九二-微生物室作业指导书-上

1、微生物室作业指导书通用局部第B版 XX XX XX生效日期：2021年12月 01日长沙XX医院检验科文件编号 文件编号文件名称编写者审核者版本生效日期WSW-SOP1-001细菌室工作守那么B/02016-12-01WSW-SOP1-002细菌室工作平安操作规程B/02016-12-01WSW-SOP1-003临床微生物室组长职责B/02016-12-01WSW-SOP1-004临床微生物室质量监督员职责B/02016-12-01WSW-SOP1-005临床微生物组质量监督员工作程序B/02016-12-01WSW-SOP1-006临床微生物室环境监测和控制程序B/02016-12-01WS

2、W-SOP1-007临床微生物室试剂管理程序B/02016-12-01WSW-SOP1-008临床微生物室内质控管理程序B/02016-12-01WSW-SOP1-009细菌室仪器维护保养及质控措施B/02016-12-01WSW-SOP1-010细菌室消毒隔离措施B/02016-12-01WSW-SOP1-011标准菌株保存及使用B/02016-12-01WSW-SOP1-012微生物室内务管理规定B/02016-12-01WSW-SOP1-013标本采集、接收及保存要求B/02016-12-01WSW-SOP1-014标本拒收标准B/02016-12-01WSW-SOP1-015温度失控处

3、理程序B/02016-12-01WSW-SOP1-016标本的接种和移种法B/02016-12-01WSW-SOP1-017微生物室标本操作流程B/02016-12-01WSW-SOP1-018显微镜检查法B/02016-12-01WSW-SOP1-019BACTEC9120血培养仪操作规程B/02016-12-01WSW-SOP1-020BACTEC9120血培养仪维护和校准B/02016-12-01WSW-SOP1-021一级生物平安柜操作规程B/02016-12-01WSW-SOP1-022一级生物平安柜维护程序B/02016-12-01WSW-SOP1-023文件名称B/02016-1

4、2-01WSW-SOP1-024生化培养箱的使用及维护B/02016-12-01WSW-SOP1-025TMQ.C型台式灭菌器的使用和维护B/02016-12-01WSW-SOP1-026作业指导书1表格B/02016-12-01序号文件编号需更改的内容更改内容批准人批准日期12345678910111213141516171819202122232425262728293031323334细菌室工作守那么1 实验室应保持整洁，接种台面每天下班前用消毒液擦抹1次，地面每周用消毒液拖擦1次。 2 接种室每日开始工作前，用紫外线照射30min，并对紫外线消毒效果定期检查，以便及时更换失效的灯管。3

5、 实验室内保持安静，严禁在实验室内吸烟、饮食和大声喧哗，尽量减少室内活动，无关人员禁止入内。4 标本处理及各项试验都应在操作间进行，接种环用完后应立即用火焰灭菌，沾菌玻片应浸在含有效氯1000mg/L的含氯消毒剂内。5 实验时手部污染，立即用75%乙醇溶液或碘酊进行皮肤消毒35分钟，再用肥皂洗手并冲洗干净。6 实验过程中，如果污染了实验台面或地面，应用含有效氯1000mg/L的含氯消毒剂覆盖其上30分钟，然后清洗，如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。7 假设出现着火情况，应沉着处理，切勿慌张，立即关闭电闸积极灭火，易燃物品必须远离火源，妥善保存。8 工作结束时应检查电器、酒精灯等是否关闭，用浸

6、有消毒液的抺布将操作台擦拭干净，并将试剂、用具等放回原处，清理台面，医疗废物分类收集，感染性废物放入感染性废物桶内，损伤性废物放入专用锐器盒内。9 离室前工作人员应用肥皂流水洗净。10 接种烈性病原菌时应着隔离衣。操作完毕后，先用消毒液泡手，再用肥皂、流水将手洗净，实验室用过的隔离衣、鞋、帽不得穿出实验室。11 接种标本时，使用一次性材料或无菌接种环。假设传染性标本沾染口、鼻、眼、粘膜或标本污染台面或地面，应迅速采取适当的消毒措施。12 污染的容器，应经消毒灭菌前方可洗涤。13 在检测烈性传染病病原菌时，应严格按照消毒隔离制度操作，并将菌种保存，向上级卫生机关及当地卫生防疫部门报告。14 对各

