《薄层色谱法》教学课件

1、7.薄 层 色 谱 法(Thin layer chromatography, TLC)8/3/20221第1页，共66页。7.1 概 述1.1938年俄国人首先实现了在氧化铝薄层上分离一种天然药物。1965年德国化学家出版了“薄层色谱法”一书，推动了这一技术的发展。2.因TLC法设备简单，分析速度快，分离效率高，结果直观，很快被用作定性和半定量的方法。 3.70年代中后期发展了高效薄层色谱。80年代以后发展了薄层色谱光密度扫描仪，和各步操作的仪器化，并实现了计算机化。8/3/20222第2页，共66页。4.薄层色谱与高效液相色谱的差别（特点）固定相和流动相TLC流动相流动靠毛细作用力，流动相选

2、择较少受限制，固定相不用再生。而 HPLC是在封闭的系统内，流动相流量靠泵控制，溶剂选择受检测器限制，固定相需再生。样品处理TLC要求没有HPLC严格。8/3/20223第3页，共66页。色谱分离 TLC可同时分离多个样品，并可采用相同或不同溶剂进行同向或双相多次展开，通常采用正相色谱，色谱后衍生化方便。 HPLC一次只能分离一个样品，通常采用反相色谱，色谱后衍生化受限制。对污染物抗受力强TLC颗粒物质、腐蚀性物质、不可逆吸附物质均无影响。 HPLC 颗粒物质、腐蚀性物质、不可逆吸附物质均有大的影响。8/3/20224第4页，共66页。7.2 薄层色谱法的基本原理1.保留参数（Rf值）用来表征

3、斑点位置的基本参数是保留因子，通常称作比移值，用Rf表示。Rf=Ls/L。，原点SRWLsL。Lr原点参比样品前沿8/3/20225第5页，共66页。注意：a.同一物质在不同展开方式中得到的比移值是不相同的。b.在同样溶剂的重复n次的多次展开后的比移值(Rf)n=1-(1-Rf)n 。相对比移值（Rx）Rf测量中一个重要的误差来源是难以确定溶剂前沿的位置，因此，引入相对比移值（Rx）。 Rx=Ls/Lr8/3/20226第6页，共66页。2.分离效能参数理论塔板数 n=16Ls/W 2 ，考虑静态扩散引起的起始斑点半峰宽的影响引入真实塔板数（n真实 ）n真实 =5.54Ls/（b0.5 - b

4、0 ） 2b0.5为样品斑点半峰宽， b0样品起始斑点半峰宽。塔板高度h真实= Ls/ n真实 8/3/20227第7页，共66页。 3. 容量因子（K）容量因子: 分配达到平衡后，组分在固定相的量（WS)与流动相中的量（Wm)之比。 K = WS / Wm = (cS / cm )（Vs/ Vm） =K（Vs/ Vm）其中K = cS / cm ，表示分配系数，即分离达到平衡时，组分在固定相和流动相的浓度之比。4.分离度8/3/20228第8页，共66页。另有n=16Ls/W 28/3/20229第9页，共66页。 0.1 0.3 0.5 0.7 0.9 RfR1.000.750.50.25

5、0Rf=0.3,R最高Rf在0.2-0.5,R变化不大Rf0.1或0.7,R下降 8/3/202210第10页，共66页。7.3 薄层色谱系统及其操作技术一. 薄层色谱系统组成1. 薄层板(1)未改性固定相硅胶为使用最广泛的薄层材料氧化铝有碱性、中性、酸性硅藻土为化学中性吸附剂纤维素天然多糖类聚酰胺为特殊类型有机薄层材料，对能形成氢键的物质有特别的选择性。8/3/202211第11页，共66页。(2)表面改性固定相疏水改性硅胶化学键合烷基亲水改性硅胶引入氨基、氰基、二羟基等，薄层板极性介于极性吸附剂和疏水改性剂之间（极性次序：硅胶氨基氰基二羟基 反相）。表面改性纤维素乙酰化纤维素(3)药典收载

