2022年中药分析实验教案

1、中药分析试验教案试验一中药制剂的理化定性鉴别（4 学时）一、目的要求1、把握 TLC的鉴别方法；2、熟识中成药分析的理化定性方法；二、试验内容（一）化学定性鉴别和紫外分光光度法定性鉴别1、牛黄解毒片：（1）鉴别方法 取本品 1 片,研细,进行微量升华,所得的白色升华物,加新制的 1香草醛的硫酸 溶液 1 2 滴,液滴边缘渐显玫瑰红色；取本品 6 片（包衣者除去包衣） ,研细,加乙醇 10ml,温热 10 分钟,滤过,取滤液 5ml,加镁粉少量与盐酸 0.5ml,加热,即显红色；另取滤液 4ml ,加氢氧化钠试液,即显红 色,再加 30过氧化氢溶液,红色不消逝,加酸成酸性时,就红色变为黄色；（2

2、）摸索题 试述法的化学定性原理；2、复方丹参片（1）鉴别方法分光光度法：取本品1 片,研细,分次加水少量,搅拌,滤过,滤液移置100ml 量瓶中,并加水至刻度,取溶液2ml ,加水至 25ml ；在 283 2nm 的波特长有最大吸取；取本品 1 片,研细,进行微量升华,所得白色升华物,加新制的 1香草醛的硫酸溶液 1 滴,液滴边缘渐湿玫瑰红色；（3）摸索题试述法的化学定性原理；3、穿心莲片（1）本品为穿心莲浸膏片（2）鉴别方法取本品 5 片,除去包衣,研细,加乙醇 10ml,置水浴中加热至沸,加活性炭 0.5g,搅拌,滤过；取滤液 1ml ,加二硝基苯甲酸试液与乙醇制氢氧化钾试液的等容混合溶

3、液 2 滴,摇匀,即显紫色；另取滤液 1ml,加碱性三硝基苯酚试液 35 滴,显橙红色；取本品 3 片,除去包衣, 研细,加无水乙醇 25ml ,置水浴中加热回流 1 小时,放冷,滤过,滤液蒸干,加水 5ml,再加 2盐酸溶液调剂 pH 值至 1.0,在水浴上加热 30 分钟,滤过；取滤液,加 10亚硝酸钠溶液和 10硝酸铝溶液各 3 滴,摇匀,再加氢氧化钠试液0.51ml,显橙红色；（3）摸索题试述法的化学定性原理；4、银黄口服液（1）本品为金银花提取物、黄芩提取物经加工制成的口服液；（2）鉴别方法取本品 1ml,加 5硝酸钠溶液与10硝酸铝溶液各0.3ml ,生成黄色沉淀, 再加 5氢氧化

4、钠溶液使成碱性,沉淀即溶解,溶液显棕红色；取本品 0.1ml ,加水 10ml,摇匀,取溶液2ml,加 5二氯氧化锆溶液12 滴,溶液显黄色,再加盐酸12 滴,黄色不褪；（3）摸索题 试述法的化学定性原理；5、板蓝根颗粒剂（1）本品为板蓝根制成的颗粒剂；（2）鉴别方法 取本品 0.5g,加 5ml 甲醇使溶解, 静置,取上清液点于滤纸上, 晾干,置紫外光灯（365nm ）下观看,显蓝紫色；取本品 0.5g,加 10ml 甲醇使溶解,滤过,取滤液1ml,加茚三酮试液0.5ml ,置水浴中加热数分钟,显蓝紫色；（3）摸索题 试述第（ 2）点中法的鉴别原理；（二）薄层色谱鉴别1、牛黄解毒片（1）薄层

5、板制备 参看本书附录；（2）供试品溶液制备： 取本品 2 片,粉碎, 加氯仿 10ml 研磨,滤液蒸干, 加乙醇 0.5ml 使溶解,作为供试品溶液；（3）对比品溶液制备：取胆酸对比品,加乙醇制成每 品溶液；1ml 中含 1mg 的溶液,作为对比（4）点样与绽开：吸取上述两种溶液各5 l,分别点于同一硅胶G 薄层板上,以正已烷醋酸乙酯醋酸甲醇（20：25：2：3）的上层溶液为绽开剂,绽开,取出,晾干,喷以 10硫酸乙醇溶液,在105烘约 10 分钟；置紫外光灯（365nm）下检视；在供试品色谱中,在与对比品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点；（5）摸索题：试述本法分析原理？是鉴别处方中何种