7、种临床标本应即时接种和处理，或采取有效的保存方式。15 如需保存菌种，应按菌种保管条例妥善保存，未经合法手续，不得将菌种随意发出。细菌室工作平安操作规程1 目的加强检验科的生物平安管理，防止标本交叉污染、防止疾病传播、保护环境、保障人体健康和平安。2 适用范围长沙九龙医院检验科临床微生物实验室3 职责 实验室平安工作由细菌室组长负责，其主要职责是指导平安工作，预防事故发生，催促检查本室人员，执行平安操作规程，为工作人员提供平安的工作环境。4 工作程序4.1实验室的消毒实验室分为污染区、半污染区，各区域的消毒处理方式各不相同。 保持实验室整洁，工作台每天在工作后至少用消毒液擦洗1次，每日上班前半

8、小时，翻开紫外灯照射30min。 对高危或烈性传染病(如霍乱、布氏杆菌病、炭疽、HIV等)检验后的标本，立即消毒处理。4.2 医疗废物的处理 要明确生活垃圾和医疗垃圾的处理方式不同,需要分开收集,生活垃圾用黑色塑料袋,医疗废物用黄色塑料袋。 盛装针头、破碎玻璃等锐利器具，必须采用专用利器盒，要保证不会出现破裂、被刺穿等情况的发生。 高危医疗废物必须送出前进行消毒处理。 在医疗废物运送过程中,应防止包装破裂和医疗废物的流失、泄漏和扩散，防止医疗废物直接接触人体。4.3 自我防护与职业暴露进入细菌接种室操作时，必须带口罩、手套、工作帽，操作完毕后应立即用肥皂流水洗手。实验室内的隔离衣、鞋，不得穿出

9、室外。不要用戴手套的手直接接触眼睛、鼻子和皮肤。 实验室应保持整洁，不要放无关的材料和设备。 不要戴着手套离开工作场所或在实验室周围走动。使用过的培养皿、细菌鉴定板、微量生化管及被细菌污染过的标本容器、物品等都视为具有传染性的病原物质,必须先行高压灭菌后，再进行清洗。 当一个试验程序结束后，要对工作台面进行消毒。 假设不宜消毒的标本或污染物，由卫生员送焚化炉燃烧处理。 如果传染性标本不慎溅入口、鼻内或标本倾出台面或地面，应迅速采取适当的消毒措施。 实验室假设发生平安隐患和潜在的危险因素应及时向科主任报告，并做好事故记录，并给予适宜的医学评价、监测、处理。5 对实验室工作人员的卫生和医学监督。5

10、.1 在开始工作时，进行临床检查是有益的。5.2如果实验室工作人员接触血液或病毒污染材料, 必须对原材料进行鉴定,如原材料呈HIV抗体或抗原呈阳性,必须报告并作出医学评价,工作人员接触后6周复查。临床微生物组长职责1 目的标准微生物组长职责范围,保证本专业组的各项工作按照既定的质量体系正常运行。2 适用范围适用于微生物专业组组长3 职责3.1 微生物组组长为本专业实验室学科带头人。在科主任的领导下，负责本专业的全面质量管理、科研、教学。3.2 负责本组人员的工作安排、业务学习和技术考核等，规划及落实本专业的开展方案，负责组织编写本组的作业指导书，经常检查执行情况。3.3 负责制定本专业的室内质

11、量控制方案。每日检查各检验工程的室内质控措施，分析质控数据，提出纠错方法，填写月质控报告。3.4 积极参加各临床检验中心组织的室间质量评价活动,审查签发室间质评回报表,分析质评成绩,提出改良措施,填写室间质评总结报告。3.5 亲自参加局部检验工作，解决本专业的复杂疑难问题，签审本专业的检验报告。3.6 经常深入临床科室征询对检验质量的意见,介绍新的检验工程及临床意义,有条件时参加疑难病例讨论,主动配合临床医疗工作。3.7 认真担负教学工作，指导进修、实习人员的学习，努力做好科内各类技术人员的培养，提高工作效力。催促实施学习使用国内外新技术，不断改良各种检验方法。3.8 结合临床的医疗实际情况，

