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文档简介
1、高效液相色谱测定丹参中丹酚酸B含量的方法研究【关键词】丹酚酸B高效液相色谱含量测定AStudyntheHPLethdfrSalvianliAidBinRadixSalviaeiltirrhizaeAbstrat:bjetiveTiprvetheHPLethdfrSalvianliaidBinRadixSalviaeiltirrhizae.ethdsDanshen(RadixSalviaeiltirrhizae)asextratedfr20inithultrasniaveethdinsteadf1hithrefluxing-heated.ResultsUltrasniaveethdisresip
2、leiththesaeextratinrate.nlusinUltrasniaveethdisrthtextendinginHPLethdfSalvianliaidBinRadixSalviaeiltirrhizae.Keyrds:SalvianliaidB;HPL;Deterinatin丹参为唇形科植物丹参SalviaeiltirrhizaeBge.的枯燥根及根茎。丹酚酸B(salvianliaidB)是从丹参中提取别离出来的一种既有咖啡酰缩酚酸构造又有新木质素骨架的水溶性成分,具有抗氧化去除自由基、抗前列腺肿瘤、防治神经退行性疾并抗肝纤维化等作用,具有较高的开发利用前景1。?中国药典?20
3、22版及如今报道中丹酚酸B的HPL测定方法中,供试品溶液的制备方法采取的是用75甲醇加热回流1h提取,以HPL进展含量测定,该法重现性好,但操作复杂,耗时费能,有必要进展改良研究。1材料与仪器药材购于广州广弘中药材,经南方医科大学中医药学院中药鉴定教研室陈兴兴鉴定为唇形科植物丹参(SalviaeiltirrhizaeBge.)的枯燥根及根茎。甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。Agilent1100高效液相色谱仪安捷伦科技,美国惠普HELETTPAKAR8453紫外检测器,BP110S电子天平德国,上海科导SK1200H超声波提取器工作频率:59KHZ,功率45。2方法与结果2.1丹酚酸B供试液
4、的制备2.1.1回流提取法2取本品中粉约0.2g同时另取本品粉末测定水分附录H第一法,精细称定,置具塞锥形瓶中精细参加75甲醇50l,称定重量,加热回流1h,取出放冷,再称定重量,用75甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取滤液,即得,编号为1。2.1.2超声提取法取本品中粉约0.2g同时另取本品粉末测定水分附录H第一法4份,精细称定,分别置于4个100l容量瓶中,参加75乙醇4l超声提取10,20,30,40in,精细量取1l置10l量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。编号分别为2,3,4,5。2.2HPL测定回流提取法和超声提取法丹酚酸B的含量2.2.2对照品溶液的制备精细称取在60减压枯燥4h
5、丹酚酸B对照品1.4g,加甲醇制成10l的溶液2,制成溶液浓度为0.14g/l。2.2.3标准曲线的制作取丹酚酸B对照品溶液2,4,8,10,12,14l分别进样,测定峰面积,以峰面积Y对进样量X进展线性回归,得回归方程:Y160.93X-6.976,r0.9999。结果说明丹酚酸B在0.281.12g与峰面积线性关系良好。2.2.4精细度实验取样品溶液5l,重复进样6次,结果丹酚酸B峰面积RSD为0.28。2.2.5重现性实验劝2.1丹酚酸B供试液的制备的5份供试液,进样测定,结果丹酚酸B峰面积RSD为1.26。2.2.6稳定性考察取样品溶液5l,分别在制备后0,2,4,8,12,24h测定
6、,结果丹酚酸B峰面积RSD为1.82,说明24h内溶液稳定。2.2.7回收率实验平行在5份样品溶液中参加丹酚酸B对照品溶液1.7l,依法操作,测定,结果平均回收率为95.5,RSD为1.14。2.2.8样品测定分别汲取以上1,2,3,4,5号各10l注入高效液相色谱仪,按上述色谱条件测定。结果见表1。表15种供试品溶液的测定结果略结果说明,超声提取10,20,30,40in同2022版?中国药典?中加热回流1h丹酚酸B的提取效果根本一样,提示在实际操作中,可以用超声提取20in代替加热回流1h的提取方法。3讨论利用超声波产生的空化现象可细化各种物质以及制造乳浊液,加速植物中的有效成分进入溶剂,
7、使其进一步提取,以增加有效成分的提出率。超声能会转变为热能,可以使药物组织内部的温度瞬时升高,加速有效成分的溶解。同时,超声波可以利用辐射压强和超声压强引起的机械作用,使生物分子解聚。使细胞壁上的有效成分溶解于溶剂之中。超声波产生的空化现象会产生大量的显微气泡,利用这些气泡的“定向扩散形成共振腔,破坏了细胞膜和生物大分子,加速有效成分的扩散。超声波能破坏植物药材的细胞,使溶媒能浸透到药材细胞中,从而加速药材中的有效成分溶解于溶媒中,以进步有效成分的提出率。超声波提取不会改变有效成分的构造,并且缩短了提取时间,进步了提出率,从而为中草药成分的提取提供了一种快速、高产的新方法。与?中国药典?方法比拟本方法一方面继承了原方法的优点,另一方面改良了原方法的一些缺陷,在保证丹酚酸B提取率的前提下,缩短了提取时间,含量测定结果与?中国药典?无显著差异。因此能更好地适用于常规检验工作和
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