6、中药材？2、银翘解毒片薄层色谱法；（1）薄层板制备：同 1、（1）项；（2）供试液制备：取本品 10 片,研细,加石油醚（6090） 20ml ,密塞,时时振 摇,浸渍过夜,滤过,滤液挥散至 1ml,作为供试品溶液；（3）对比溶液制备：取荆芥对比药材0.8g,加石油醚（ 6090） 20ml,按供试品溶液制备法制备；再取薄荷脑对比品,加乙醇,制成每 1ml 含 2mg 的溶液,作为对比品溶液；（4）点样、绽开、显色：吸取上述三种溶液各10 l, 分别点于同一含羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G 薄层板上, 以正已浣一醋酸乙酯（17：3）为绽开剂, 绽开, 取出,晾干,喷以茴香醛试液,于 105加

7、热至斑点显色清楚；供试品色谱中,分别在与对比品相应的位 置上,显相同颜色的斑点；（5）摸索题：试述本法测定原理,并说明本法与牛黄解毒片的薄层色谱法的区分要点；试验二甲苯法测定中药制剂中水分含量（4 学时）一 、 目 的 要 求掌 握 甲 苯 法 测 定 中 药 制 剂 中 水 分 的 原 理 和 操 作 方 法 ；二 、 基 本 原 理中 药 制 剂 水 分 测 定 的 常 用 方 法 有 烘 干 法 和 甲 苯 法 , 烘 干 法 适 用 于 不 含 或 少 含 挥 发 性 成 分 的 药 品 ,甲 苯 法 用 于 含 挥 发 性 成 分 的 药 品 ；香 砂 养 胃 丸 是 由 木 香 、

8、砂 仁 、白 术 、陈 皮 、香 附 、广 藿 香 、茯 苓 、半 夏 等 十 二 味 中 药 制 成 的 水 丸 ,其 中 有 多 味 中 药 中 含 挥 发 性 成 分 , 应 选 用 甲 苯 法 测 定 该 制 剂 中 水 分 的 含 量 ；三 、 仪 器 与 试 药1、 甲 苯 法 水 分 测 定 装 备 （ 见 附 图 ）（ 包 括 500ml 水 分 测 定 管 、 直 形 冷 凝 管 、 外 管 长 40cm ）；2、 电 热 套 、 分 析 天 平 ；3、 甲 苯 、 亚 甲 蓝 （ AR）；4、 铜 丝 ；5、 香 砂 养 胃 丸 （ 市 售 品 ）；四 、 操 作 步 骤短

9、 颈 圆 底 烧 瓶 、甲苯法水分测定装置将 香 砂 养 胃 丸 研 碎 , 取 约25g（ 约 相 当 于 含 水 量1 4ml ）, 精 密 称 定 , 置A瓶 中 , 加 甲 苯 约 200ml , 必 要 时 加 入 玻 璃 珠 数 粒 , 将 仪 器 各 部 分 连 接 , 自 冷 凝 管顶 端 加 入 甲 苯 ,至 充 满 B 管 的 狭 细 部 分 ；将 A 瓶 置 电 热 套 中 或 用 其 他 适 宜 方 法 缓缓 加 热 , 待 甲 苯 开 始 沸 腾 时 , 调 节 温 度 , 使 每 秒 钟 馏 出2 滴 ； 待 水 分 完 全 馏 出 ,即 测 定 管 刻 度 部 分

10、 的 水 量 不 再 增 加 时 ,将 冷 凝 管 内 部 先 用 甲 苯 冲 洗 ,再 用 饱 蘸 甲 苯 的 长 刷 或 其 他 适 宜 的 方 法 ,将 管 壁 上 附 着 的 甲 苯 推 下 ,继 续 蒸 馏 5 分 钟 ,放 冷 至 定 温 ,拆 卸 装 置 ,如 有 水 黏 附 在 B 管 的 管 壁 上 ,可 用 蘸 甲 苯 的 铜 丝 推 下 ,放 置 ,使 水 分 与 甲 苯 完 全 分 离（ 可 加 亚 甲 蓝 粉 末 少 量 ,使 水 染 成 蓝 色 ,以 便 分 离 观 察 ）；检 读 水 量 , 并 计 算 供 试 品 中 的 含 水 量 （ ）；五 、 注 意 事