12、积极开展科学研究，制定本专业的科研方案，并不断引进国内外的新成果、新技术、新方法，开展新工程，提高本专业的技术水平。3.9 检查催促检验人员贯彻执行各项规章制度的情况。3.10 负责本专业仪器设备和各种设施的管理,负责制定本专业试剂和实验用品的请购方案。3.11 专业组长外出前，应向科主任提出申请，临时指定人员负责代理。临床微生物室质量监督员职责1 目的 标准临床微生物专业组质量监督员的职责和工作程序，加强质量监督，保证检验质量。2 范围 适用于临床微生物专业组质量监督员3 职责 3.1 监督临床微生物专业组操作人员的检测工作是否按检验科质量手册、程序文件以及临床微生物作业指导书的规定进行，检

13、验报告及原始记录是否按要求进行。3.2 监督患者对临床微生物专业组效劳态度或质量的投诉、对效劳意见或建议有无得到相应处理，处理后患者是否满意，不满意的话有无改良措施等。3.3 监督临床微生物组是否对新职工进行培训，是否按培训方案执行和管理，人员业务培训是否按要求进行，对进修实习是否按方案执行和管理。3.4 监督操作人员对96-DL全自动分析仪、BAcT/ALERT3D60全自动血培养仪等仪器是否按方案进行仪器的检查和校准，是否有未授权人员操作仪器，仪器是否有唯一性标识，仪器的的使用有无记录及是否按时记录。3.5 监督环境温度、湿度、冷藏冰箱、冷冻冰箱、血培养仪、生化培养箱的温度有无记录，内务管

14、理是否符合检验科管理制度，平安管理是否符合规定。3.6 监督是否有试剂的请购和验收记录。3.7 监督标本交接、查对、检验、保存是否按要求进行。3.8 监督方法、开展新工程/换用新标准是否依据标准管理。3.9 监督标准物质中是否有溯源证明，比对及室间质评回报后有无分析报告，对不及格者有无处理措施3.10 监督质控是否按时按方案测定，质控物的失控是否按规定进行处理。3.11 质量监督员应每月按方案进行质量监督，同时应随时对操作人员的检测活动进行监督。微生物组质量监督员工作程序1 监督微生物组检测工作是否严格按照检验科质量手册、程序文件以及作业指导书的规定进行检验报告及原始记录是否按要求进行。2 监

15、督客户对微生物组效劳态度或质量投诉、对效劳意见或建议有无得到相应处理，处理后客户是否满意，不满意的话有无改良措施。3 监督微生物组是否有对新职工进行培训，是否按培训方案执行和管理；对进修实习生是否按方案执行和管理。4 监督微生物组是否按要求对全自动血培养仪、全自动细菌鉴定/敏分析仪进行维护、保养和质控并作好记录。5 监督微生物组是按方案对血培养培养仪、细菌鉴定/药敏分析仪进行仪器的检定和校准、是否有未授权人员单独操作全自动血培养仪、全自动细菌鉴定/药敏分析仪，仪器的维修和维护是否有正确标识。6 监督微生组对和冰箱、培养箱温度、仪器室温度、湿度等有无记录，对工作间、生物平安柜有无消毒记录，有无定

16、期对紫外灯效果进行检测并记录，微生物组内务管理是否符合检验科管理制度，平安管理是否符合规定。7 监督微生物组是否有试剂的请购和验收记录，有无细菌培养基和染色液等试剂的质控记录，如失控有无处理记录。8 监督微生物组标本交接、查对、检验、保存以及检测后废弃标本和其他污染物的处理是否按要求进行。9 监督微生物组检验方法、开展新工程/换用新标准是否依据标准管理。10 监督微生物组是否有标准菌株，以及标准菌株存放、使用有无按要求进行、有无购置、使用记录，室间质评结果回报后有无分析报告。临床微生物室环境监测和控制程序1 目的及时监测和有效控制微生物室的环境条件，保障微生物检验工作顺利开展，确保检测结果可靠

17、。2 范围微生物室室内环境温度与湿度；存放试剂的冰箱温度；血培养仪的温度；生化培养箱的温度等。3 职责微生物室组长负责环境监测与控制程序的制定，各组员轮流负责记录和反响信息给组长。4 环境监测程序4.1 环境条件：室内温度、湿度，每天一次，每日上午记录。4.2 各类冰箱：观察微生物组各个冷藏冰箱、冷冻冰箱温度，每天一次，每日上午记录。4.3 血培养仪：观察血培养仪显示屏显示温度和培养箱温度计显示实际温度，每日上午记录。4.4 生化培养箱：观察温度，每天一次，每日上午记录。5 环境失控处理程序5.1 记录人员发现环境温度与湿度失控时，及时通知组长。5.2 冰箱温度超出规定要求时，首先将标本或试剂

