食品卫生微生物学检验之副溶血性弧菌检验课件

一种重要的食源性致病菌主要与海产品消费有关我国沿海地区细菌性食源性疾病暴发最主要的致病因子国外海产品副溶菌限量美国FDA规定软体贝类总体副溶菌密度<104MPN/g；日本规定生食贝类与鱼片总体副溶菌密度<100CFU/g

副溶血性弧菌（Vibrio

parahaemolyticus）一种重要的食源性致病菌副溶血性弧菌（Vibrioparah1国外检验方法美国FDA方法－BAM

网络版第9章弧菌2004

第8版1995/1998加拿大

MFHPB-15海产品和贝类副溶血性弧菌的检验,1997MFLP-57海产品和贝类副溶血性弧菌的计数,1996日本

食品卫生检查指针微生物编,2004ISO标准

8914:1990（E）微生物学：副溶血性弧菌检验的总体指南NMKL

食品中致病菌的检测和计数,1997CCFRA

副溶血性弧菌检验17.1:1995国外检验方法美国FDA方法－BAM2以科学技术和实践经验为依据，经科学研究制定与国际方法接轨修订法同时体现定性、定量分析流程标准的修订原则标准的修订原则3实验室内研究实验室内研究4MPN计数与涂布平板计数的对比

MPN计数与涂布平板计数的对比5培养基上可疑菌落的准确性培养基上可疑菌落的准确性6染菌试验的实验室内研究

染菌试验的实验室内研究7染菌试验的合作研究染菌试验的合作研究8合作比对研究合作比对研究9样品制备增菌（定性/定量）分离纯培养初步鉴定确定鉴定报告检验方法文本要点样品制备检验方法文本要点108~18hFDA:16~18h增菌时间8~18h增菌时间11

TCBS平板科玛嘉弧菌显色平板圆的、半透明的、表面光滑的粉紫色菌落，直径2mm～3mm圆的、半透明的、表面光滑的绿色菌落，有粘性，直径2mm～3mmTCBS平板科玛嘉弧菌显色平板圆的、12TSA3个或以上纯培养TSA纯培养13使用MPN表首先，如果最高稀释度及其相邻较低稀释度的全部管均为阴性，剔除最高稀释度。只要这种情形存在，并且余下4个稀释度，继续剔除这些稀释度。其次，如果只余下3个稀释度，采用这3个稀释度，如A所示。使用MPN表首先，如果最高稀释度及其相邻较低稀释度的全部管均14使用MPN表如果还剩下3个以上的稀释度，那么找到全部管均为阳性的最高稀释度。此处存在3种情形。第1种情形，全部管均为阳性的稀释度在余下的3个最高稀释度中，采用这3个稀释度。示例B中，首先剔除最高稀释度，由于全部管均为阳性的稀释度在余下的3个最高稀释度中，因此使用这3个稀释度。示例C中，全部管均为阳性的稀释度在余下的3个最高稀释度中。使用MPN表如果还剩下3个以上的稀释度，那么找到全部管均为阳15使用MPN表第2种情形，全部管均为阳性的稀释度不在余下的3个最高稀释度中。那么，选择靠近全部管均为阳性的稀释度的2个更高的稀释度，并将更高稀释度的阳性管数加到第3个更高稀释度中，示例D中。全部管均为阳性的稀释度为1g，选择0.1g和0.01g，形成第3个稀释度0.001g的有阳性管的更高稀释度只要一个。使用MPN表第2种情形，全部管均为阳性的稀释度不在余下的3个16使用MPN表第3种情形，没有全部管均为阳性的稀释度。那么，选择最低的2个稀释度，将余下更高稀释度的阳性管数加到第3低的稀释度中。示例E中，没有全部管均为阳性的稀释度，最低的2个稀释度为10g和1g，将0.1g、0.01g和0.001g的阳性管数相加，形成第3个稀释度0.1g。使用MPN表第3种情形，没有全部管均为阳性的稀释度。那么，选17使用MPN表如果选择的3个稀释度不在表中，如有可能，重做试验。如果仍然需要这个MPN值，使用3个最高稀释度。示例F中，使用了3个最高稀释度。

使用MPN表如果选择的3个稀释度不在表中，如有可能，重做试验18使用MPN表如果这些稀释度仍不在表中，那么使用有阳性管的最高稀释度，

MPN/g=(1/m)*2.303*log10(全部管样品克数之和/阴性管样品克数之和)