6、的固定相有：硅胶类、硅藻土类、氧化铝类、微晶纤维素类等。颗粒直径一般要求10 40 um。8/3/202212第12页，共66页。2.载板玻璃板，放在饱和碳酸钠溶液中浸泡数小时，除去玻璃表面的油污。然后充分漂洗干净，干燥，置干燥器中备用。要求光滑、平整、洗净后不附水珠。3.黏结剂(1)无机黏结剂石膏（硫酸钙），添加石膏的吸附剂以字母“G”表示。没有黏结剂的吸附剂以字母“H”表示。无机黏结剂的优点是：耐高温，耐酸碱，但涂铺薄板动作要快，否则匀浆易凝固。薄层强度差。8/3/202213第13页，共66页。(2)有机黏结剂羧甲基纤维素钠（CMC）、淀粉、聚乙烯醇、高分子聚合物等。其特点是薄层强度高、

7、使用方便，但不能用浓硫酸作显色剂。 (3)荧光黏结剂在吸附剂中添加某种荧光指示剂，常用的荧光指示剂在254nm紫外光下发蓝色荧光的有钠荧光素、硫化镉、阴极绿等。在366nm有荧光的指示剂如彩蓝等。含有荧光指示剂的商品吸附剂以“F”表示，并以下标注明其激发光波长。例 硅胶HF254 8/3/202214第14页，共66页。4.薄层板涂铺要求：均匀、平整、无气泡引起的凹坑和龟裂。例：硅胶板（粒度1040um）硅胶G将硅胶置研钵中，加入少量水，研磨均匀，至无结块和气泡，再加入比例量的水(一般为1份固定相与3份水)，迅速研磨均匀，立即涂铺。硅胶或硅胶G 以CMC为黏合剂。配制0.2% 0.7% CMC

8、水溶液,放置过夜,使悬浮的纤维沉降,取上层用来配制吸附剂匀浆。8/3/202215第15页，共66页。反相薄层板制备以不同链长的正构烷烃为固定液, 配制成适当浓度的溶液(如5%硅酮油乙醚溶液),浸渍硅胶板。5.薄层板活化涂布后的薄层先在室温下阴干，在使用前置适当温度烘烤一定时间进行活化，然后置干燥器中备用。不同薄层活化条件略有不同，如：硅胶 110 1h氧化铝 110 30min8/3/202216第16页，共66页。6.点样要求配制样品的溶剂高度挥发性和尽可能非极性，否则易使斑点扩展。采用多次点加法，第二次点加时应待前一次点加的溶剂挥发后再进行。点样量应适中，过载会引起斑点拖尾，分离度变差，

9、以最小检测量的几倍几十倍为宜。手工点样工具：定容玻璃毛细管（1 5 ul），微量注射器。8/3/202217第17页，共66页。自动点样Limomat IV 喷样仪样品溶液通过气流成雾状喷向薄层，移动板台，使在薄层上流下样品条带。特点：适合于大量稀样品溶液的喷加；条带宽度不超过2 mm，有利于改善分辨率；便于狭缝式光密度计扫描；要求薄层板强度高。自动薄层色谱点样仪由计算机控制。药典规定：点样基线距底边2.0 cm, 样点直径2-4mm, 点间距离约为1.5-2.0 cm。8/3/202218第18页，共66页。7.展开方式多数采用直线形上行展开，薄层板水平角度以75 为最佳。展开距离一般为10

10、-15 cm。多次展开一次展开未达满意分离时，可将薄层板干燥后再次用同一种溶剂展开，可重复多次，直到混合物分离为止。分步展开混合物性质差别较大时，一种流动相不能有效分离时，可采用不同溶剂依次展开不同距离。8/3/202219第19页，共66页。连续展开使到达薄层上缘的溶剂不断蒸发，连续展开以增加展开距离。因无溶剂前沿，需要有个参照物同时展开，以计算相对保留值。二维展开在两个垂直的方向上进行展开。将样品点在薄层板的一个角上，展开适当距离后，挥干溶剂，再将薄层板以与原展开方向成90 的方向进行展开。原点128/3/202220第20页，共66页。离心展开薄层板以适当转速旋转时，流动相以适当速率转移

11、到薄层上。该技术主要用于制备色谱。锲尖技术圆形离心展开具有分辨率高的优点，但需要有一定的仪器装置。采用锲尖技术可以在一般的展开室中进行类似展开。薄层被刮掉部分溶剂前沿 8/3/202221第21页，共66页。8.检测物理方法紫外光下显示荧光或荧光淬灭化学方法加化学试剂显色，要求显色稳定、持久、专属、灵敏、线性良好。斑点定位方法碘蒸气法灵敏、简便，为通用显色法。将碘结晶放在密封的展开缸中，碘的升华，使缸内充满紫色的碘蒸气。将展开后的板挥干溶剂置碘缸中至薄层色谱上出现棕色斑点。放置时间不宜太长，否则背景吸附剂也吸附碘，使信噪比降低。用针头将斑点标记下来，放在通风处使碘挥发。8/3/202222第2