18、取出，放入符合温度要求的其它冰箱内，然后对失控原因进行分析，一般可按以下程序进行分析：温度计是否准确，冰箱门是否关严，电源是否有故障，制冷剂是否过少，压缩机工作是否正常等，针对上述失控原因及时进行处理。5.3 不能及时解决时应及时通知设备科,与有关厂商联系解决。5.4 及时填写失控报告，记录处理过程。6 记录表格WSW-SOP1-006-01 ?微生物室空气检测记录表?92-PF-016-02 ?冷冻冰箱温度记录表?92-PF-016-01 ?冷藏冰箱温度记录表?92-PF-016-05 ?室内温度湿度记录表?临床微生物室试剂管理程序1 目的标准临床微生物试剂合格供给商的选择，临床微生物试剂的

19、请购、保存、登记、报废和退货程序，使所购试剂符合质量手册和程序文件的有关要求，及时、准确地为临床提供可靠的检验报告。2 范围96-DL全自动微生物分析仪、全自动血培养仪及临床微生物室其他检测工程试剂。3 职责3.1 临床微生物组组长负责本组试剂合格供给商的评价和试剂的请购。3.2 科主任负责试剂合格供给商的选择和请购单的审批。3.3采购中心负责试剂的统一采购。4 程序4.1 合格供给商的选择 选用合格的诊断试剂是保证检验质量的重要环节。因此，对试剂选购中的关键环节实施控制。 为了评价供给商的质量保证能力，事前要调查被评定单位的生产能力、交货质量和信誉，评价其满足质量要求的能力，审查供给商的有关

20、证件，特别是有无FDA或SFDA批准文号。无批准文号的诊断试剂原那么上不能使用。 走访被评定供给商的其他用户,了解被选择供给商的产品质量是否符合要求，售后效劳是否满意，成交价格是否合理，要货比三家，选择质量高、价格低、效劳好的产品。 在调研的根底上，实验室应对可供货单位进行比拟，并编制相应名录。 在调研的全部材料上报科主任，科主任组织有关人员进行论证，将本科论证意见提交采购中心，然后按医院有关规定选择合格供给商。 试剂及低耗品管理员根据选择的合格供给商，编制?合格供给商名录?，交文档管理员保存，以便请购试剂时参考，各室组长负责跟踪对供给商评价的持续有效，如有变化及时反响给科主任并修改。4.2

21、试剂的请领 临床微生物组组长根据本室检验工程所用试剂消耗情况，不定期到科室仓库请领，并填写?消耗品请领登记表?。4.3 试剂的验收和保存 试剂购进后由试剂管理员进行验收。 试剂管理员应根据本组试剂请购单、发票清单对所购试剂的包装规格、单价、数量、有效期等进行核查，核查准确无误后才在发票反面签字，并在?消耗品入库验收登记表?上登记、签字，并在科室软件试剂管理系统中录入试剂的出入库信息。科试剂管理员按月将试剂请领单和验收登记本装订成册，归档保存。 领取的试剂应严格按照试剂要求保存在本室冰箱内，微生物试剂管理员每月一次检查库存量及失效日期，以便及时请购试剂和防止使用变质、过期的试剂。4.4 试剂的报

22、废和退货 贮存试剂一旦发现过期、失效应立即停止使用，同时由试剂管理员填写?试剂报废申请单?，经科室主任批准后作报废处理，?试剂报废申请单?由文档管理员存档，并在软件系统中录入试剂报废信息。 新购进试剂经试验质量不合格时，由试剂管理员在发现当日填写验收报告，并注明试剂批号、到货日期、数量、并进行退货申请，一式两份，经科主任审批后，一份由采购中心退给厂家，一份存档。5 记录表格WSW-SOP1-007-01?微生物室常用试剂目录表?WSW-SOP1-007-02?微生物室其他试剂目录表?WSW-SOP1-007-03?微生物室常用试剂使用记录表?WSW-SOP1-007-04?微生物室其他试剂使用

