质谱条件。(更换离子源,APCI源优于ESI源)4、同位素内标。(终极办法,最有效)生物基质中的磷脂化合物易导致基质效应,大多数表现为基质抑制。建议:LC-MS-MS方法时监测m/z184→m/z184离子对。第十三页,共十五页,2022年,8月28日LC-MS-MS方法需考虑的问题
非特异性吸附※在低蛋白含量的生物基质(尿液,脑脊液,透析液等)中,化合物在存放/转移过程中与容器材料发生特异性结合的现象。※在相应的生物基质中或水中测试,做转管实验。※通常更换储存材料,或者在基质中加入一定量表面活性剂可消除非特异性吸附现象。
常见表面活性剂:Triton-X-100,吐温等1、表面活性剂需确立一个浓度范围而不
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 药物临床试验管理智慧树知到答案2024年杭州医学院
- 平板显示用化学品相关行业投资方案范本
- 双频、双模移动通信手机行业相关投资计划提议范本
- 扫路车相关项目投资计划书范本
- 基督教的兴起和法兰克王国 统编版九年级历史上册
- 安徽省2022年中考语文现代文阅读真题及答案
- 国民阅读(2022年湖南湘西中考语文试卷非连续性文本阅读试题及答案)
- Welcome+Unit+Listening+and+Talking 高一上学期英语人教版(2019)必修第一册
- 大牧场放牧业- 高考地理农业类型专项训练
- 常见的天气系统-锋与天气(第一课时)课件 2024-2025学年高二地理人教版(2019)选择性必修一
- 江西经济管理专修学院学员报名表
- 标准化智能安全工器具库房建设标准
- 人力资源管理主要权限表
- 五年级道德与法治学科上册课程纲要
- 五年级第一学期书法教案
- 符合性声明(食品接触用):不锈钢
- 最简易劳动合同书1页
- 《2021国标暖通图集资料》03SR417-2 装配式管道吊挂支架安装图
- 政府采购项目组织履约、验收方案、程序、办法
- UG考试时间安排
- 部编版二年级语文上册第三单元集体备课教材分析
评论
0/150
提交评论