12、2页，共66页。7.3.4 流动相与展开体系1.液-固吸附 在该色谱中，溶质的保留和分离选择性决定于三个因素：溶解能力流动相溶质吸附剂相互作用竞争一.展开体系:8/3/202223第23页，共66页。2.液-液分配基于组分在互不相溶的两相间的溶解度不同而实现分离的一种展开系统。可在展开前，将薄层板浸入某种液体固定相。实际上在TLC中，分配与吸附是并存的（大气中水分也是一种固定相）。3.此外还有：化学键合相反相展开、化学键合相正相展开、离子交换、离子对色谱、凝胶、胶束、手性展开。8/3/202224第24页，共66页。二.溶剂强度参数和选择性1.溶剂的强度参数定义：溶剂强度参数用表示。流动相强度

13、越高，表示它与吸附剂相互作用力强。溶质的Rf值就越大,但选择性越小。为得到满意的分离，选用的流动相使溶质的Rf值在0.25 0.75之间为宜。溶剂强度也可用其在水中的溶解度参数 来表示。8/3/202225第25页，共66页。一些常用溶剂的溶剂强度与溶解度参数溶剂 溶剂 正己烷 0.01 7.3 环己烷 0.04 8.2苯 0.32 9.2 乙醚 0.38 7.4二氯甲烷 0.42 9.6 正丙醇 0.82 10.2正丁醇 0.70 / 四氢呋喃 0.57 9.1乙酸乙酯 0.58 8.6 氯仿 0.40 9.1甲乙酮 0.51 / 二氧六环 0.56 9.8吡啶 0.71 10.4 丙酮 0

14、.50 9.4乙醇 0.88 / 乙酸 1.00 12.4二甲亚砜 0.75 12.8 甲醇 0.95 12.9乙二醇 1.11 14.7 甲酰胺 / 17.9 8/3/202226第26页，共66页。2.溶剂优化规则：增加溶剂强度，使Rf值增大，但也可能降低分离能力。流动相中较强组分的体积比小于5%或大于50%，选择性最大，此时最有利于溶质与流动相组分的选择性相互作用。用乙醚或甲醇代替流动相中的一种较强组分，由于形成氢键可改善选择性。若出现斑点拖尾，可向流动相中加少量水，或降低薄层活性，有利于改善分离。也可采用两种强溶剂与一种弱溶剂组成的三元混合流动相，此时，溶剂强度由弱溶剂控制，而溶剂选择

15、性则由两强溶剂控制。8/3/202227第27页，共66页。3.斑点的扩散与形状 在TLC中斑点的移动与扩散是二维的，因为斑点在展开方向和与之垂直方向上的扩散速度是不相等的，展开剂的移动速度也是不等的，在单位体积或单位质量薄层内所含的溶剂量越接近溶剂前沿减少得越明显，直至溶剂前沿时为零，这一现象称为“溶剂的体积梯度”，在各种展开形式中均存在。当然，对于这一问题实际上只是在定量斑点浓度时才需要考虑。8/3/202228第28页，共66页。同时一种成分的色谱行为会受到混合物中其他成分的影响，这种影响的大小取决于混合成分的种类、浓度、以及斑点间的距离等。这种影响一般使分配系数变小。如两个相邻斑点中后

16、面的一个展开速度较其单独展开时为大。8/3/202229第29页，共66页。4.固定相的活度及其调节 在其他因素一定时，固定相活度增加，Rf值减少，反之亦然。可通过预吸附溶剂分子，调节其表面活性。例如可将活化薄层板放在相对湿度恒定的空间里来达到调节活度的目的。实际工作中常常使固定相预吸附一定量单一或混合溶剂蒸气，预吸附量越大，溶剂前沿运动速度越快，物质斑点的Rf值越小。预吸附还可能影响Rf在0.6-1.0之间的斑点的分离。8/3/202230第30页，共66页。在层析过程中发生的边缘效应就是由于这种因素引起的。尤其是使用混合溶剂时，极性较弱和沸点较低的溶剂，在薄层边缘容易挥发，使边缘部分的展开