23、记录表?92-PF-005-02 ?消耗品入库验收登记表?92-PF-005-03 ?消耗品请领登记表?92-PF-005-09 ?试剂报废申请表?临床微生物室内质控管理程序1 目的对本组微生物检验程序进行室内质量控制，以保证检验结果的准确性。2 适用范围临床微生物组常规细菌鉴定、细菌药敏检测；革兰氏染色、抗酸染色等。3 职责3.1 临床微生物组长 负责制定本组室内质控规那么； 负责制定检验过程的质量控制程序； 负责监督本组室内质控及失控处理的执行； 定期汇总相关记录； 将室内质控数据上报、并进行分析和处理；3.2 技术人员 负责执行本岗位检验过程的质量控制程序； 负责记录质控情况，发现失控及

24、时上报专业组长； 负责做好仪器的维护保养。4 室内质量控制管理程序4.1 药敏试验室内质控细菌鉴定/药物敏感试验的精确度受多种因素的影响，细菌的接种量，试验的稳定性，培养基的质量和操作人员的熟练程度、抗菌药物纸片在试验和贮存过程中活性下降或失效、WalkAway40SI全自动微生物分析仪的状态等均影响细菌鉴定与药物敏感试验的结果。 建立标准操作规程实施质控需要有一套完整的标准操作规程文件做保障、如仪器的使用、维护操作规程，试剂、质控品，标准菌株的操作规程。 仪器的校准和质控试剂更换新批号及仪器维护保养或故障修复后，应进用相应质控菌株进行监测。对试剂的要求试剂的供给商或机构应当是注册合法、证件齐

25、全，要有营业执照、经营许可证，其提供的产品应具有生产批准文号或进口注册证。 失控处理：染色结果与预期结果相反时或染色性不定时，应视为失控。如失控，应立即查找原因。质控频率：每日一次；试剂更换批号后，应进行质控。 失控处理：如失控，应立即查找原因。5 质控菌株的保存7 每月室内质控数据的保存每个月的月末，应将当月的所有质控数据汇总整理后存档保存，存档的质控数据包括：当月的所有工程原始质控数据。当月的失控报告单包括违背哪一项失控规那么，失控原因，采取的纠正措施。每月质控小结。卫生部临检中心、福建省临床检验中心及南京军区质控中心的室间质评结果回馈。8 室内质控失控处理程序1. 做可能影响检测的仪器相

26、应局部保养，仍失控进行下一步。2. 请仪器工程师协助处理，直到质控在控后重新使用。9. 对不符合项检测的评估室内质控及室间质评失控后，对当时同批检测的患者样本的影响进行评估： 9. 1 当发现不符合检测项时，应记录不符合的工程、发生的时间、发现人等9. 2在不符合项发生后应对检测结果进行可接受性评价，如说明不符合检验的意义、是否需暂停工作、停发报告、通知客户等。9. 3应对发生的不符合项进行原因分析。9. 4采取纠正措施，防止同样的问题再次发生。并由质量监督员负责跟踪其纠正措施的效果。9. 5不符合项的纠正措施效果有效后，由质量负责人批准恢复工作。细菌室仪器维护保养细菌室主要仪器为全自动血培养

27、仪、生物平安柜，为了使仪器能够高质量的正常运行，使仪器报告的结果准确可靠，应做好仪器的维护保养。1.1日保养上班开始工作前和下班离开前要检查仪器的工作状态是否正常。每天擦洗仪器外表。翻开仪器机门从存放温度计的培养孔查看实际温度,应在34.535.5之间。检查仪器内四个状态指示灯的状态。1.2 周保养 清洁空气过滤网罩。 检查仪器培养架的指示灯是否损坏。1.3 月保养 检查稳压电源状态 检查主机培养瓶检测孔，清洁控内纸片及杂物。 清洁主机外壳和电脑。2 生物平安柜的维护、保养2.1 清洗台面及墙体，保持设备整洁。用柔性的清洁剂加水清洗箱体外外表,用清水清洗玻璃门。2.2 用紫外线灭菌， 或喷洒酒