11、项1、用 化 学 纯 甲 苯 直 接 测 定 ,必 要 时 甲 苯 可 先 加 水 少 量 ,充 分 振 摇 后 ,将 水 层分 离 弃 去 , 经 蒸 馏 后 使 用 ；2、 样 品 应 先 粉 碎 成 直 径 不 超 过 3mm 的 颗 粒 ；六 、 思 考 题1、 实 验 中 所 用 仪 器 、 器 皿 是 否 要 烘 干 ？ 为 什 么 ？2、 为 什 么 说 本 法 适 用 于 含 挥 发 性 成 分 的 中 药 制 剂 中 水 分 的 测 定 ？试验三矿物药石膏与玄明粉中重金属的检查（4 学时）一、目的要求 1、把握重金属检查的方法与原理； 2、熟识目视比色法的操作与判定；二、基本

12、原理目视比色法是以肉眼直接观看比较样品溶液与标准品溶液的颜色深浅,判定样品所含杂质是否超出规定限度；重金属在试验条件下都能与硫代乙酰胺或硫化钠反应显色,生成黑色硫化物沉淀,标准溶液常以 Pb 2+为代表,其原理为：在酸性溶液中 CH3CSNH 2+H20 CH3CONH 2+H2S Pb2+H2S pbS 黑色 在碱性溶液中 Pb2+Na2S pbS 黑色 +2Na+三、仪器与试药 1、电炉、 25ml 纳氏比色管及比色管架； 2、万分之一分析天平；3、量瓶、刻度吸管、烧杯、锥形瓶、量筒等； 54、其他试剂均为AR级；、石膏、玄明粉（市售品）四、操作步骤 1. 石膏重金属检查 取样品 16g,

13、加冰醋酸 4ml 与水 96ml,煮沸 10 分钟,放冷,滤过,用水洗涤并定容至 100ml；取 25ml 纳氏比色管 2 支,甲管中加标准铅溶液 2ml 与醋酸盐缓冲液 pH=3.52ml 后加水使成 25ml；乙管加样品滤液 25ml,在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液 2ml,摇匀,放置 2 分钟,同置白纸上,自上向下透视,乙管中显出的颜色与甲管比较,不得更深； 2. 玄明粉重金属检查 取 25ml 纳氏比色管 2 支,甲管中加标准铅溶液 2ml 与醋酸盐缓冲液 pH=3.52ml 后,加水使成 25ml,乙管取玄明粉 1.0g ,加醋酸盐缓冲液 2ml 与适量水溶解成 25ml；在甲乙两

14、管中分别加入硫代乙酰胺试液各 2ml,摇匀,同置白纸上,自上向下透视,乙管中显出的颜色与甲管比较,不得更深；附注精密称取在105干燥至恒重的硝酸铅0.1598g 置 1000ml 量瓶中,加硝酸 1.标准铅溶液的配制5ml,水 50ml 溶解后,用水稀释至刻度,摇匀,作为储备液；临用前,精密量取储备液10ml,置 100ml 量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得 每 1ml 相当于 10 g的 Pb ； 2. 硫代乙酰胺试液的配制 取硫代乙酰胺 4g,加水使溶解成 100ml,置冰箱中储存,临用前取混合液 由 1mol/L 氢氧化钠溶液 15ml,水 5.0ml 及甘油 20ml 组成 5.0m

15、l ,加上述硫代乙酰胺溶液 1.0ml ,置水浴上加热 20 秒钟,冷却,立刻使用； 3. 醋酸盐缓冲液的配制 pH3.5 取醋酸铵 25g加水 25ml 溶解后,加 7mol/L 盐酸溶液 38ml,用 2mol/L盐酸溶液或 5mol/L 氨溶液精确调剂 pH值至 3.5 电位法指示 ,用水稀释至 100ml,即得；五、摸索题 12石膏及玄明粉的重金属限量分别是多少. 在酸性溶液中重金属能否用Na2S作显色剂 .为什么 . 试验三冰片中砷盐限量检查（4 学时）一、目的要求1、熟识砷盐检查法的基本操作；2、明白砷盐检查的原理和方法（古蔡法）；二、基本原理本法为中国药典规定砷盐检查第一法；锌和

16、酸作用所产生的初生态氢与供试品中微量砷盐化合物反应生成挥发性砷化氢,再与溴化汞试纸作用生成黄色至棕色砷斑；与同条件下肯定量标准砷溶液所产生的砷斑比较,以判定供试品的砷盐限量；AsO33-+3Zn+9H + AsH3 +3Zn 2+3H2O产生的砷化氢与溴化汞试纸作用；AsH3+2HgBr22HBr+AsHHgBr2 黄色 AsH3+3HgBr23HBr +AsHgBr3 棕色 由于 AsO43-在酸性溶液中被 Zn 仍原的速度很慢,为提高反应速度,常在反应液中加入KI 及酸性 SnC12 将 AsO43 仍原为 AsO33,KI 被氧化生成 有 KI 的仍原剂存在；I2,以 SnC12 来仍原

