饮食行业益生菌制品的质量控制与审批程序

益生菌制品的

质量控制与审批程序

中国疾病预防控制中心营养与食品安全所益生菌ProbioticsPRO--BIOTICSmeansForlife益生菌意意味着““为了生生命”FAO//WHO益生菌菌的定义义益生菌是是活的微微生物，，通过摄摄入足够够数量，，对宿主主起有益益健康的的作用。。FAO//WHO—Probioticsare::“Livemicroorganismswhichwhenadministeredinadequateamountsconferahealthbenefitonthehost”益生菌－－益生菌是是活的微微生物，，通过摄摄入足够数量量，对宿宿主产生生一种或或多种特殊且且经论证证的功能能性健康康益处。（欧洲食食品与饲饲料菌种种协会2002））PROBIOTICS－Probioticsarelivingmicroorganisms,,whichwheningestedorlocallyappliedsufficientnumbers,haveoneormorespecifieddemonstratedfunctionalhealthbenefitsforthehost(EFFCA2002)我国有关关益生菌菌的定义义：益生菌是指指对人和和动植物物有益的菌。由由益生菌菌生产的的产品称为益生生菌制品品，包括括活菌体、死菌菌体、菌菌体成分分及代谢产物。。益生菌的的应用食品、功功能性食食品、膳膳食补充充剂药品、饲饲料、化化妆品益生菌制制品作为为膳食补补充剂（foodsupplements）有有粉剂、、胶囊或或片剂乳酸菌Lacticacidbacteria是指能发发酵糖和和其它碳碳水化合物，产产生大量量乳酸的的细菌的通称。。美国功能能性食品品市场每每年以15~~20%的速速度增长长,产产值达33亿亿美元元。日本保健健食品销销售额20世纪纪90年代初达达4000亿日日元。（（Berner&O’Donnell,,1998））美国主主要要的功功能能食（Berner&O’Donnell,1998）添加植物物成分或或植物提提取物抗氧化、、降低心心血管疾疾病的危危险、降降低癌症症发生生的危险险、降低低高血压压的危险险添加生物物活性肽肽提高免疫疫系统的的功能、、提高矿矿物质的的活性等添加膳食食纤维预防便秘秘、降低低肠癌发发生的危危险、降降低血中中胆固醇醇添加ω-3多不不饱和脂脂肪酸降低心脏脏病发作作的危险险、降低低某些癌癌症发生生的危险险、提高高免疫系系统功能能等；添加益生生菌((probiotics)改善胃肠肠道功能能、提高高免疫系系统功能能、降低低肠癌发发生的危危险添加益生生原（prebiotics）改善胃肠肠道功能能、提高高免疫系系统功能能、降低低肠癌发发生的危危险常用的益益生菌双歧杆菌菌（Bifidobacterium）乳杆菌（（Lactobacillus）世界上有有70多多种含双双歧杆菌菌和乳杆杆菌的产产品，包包括酸奶奶、奶粉粉和冷冻冻甜点等等。日本有50多种种含有益益生菌的的不同形形式的奶奶制品欧洲酸奶奶对益生菌菌菌种的的基本要要求1首首先而且且最重要要的是安安全性必须来自自人体或或食品有长期安安全使用用历史2生生产菌种种的质量量控制3有有实验证证明具有有声称的的功能中国的益益生菌类类保健食食品调节肠道道菌群增强免疫疫力从1997年至至2004年一一共做了了28个个产品，，16个个含双双歧杆菌菌、9个个含乳杆杆菌。剂剂型包括括粉剂、、胶囊、、片剂、、口服液液。大部部分产品品声称菌菌数可达达108~1011cfu//g(ml)，，经检测测菌数可可以达到到108cfu//g(ml)，，液体体产品也也可达到到106cfu//g(ml)。常用的益益生菌菌菌种（Berner&O’Donnel1998）菌种种菌菌株株嗜酸乳杆杆菌LactobacillusacidophilusLa1等等保加利亚亚乳杆菌菌LactobacillusbulgaricusLb12乳乳杆菌菌LactobacilluslactisLa1植物乳杆杆菌Lactobacillusplatarum299v,LpO1鼠李糖乳乳杆菌LactobacillusrhamnosusGG,GR--1罗伊氏乳乳杆菌LactobacillusreuteriSD2112干酪乳杆杆菌LactobacilluscaseiShirota,744类干酪乳乳杆菌LactobacillusparacaseiCRL431发酵乳杆杆菌LactobacillusfermentumRC-IRC瑞士乳杆杆菌LactobacillushelvertiucsBO2菌种种菌菌株株青春双歧歧杆菌--Bifidobacteriumadolescents长双歧杆杆菌B.longumB536,SBT--2928短双歧杆杆菌B.breveYakult两双歧杆杆菌B.bifidusBb-11乳双歧杆杆菌B.lactisBb-02婴儿双歧歧杆菌B.infantisShirotaImmunitassB.EssensisDanone,,(BioActivia)B.LaterosporusCRL431枯草芽孢孢杆菌Bacillussubtilis--双歧杆菌菌和乳杆杆菌的安安全性问问题认为是安安全的理理由健康人体体的肠道道和泌尿尿-生殖殖道粘膜膜中数量量相当高高极罕见与与疾病有有关认为有安安全性问问题的理理由除干酪乳乳杆菌（（LactobacillusceseiShirota）和嗜嗜酸乳杆杆菌（L.acidophilusNCFM）有几几百年的的安全使使用历史史外，大大部分益益生菌没没有安全全使用历历史。2001年10月1日日-10月4日日FAO//WHO专家委委员会在在阿根廷廷科尔多多瓦就评评价食品品中含活活的益生生菌有关关健康及及营养问问题召开开会议。。会议认为为有必要要建立评评价食品品用益生生菌的系系统方法法指南，，以确定定其健康康声称。。