17、剂中极性溶剂的比例增大，Rf相对增大。同一物质在同一薄层板上出现中间部分的Rf值比边缘的Rf值小，即边缘效应，若在展开前先将展开槽与薄层板用展开剂蒸气饱和后再展开，边缘效应可消失。采用双槽层析缸尤为有利。8/3/202231第31页，共66页。预吸附中展开中展开过程中用不同于展开剂的溶剂调节槽内气氛8/3/202232第32页，共66页。7.4 薄层色谱法定性、定量方法一.定性方法利用保留值测定Rf值测定相对Rf值，即Rx值。利用二维色谱（改变色谱条件，比较Rf值是否一致） sb1b2b2sb1sb1b2点样第一次展开第二次展开8/3/202233第33页，共66页。通过板上光谱图定性直接测定

18、薄层板上斑点的紫外或可见吸收光谱图，与平行点加的标准斑点的图谱对照。可建立标准条件下的化合物的光谱图库，用计算机检索定性。与其他技术连用TLC-付里叶变换IR联用TLC-MS联用8/3/202234第34页，共66页。二.定量方法1.间接定量将薄层分离后物质斑点定量地洗脱下来，再对洗脱液定量。分光光度法、HPLC法、GC法、质谱法2.直接定量斑点面积测量用透明纸覆盖在薄层表面，描出斑点界限，然后测量其面积。目测法比较系列标准与样品的斑点面积大小、颜色深浅，得到样品的含量范围。3.薄层仪扫描定量8/3/202235第35页，共66页。定量计算外标法：此法是薄层定量最常用的方法。定量时，点样量必须

19、准确，样品与对照品应点在同一块薄层板上。用已知含量的对照品得出样品含量的一种方法。内标法:选一个纯度高、化学性质稳定、在薄层上能与对照品分开的物质作内标物，并准确称取加到被测物中，根据内标物的质量算出被测物的含量。8/3/202236第36页，共66页。精密度重复性当待测组分的含量达0.5 ug/斑点时, 方法的重复性 (RSD) 应在3.0%以内。中间精密度多数情况下，RSD应在5.0%以内。再现性RSD一般应在10%以内。方法认证选择性以分离度表示，待测组分的Rf值在0.3 0.7之间稳定性考察在采样、样品预处理、贮存、展开，展开后处理等过程中的样品稳定性。线性与范围相应于待测组分检出量的

20、20% - 120%范围。 灵敏度通常以标准曲线的斜率表示。8/3/202237第37页，共66页。三. 薄层扫描1.薄层定量方法:直接法测定光照射色谱后，因被测物斑点的存在引起的透射光和反射光的变化。并通过随行标准比较待测斑点的量。间接法将部分照射光的能量转换成较长波长的荧光，即荧光测量。 薄层色谱定量测定的光学方法是基于测量斑点和薄层空白处光学响应信号的差值。8/3/202238第38页，共66页。透射光法测定组分对应的斑点对特定波长光的吸收度来确定含量。将薄层板从左至右移动，对斑点扫描，单色光透过薄层板后被记录下来，将测得的吸收度对Rf值绘制扫描曲线，得薄层色谱图光源单色器8/3/202

21、239第39页，共66页。反射光法一定波长的光照射薄层，穿进薄层内的光部分被薄层吸收，部分经过漫反射又折回表面成为反射光。当对薄层进行扫描时，测量其反射吸收度，可得到反射光谱。反射吸收度与物质含量有确定关系，可进行定量。光源单色器8/3/202240第40页，共66页。扫描方式直线式扫描照射在薄层板上的光束与薄层板作直线相对运动。光束固定，扫描板台运动。光束落在薄层上的截面为一长方形带。锯齿式扫描照射在薄层板上的光束与薄层板的相对运动轨迹呈锯齿形或矩形。直线扫描锯齿扫描轮廓曲线积分曲线8/3/202241第41页，共66页。斑点斑点A B CABCCAB对于不规则斑点，两种扫描结果不一样。同一