其中，m表示具有阳性管的稀释度中每管的样品量。使用MPN表如果这些稀释度仍不在表中，那么使用有阳性管的最高19一种重要的食源性致病菌主要与海产品消费有关我国沿海地区细菌性食源性疾病暴发最主要的致病因子国外海产品副溶菌限量美国FDA规定软体贝类总体副溶菌密度<104MPN/g；日本规定生食贝类与鱼片总体副溶菌密度<100CFU/g

副溶血性弧菌（Vibrio

parahaemolyticus）一种重要的食源性致病菌副溶血性弧菌（Vibrioparah20国外检验方法美国FDA方法－BAM

网络版第9章弧菌2004

第8版1995/1998加拿大

MFHPB-15海产品和贝类副溶血性弧菌的检验,1997MFLP-57海产品和贝类副溶血性弧菌的计数,1996日本

食品卫生检查指针微生物编,2004ISO标准

8914:1990（E）微生物学：副溶血性弧菌检验的总体指南NMKL

食品中致病菌的检测和计数,1997CCFRA

副溶血性弧菌检验17.1:1995国外检验方法美国FDA方法－BAM21以科学技术和实践经验为依据，经科学研究制定与国际方法接轨修订法同时体现定性、定量分析流程标准的修订原则标准的修订原则22实验室内研究实验室内研究23MPN计数与涂布平板计数的对比

MPN计数与涂布平板计数的对比24培养基上可疑菌落的准确性培养基上可疑菌落的准确性25染菌试验的实验室内研究

染菌试验的实验室内研究26染菌试验的合作研究染菌试验的合作研究27合作比对研究合作比对研究28样品制备增菌（定性/定量）分离纯培养初步鉴定确定鉴定报告检验方法文本要点样品制备检验方法文本要点298~18hFDA:16~18h增菌时间8~18h增菌时间30

TCBS平板科玛嘉弧菌显色平板圆的、半透明的、表面光滑的粉紫色菌落，直径2mm～3mm圆的、半透明的、表面光滑的绿色菌落，有粘性，直径2mm～3mmTCBS平板科玛嘉弧菌显色平板圆的、31TSA3个或以上纯培养TSA纯培养32使用MPN表首先，如果最高稀释度及其相邻较低稀释度的全部管均为阴性，剔除最高稀释度。只要这种情形存在，并且余下4个稀释度，继续剔除这些稀释度。其次，如果只余下3个稀释度，采用这3个稀释度，如A所示。使用MPN表首先，如果最高稀释度及其相邻较低稀释度的全部管均33使用MPN表如果还剩下3个以上的稀释度，那么找到全部管均为阳性的最高稀释度。此处存在3种情形。第1种情形，全部管均为阳性的稀释度在余下的3个最高稀释度中，采用这3个稀释度。示例B中，首先剔除最高稀释度，由于全部管均为阳性的稀释度在余下的3个最高稀释度中，因此使用这3个稀释度。示例C中，全部管均为阳性的稀释度在余下的3个最高稀释度中。使用MPN表如果还剩下3个以上的稀释度，那么找到全部管均为阳34使用MPN表第2种情形，全部管均为阳性的稀释度不在余下的3个最高稀释度中。那么，选择靠近全部管均为阳性的稀释度的2个更高的稀释度，并将更高稀释度的阳性管数加到第3个更高稀释度中，示例D中。全部管均为阳性的稀释度为1g，选择0.1g和0.01g，形成第3个稀释度0.001g的有阳性管的更高稀释度只要一个。使用MPN表第2种情形，全部管均为阳性的稀释度不在余下的3个35使用MPN表第3种情形，没有全部管均为阳性的稀释度。那么，选择最低的2个稀释度，将余下更高稀释度的阳性管数加到第3低的稀释度中。示例E中，没有全部管均为阳性的稀释度，最低的2个稀释度为10g和1g，将0.1g、0.01g和0.001g的阳性管数相加，形成第3个稀释度0.1g。使用MPN表第3种情形，没有全部管均为阳性的稀释度。那么，选36使用MPN表如果选择的3个稀释度不在表中，如有可能，重做试验。如果仍然需要这个MPN值，使用3个最高稀释度。