为建立益益生菌的的评价指指南、推推荐指标标和方法法成立FAO/WHO联联合专家家工作组组规定了确确定健康康声称应应提供的的资料目的是制制定对益益生菌的的最低要要求主要指食食品用益益生菌，，排除治治疗用生生物制剂剂和基因因修饰的的生物2002年4月月30日日-5月1日日在加拿拿大安大大略省伦伦敦市FAO//WHO联合专专家工作作组起草草了《食品中益益生菌的的评价指指南GuidelinesfortheEvaluationofProbioticinFood》1确确定益生生菌的属属/种//株用表型和和基因分分型方法法进行株的鉴鉴别益生菌的的有益作作用有株株的特异性按国际菌菌种保藏藏法保存存菌株

2功功能学学特征体外试验验胃酸耐受受试验、、胆汁耐受受性、粘膜粘附附性和／／或人上上皮细胞胞粘附性性对条件致致病菌的的抗菌活活性降低致病病菌表面面粘附能能力胆盐水解解酶活性性动物试验验益生菌的的安全性性问题全身感染染有毒代谢谢活性易感人群群过度的的免疫刺刺激基因转移移

FAO//WHO专家工工作组对对益生菌菌进行安安全性评评价的建建议

抗菌素耐耐药性类类型的测测定某些代谢谢活性（（D-乳乳酸盐的产生、、胆盐非非共价键键结合）的评评价

对人体副副作用的的评价售后消费费者不良良反应的的流行病学学调查如待评价价的菌株株属于已已知对哺哺乳动物物有毒毒性的产产毒菌种种，必须须测定其其产毒能能力待评价的的菌株属属于已知知具有溶溶血性，，必须测测定其溶溶血活性性