22、斑点从A、B、C三个不同方向扫描，锯齿扫描所得积分值变动小，而直线扫描所得积分值变动大。8/3/202242第42页，共66页。2.光学系统单光束单波长受光源稳定性和薄层质量影响严重。单光束双波长对背景不均匀引起的干扰有补偿作用，选择的两个波长应接近些。双光束单波长可补偿光源不稳引起的误差，但对板层不均匀无作用。光单色器检测器光波长1波长2检测器斩波器光单色器分光镜检测器检测器8/3/202243第43页，共66页。测量方式吸光度测量测定的是漫反射光。适合于本身有颜色或有紫外吸收的物质。I0IR 检 测 器8/3/202244第44页，共66页。荧光测量灵敏度较吸光度测量高，板层不吸收发射光，

23、测量噪音小，基线稳定。为消除激发光的影响，在板层和检测器之间必须加一块滤光片，以截去反射激发光，只让发射的荧光抵达检测器。滤光片荧光 检 测 器8/3/202245第45页，共66页。荧光淬灭测量吸附剂有荧光，样品斑点无荧光，在紫外光照射下，被测物在荧光背景上显示出暗灰斑点。本法适合于本身无颜色，又无特征紫外吸收或荧光的物质。该测量技术有三种形式：测荧光测紫外光测紫外和荧光8/3/202246第46页，共66页。扫描定量中的标准曲线校正薄层板上由于光被吸附剂散射，不能得到象通常溶液测定时的吸光度和浓度之间的简单直线关系。即物质浓度越大，薄层试样板上测定的反射吸光度比直线关系所示值越低。扫描仪系

24、统设计时考虑到这一问题，采用微机处理使标准曲线直线化。在理论曲线上选择吸光度0 1之间的7个点，将各吸光度值转换为直线上的值，得到一条通过原点的直线。8/3/202247第47页，共66页。吸光度1.00物质量经变换后的直线理论曲线直线化方法示意图校正过度校正适当校正不足未校正试样量积分值校正情况判断8/3/202248第48页，共66页。使用直线化功能时的注意事项发色试样的测定对于没有吸收的试样进行发色测定时，一般不使用直线化功能就可以得到近似的直线关系。试样变质时试样展开后，应马上进行测定，如果放置一星期后再测定。即使近似地呈直线状也往往不能通过原点，认为是试样变质所引起的。展开距离同一试

25、样等量点样，同样展开，展开距离不同将引起误差。展开方法使用直线化功能定量时，为避免展开距离不同产生的误差，实际定量时，将已知浓度的标准品在同一块板上展开是较理想的。8/3/202249第49页，共66页。7.5 薄层色谱法的应用药物鉴别采用标准对照法杂质检查杂质对照品法高低浓度法药物标准品对照法不允许有杂质斑点存在，即以方法灵敏度来控制杂质量。含量测定主要用于中药有效成分的分析8/3/202250第50页，共66页。一.薄层色谱方法的应用及其展望1.药方面的应用2.生物样品与毒物分析3.环境有害物质的分析4.食品分析5.其他方面的应用与展望8/3/202251第51页，共66页。应用薄层扫描即

26、薄层色谱与紫外分光光度或荧光光度分析联用，可进行各种药物的定量分析。应用硅胶GF 色谱板，杜迎翔等分离了合成药物铋甲西林片中的阿莫西林甲硝唑，谢苏婧等分离了尼美舒利胶囊中的尼美舒利，黄劲梅分离了施保利通口服液中的马卡因、月桂仑中的氮酮，分离后不必洗脱即可直接在薄层扫描仪上用双波长反射法锯齿扫描，准确测定各合成药物制剂中药物成分的含量。1.医药方面的应用8/3/202252第52页，共66页。此法更广泛应用于中草药与中成药主要有效成分定量分析，如应用各种改性硅胶G薄层色谱，马柏林等分离了杜仲叶中桃叶珊瑚甙，张尊听等分离了葛根、葛根注射液、玉泉丸中的葛根素;李多伟等分离了芦荟中的芦荟甙、银杏外种皮

27、中的白果酸;陈代贤等分离了真伪土茯苓中的土茯苓，葛早川等分离了黄连、香连丸、加味左金丸中的小檗碱、巴马汀和药根碱，然后用双波长反射锯齿薄层扫描定量分析各有效成分。康纯等用聚酰胺薄层色谱板分离了槐花米、黄芩复方芦丁片、双黄连口服液中的黄酮类化合物，并直接进行薄层扫描定量分析。李素琴应用硅胶60色谱板分离了蟾酥中的哇巴因，将哇巴因斑点洗脱液进行反向高效液相色谱定量分析。8/3/202253第53页，共66页。薄层色谱法分析的生物样品多为血清、血浆或尿液等，用来进行药物生物利用度的分析，检测临床用药的血药浓度，以利于诊断临床疾病等。毒物分析的内容比较广泛，包括植物毒素、真菌毒素、兴奋剂、药物中毒、走