17、,使反应液中维护AsO43-+2I-+2H+ AsO33-+I2+H2O AsO43-+Sn2+2H+AsO33-+Sn4+H2OI2+Sn2+ 2I-+ Sn4+溶液中的碘离子,与反应中产生的锌离子能形成协作物,使生成砷化氢的反应不断进行；4I-+Zn 2+ ZnI42-在酸性溶液中产生H2S气体, 干扰试验, 故需采供试品和锌粒中可能含有少量硫化物,用醋酸铅棉花吸取除去 H2S；H2S+PbCH3COO2 PbS +2CH3COOH 三、仪器与试药1、古蔡法测砷装置（见附图）；2、标准砷试液（1gAs/ml ）；碘化钾试液；酸性氯化亚锡试液；醋酸铅棉花；锌粒；溴化汞试纸；3、冰片（市售品）

18、 ；四、操作步骤测试前,先于导气管 C 中装入醋酸铅棉花 60mg（装管高度为 6080mm）；再于旋塞 D的顶端平面上放一片溴化汞试纸（试纸大小以能掩盖孔径而不露出平面为宜）,盖上旋塞 E并旋紧,即得；1. 标准砷斑的制备 精密量取标准砷溶液 2ml,置 A 瓶中,加盐酸 5ml 与水 2ml,再加碘化钾试液 5ml 与酸性氯化亚锡试液 5 滴,在室温放置 10 分钟后,加锌粒 2g,立刻将照上法装妥的导气管 C密塞于 A 瓶上,并将 A 瓶置 2540水浴中反应 45 分钟,取出溴化汞试纸,即得；2. 供试品的检查 取冰片 1g,加氢氧化钙 0.5g 与水 2ml,混匀,置水浴上加热使冰片

19、挥发后,放冷,加盐酸中和,再加盐酸 5ml 与水适量使成 28ml ,照标准砷斑的制备,自“ 再加碘化钾试液 5ml” 起,依法操作；将生成的砷斑与标准砷斑比较,不得更深；五、留意事项1、标准砷斑的制备应与样品检查法平行操作；2、制备标准砷斑应与供试品检查同时进行；因砷斑不稳固,反应中应保持干燥及避光,并立刻比较；3、浸入乙醇制溴化汞试液的滤纸的质量,对生成砷斑的色泽有影响,因此必需选用质量较好,组织疏松的中速定量滤纸,溴化汞试纸一般宜新奇制备；六、摸索题 1、砷盐检查第一法和其次法的异同何在？各自的关键环节是什么？试验四左金丸质量标准制定（8 学时）一、目的要求 把握中药制剂质量标准的主要内

20、容和制定方法 学习设计试验的思路和方法 明白中药制剂分析常用定性鉴别和含量测定方法 二、提要 1. 处方 黄连 600g 吴茱萸 100g 2. 制法 以上二味,粉碎成细粉,过筛,混匀,用水泛丸,干燥,即得；性状 本品为黄褐色的水丸；气特异,味苦、辛；功能与主治 泻火,疏肝,和胃,止痛；用于肝火犯胃,腕胁疼痛,口苦嘈杂,呕吐酸水,不喜热饮；三、方法 1. 质量标准方案设计：依据以上条件请同学设计本品的定性鉴别、检查和含量测定分析方案；定性鉴别要写明所用对比品或对比药材、鉴别方法； 检查要写明检查内容及方法；含量测定要写明样品提取净化方法、所测成分、测定条件、测定方法及含量运算方法；2. 在明白中药制剂质量标准制定基本方法和左金丸中各味药的定性鉴别和含量测定方法基 础上,参照 2022 版药典左金丸项下定性鉴别及含量测定方法拟定试验方法供同学练习；四、试验用品 分析天平 恒温水浴锅 容量瓶、三角瓶、烧杯、量筒、色谱柱等中性氧化铝（层析用）分光光度计样品：左金丸（市售品）其他试剂均为 AR级五、试验步骤1. 定性鉴别取左金丸 1g,研细,加乙醇 10ml,超声处理 20 分钟,放冷,滤过,滤液作为供试品溶液；另取吴茱萸对比药材 0.1g 、黄连对比药材 0.6g ,分别同法制成对比