我国益生生菌产品品安全性评评价与质质量控制制益生菌作作为一类类生物活活性制品品，必须安全全、有效效、稳定定，益生生菌类保健食食品的生生产加工工有其自自身的特殊性性，如为为了使终终产品中中存在一定数数量的益益生菌活活菌体，，产品不能进进行消毒毒灭菌。。因此加加强其质量管管理确保保产品质质量尤为为重要。菌种安全全性要求求生物学、、遗传学学、功效效学特性性明确和稳定定。菌种及其其代谢产产物必须须无毒无无害。来源及国国内外安安全食用用资料。。安全性评评价资料料（包括括毒力试试验）。。生产菌种种的质量量控制建立种子子库一旦确定定某一菌菌种作为为生产用用菌种，，应建立菌种库库以确保保为每次次生产提提供充足足的、性状稳定定的菌种种，以避避免或减减少菌种种的污染及因菌菌种传代代过多而而导致遗遗传变异异。一般需要建建立三级级菌种库库，即原原代（原原始）种子库、、主代（（主）种种子库和和生产（（工作））种子库。。原代种子子库—指经研究究、筛选选、鉴定定后确定为食食品用益益生菌制制品生产产用菌种种，经扩大一代代后冷冻冻干燥一一定数量量的单支支菌种作为种子子，2～～8℃保存，一一般定0代。主代种子子库—原代种子子经扩大大培养得得到均匀的，，冷冻干干燥制成成一定数数量的单单支菌种，作为为制备生生产种子子库的菌菌种，2～8℃保存。主主代种子子一般采采用1～～3代。。生产种子子库—主代种子子经扩大大培养得得到的均匀匀培养物物，冷冻冻干燥制制成一定定数量的单单支菌种种，2～8℃保存，或或悬浮于特定定培养液液（保护护液），，分装安安培置–70℃以下保存存。每生生产一批批产品用一只菌菌种，用用于生产产之前要要进行部部分项目的的检定，，合格后后方可使使用，生生产种子一一般采用用3～5代。《益生菌类类保健食食品审评评规定（试试行）》第二条益益生菌类类保健食食品系指指能够促促进肠内内菌群生生态平衡衡，对人人体起有有益作用用的微生生态产品品。第三条益益生菌菌菌种必须须是人体体正常菌菌群的成成员，可可利用其其活菌、、死菌及及其代谢谢产物。。益生菌类类保健食食品必须须安全可可靠，即即食用安安全，无无不良反反应；生生产用菌菌种的生生物学、、遗传学学、功效效学特性性明确和和稳定。。第四条可可用于保保健食品品的益生生菌菌种种名单由国国家食品品药品监监督管理理局公布布。第五条国国家食品品药品监监督管理理局对保保健食品的的益生菌菌菌种鉴鉴定单位位进行认认定或认可，菌菌种鉴定定单位的的名单由由国家食食品药品监督管管理局公公布。益生菌类类保健食食品的菌菌种鉴定定工作应应在国家食品品药品监监督管理理局认定定或认可可的鉴定单位进进行。第六条申申请益生生菌类保保健食品品，除按按保健食品品有关规规定提交交申报资资料外，，还应提供以下下资料：：1、产品品配方及及配方依依据中应应包括确确定的菌菌种属名名、种名名及菌株株号。菌菌种的属属名、种种名应有有对应的的拉丁学学名。举例：长长双歧杆杆菌Bifidobacterium..longumB5362、菌种种的培养养条件（（培养基基、培养养温度等等）。3、菌种种来源及及国内外外安全食食用资料料4、国家家食品药药品监督督管理局局认定或或认可的的鉴定机机构出具具的菌种种鉴定报报告。5、菌种种的安全全性评价价资料（（包括毒毒力试验验）。6、菌种种的保藏藏方法7、对经经过驯化化、诱变变的菌种种，应提提供驯化化、诱变变的方法法及驯化化剂、诱诱变剂等等资料。。8、以死死菌和／／或其代代谢产物物为主要要功能因因子的保保健食品品应提供供功能因因子或特特征成分分的名称称和检验验方法。。9、生产产企业的的技术规规范和技技术保证证。10、企企业生产产条件符符合《保健食品品生产良良好规范》的证明文文件。