28、私毒品、农药以及尸检、刑侦破案等方面的样品分析。2.生物样品与毒物分析8/3/202254第54页，共66页。 在生物样品分析领域，应用高效硅胶G薄层板分析了尿样中生物样品氯硝西泮代谢物7一氨基氯硝西泮；Uchikoba等应用硅胶GF 薄层板分析了血红素中类胰岛素酶；应用经0.27molL、pH=7的EDTA溶液修饰的硅胶G薄层扫描；定量分析了血样、尿样中的氟罗沙星和司帕沙星。在毒物分析方面,应用硅胶GF薄层板分析了咖啡因、安替比林、吗啡、安定等50种毒物。8/3/202255第55页，共66页。 3.环境有害物质的分析 主要包括农药及农药残留分析、有毒金属测定和多环芳烃测定等。Nemergu

29、t等应用单波长反射薄层扫描定量分析了土壤中多环芳香烃苯并a芘，殷少元等应用硅胶GF 薄层色谱与CGMS联用分析了水中残存农药灭多威，应用硅胶GF 薄层板定性分析了有机磷农药甲胺磷，Mahammad应用硅胶G+氧化铝G+微晶纤维素+硅藻土G自制板。 8/3/202256第56页，共66页。4.食品分析薄层色谱法还应用于分离测定食品中所含有的碳水化合物、维生素、有机酸、氨基酸等天然营养成分，也用于食品添加剂如色素、防腐剂等，以及某些真菌毒素如黄曲霉毒素的分析。应用硅胶GF 薄层高效色谱板分析了大豆磷脂酰胆碱(SPC)粗品中的大豆磷脂酰胆碱；刘宇红等应用硅胶GF 薄层高效色谱板，分析了食品甜味剂三氯

30、半乳蔗糖(TGS)；应用硅胶G薄层色谱单波长反射锯齿扫描定量分析了蔗糖酯中的蔗糖单酯与蔗糖多酯；应用硅胶G薄层色谱双波长反射锯齿扫描及与HPLC联用，定量分析了猪油中的胆固醇；应用硅胶高效板，单波长反射法吸收扫描定量分析了调味品姜黄中的姜黄素。8/3/202257第57页，共66页。 5.其他方面的应用 薄层色谱还适用于无机及金属有机化合物分析、染料及化妆品分析、石油和煤分析、手性化合物分离和化工及高分子材料分析。使用硅胶G薄层色谱与IR、NMR联用分析了溴敌隆乳油，并用紫外分光光度定量；使用硅胶G薄层色谱分析了23种氨基酸，确定了各自的相对展距；应用硅胶GF 薄层色谱、单波长反射锯齿扫描定量

31、分析了卤代萘与叔己酮碳负离子的亲核取代反应产物 萘基叔己酮。应用纤维素苯甲酸酯类衍生物三(苯甲酰基)纤维素(CTB)、三(4甲基苯甲酰基)纤维素(CTMB)、三(4硝基苯甲酰基)纤维素(CTPNB)和微晶纤维素，混合水和乙醇制备手性固定相薄层板，分析了6对含氮手性药物(普洛萘尔，异丙嗪，氯喹，氧氟沙星，D51，D66)，确定了各药物的R 值. 8/3/202258第58页，共66页。一.双波长薄层色谱扫描法测定甲基红含量 8/3/202259第59页，共66页。 学习利用岛津 CS-9301 型薄层色谱扫描仪测定甲基红含量的原理与方法，初步了解 CS-9301 型薄层色谱扫描仪的结构与使用。一、实验目的8/3/202260第60页，共66页。二、实验原理 用于定量的薄层色谱仪称为薄层色谱扫描仪或薄层色谱光密度计，用此种仪器对薄层上被分离的物质进行直接定量分析的方法称为薄层色谱扫描法。分析的基本原理是用一束长宽可以调节的一定波长、一定强度的光照射到薄层斑点上，对整个斑点进行扫描，用仪器测量通过斑点或被斑点反射的光束强度的变化达到定量分析的目的。本实验根据甲