申请注册册的保健健食品，，使用《可用于保保健食品的益生生菌菌种种名单》之外的益益生菌菌菌种的，，还应提供菌菌种具有有功效作作用的研研究报告告、相关关文献资料和菌菌种及其其代谢产产物不产产生任何何有毒有有害作用的资料料。由国国家食品品药品监监督管理理局组织织相关专业的专专家对菌菌种的食食用安全全性和功功能依据据进行评价后，，在按保保健食品品的评审审程序进进行评审审。第七条申申请请人够买买活菌种种冻干粉粉直接生生产保健健食品，，生产加加工工艺艺只是混混合、灌灌装过程程，本规规定第六六条第5项至第第10项项的资料料可由菌菌种冻干干粉原料料供应商商提供复复印件（（加盖原原料供应应商公章章）并提提供购销销凭证。经过长期期保藏的的菌种，，由于种种种原因因常易发发生变异、衰退退或死亡亡。变异异是生物物基本特特性之一一，当菌种处在在新陈代代谢水平平最低的的生活环环境之中中，生长繁殖受受到外界界抑制变变为停滞滞状态，，往往更更容易发生变异异。因此此各类菌菌种在保保藏期间间必须定定期检查，采取取措施防防止衰退退、变异异或死亡亡，发现现变异或衰退时时能及时时恢复。。第八条申申请注册册的用于于益生菌菌类保健健食品生生产的菌菌种应满满足以下下条件：：1、保健食品品生产用用菌种应应采用种种子批系系统。原原始种子子批应验验明其记记录、历历史、来来源和生生物学特特性。从从原始种种子批传传代、扩扩增后保保存的为为主种子子批。从从主种子子传代、、扩增后后保存的的为工作作种子批批。工作作种子批批的生物物学性状状应与原原始种子子批一致致，每批批主种子子批和工工作种子子批均应应按规程程要求保保管、检检定和使使用。在在适宜的的培养基基上主种种子传代代不超过过10代代，工作作种子传传代不超超过5代代。2、试制制单位应应有专门门的部门门和人员员管理生生产菌种种，建立立菌种档档案资料料，内容容包括菌菌种的来来源、历历史、筛筛选、检检定、保保存方法法、数量量、开启启使用、、等完整整的记录录。每年年向所在在地省级级食品药药品监督督管理部部门书面面汇报管管理情况况。3、菌种种及其代代谢产物物必须无无毒无害害，不得得在生产产用培养养基内加加入有毒毒有害物物质和致致敏性物物质。4、从活活菌类益益生菌保保健食品品中应能能分离出出与报批批和标识识菌种一一致的活活菌。第九条试试制益生生菌类保保健食品品的场所所应具备备以下条条件：1、建立立良好生生产规范范（GMP），，并逐步步建立危危害分析析关键控控制典（（HACCP））质量保保证体系系。2、具备备中试生生产规模模，即每每日至少少可生产产500L3的生产能能力，并并以中试试产品报报批。3、必须须有专门门的厂房房或车间间、有专专用的生生产设备备和设施施；必须须配备益益生菌实实验室，，菌种必必须有专专人管理理，应由由具有中中级以上上技术职职称的细细菌专业业的技术术人员负负责；制制订相应应的详细细技术规规范和技技术保证证。第十条生生产用菌菌种及生生产工艺艺不得变变更。第十一条条不不提倡倡以液态态形式生生产益生生菌类保保健食品品活菌产产品。第十二条条活活菌类类益生菌菌保健食食品在其其保质期期内活菌菌数不得得少于106cfu//mL((g)。。第十三条条益益生菌菌类保健健食品如如需在特特殊条件件下保存存，应在在标签和和说明书书中标示示。第十四条条所所用益生生菌菌种种在其发发酵过程程中，除除培养基基外，不不得加入入具有功功效成分分的动植植物及其其它物质质。第十五条条经经过基基因修饰饰的菌种种不得用用于保健健食品。。第十六条条本本规定定由国家家食品药药品监督督管理局局负责解解释。第十七条条本本规定定自发布布之日起起实施。。以往发发布的规规定，与与本规定定不符的的，以本本规定为为准。可用于保保健食品品的菌种种名单两歧双歧歧杆菌Bifidobacteriumbifidum婴儿双歧歧杆菌B.infantis长双歧杆