28、精对操作区空间消毒。2.3 每个月做1次彻底的清洁保养,并对设备内部进行消毒处理。细菌室消毒隔离措施1 每天工作前用消毒液消毒工作台，上班前开紫外灯进行空气消毒30min。2 非必要品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。3 使用后的载玻片、盖玻片等用消毒液浸泡，经煮沸后清洗或丢弃。使用后的平皿、试管等经高压灭菌后，清洗或丢弃。4 试验后的血液标本、所有用于试验的反响板等放入感染性废物桶内，由卫生员收集经高压处理后送医院医疗废物暂存地。5 所有的临床标本培养物，放入黄色塑料袋，由卫生员收集送至医院医疗废物暂存地，再由地方专门机构收集进行燃烧。6 取材最好用一次性工具，不能采用一次

29、性工具者，每次取材前均应彻底消毒。7 用于浸泡各种器械如刮菌刀、持物钳、镊子等的消毒液要定期更换。8 不慎发生临床标本或培养物污染工作台，不要立即用水冲洗，应先用纸巾、布等敷料加上消毒液如稀释用84消毒液消毒30分钟后，然后再清洗。如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。9 实验时手部污染，应立即用肥皂洗手并用流动水冲洗干净，再外用消毒液进行皮肤消毒。 10. 记录表格WSW-SOP1-009-01?细菌室紫外灯效果记录表?WSW-SOP1-009-02?细菌室紫外灯消毒记录表?标准菌株保存及使用1 目的标准临床微生物室标准菌株的采购、运输、验收、使用和保管程序，以保证检验结果准确可靠。标准菌株是

30、细菌室室内质控工作必不可少的，重要的生物资源，我室的标准菌株主要购自卫生部临检中心和杭州天和微生物，为了让标准菌株能够得到合理的应用，特制定以下规定。2 范围适用于临床微生物室96-DL全自动微生物分析仪，全自动血培养仪及手工药敏试验工程所用的标准菌株。3 职责3.1 临床微生物组组长负责本组标准菌株的请购,科主任负责请购单的审批,采购部负责统一采购。3.2 临床微生物组试剂管理员负责标准菌株的验收和保存。4 工作程序4.1 标准菌株的请购和验收 临床微生物组长根据本组所需标准菌株，进行申购。 对采购来的标准菌株或室间质控样品在进行验收时,应注意其运送是否符合其要求、外包装是否完好，物品是否损

31、坏，使用说明书、保存条件以及有效期是否满足相关要求。假设存在疑问，需要及时处理，并做出相应的记录。在接收室间质评质控样品时，还应注意其建议的测定日期。 指定专人负责菌种的保存，双人双锁，并建立所保存菌种目录清单，对每批购置的标准菌株做好登记，包括菌种的菌名、编号、来源、购置时间、保存方式、传代次数、保存位置、记录人等。 每次使用标准菌株都应作好使用记录，包括标准菌株的名称、编号、来源、使用时间、传代次数、数量、使用者、用途等。 购置的新标准菌株初次应大量增菌，然后分装在40%甘油中，-20以下保存并做好记录。4.2 标准菌株按规定要求存储,并记录保存的环境条件。保证其在有效期内使用，如发现过期

32、、失效时，必须及时清理，以防止误用。4.3 标准菌株的报废退货同试剂的处理程序。4.4 实验室必须建立菌株销毁制度，销毁保存的菌株应经组长批准，并做好记录，记录内容包括：菌名、时间、销毁数量、原因、经办人等。微生物室内务管理规定1 目的明确细菌组各岗位职责，加强岗位责任心，提高工作效率，保证本专业组的各项工作按照规定的质量体系正常运行，及时、准确地为病人报告检验结果。2 范围细菌室各工作人员3 职责3.1 各岗位应保质保量完成以下日常工作 各检测工程标本的验收、登记。 各岗位人员按分工对标本进行检测。 细菌鉴定与药敏试验室内质控的运行。 各岗位职责检测工程结果的报告和检验单的签发。 试剂申请、

33、验收、保存。 仪器的日常保养和维护。 生物平安柜使用情况并签名。3.2 岗位具体工作安排 岗位A: 各类培养基的购置及入库; 每周试剂领取; 培养基配制工作; 每周质控菌株的转种工作;做药敏质控; 核对报告单 岗位2：各类表格的登记; 日常消耗品领取及登记 ; 找结核菌; 桌面和仪器消毒工作; 打印报告单; 质量监督员 组长职责：细菌室全面质量控制；实习生带教工作；菌种保存工作双人双锁；每周工作流程的分配；细菌室各仪器的保养维护审核及发送；各种培养阳性结果及时进行登记；完成室内质控工作，福建省临检中心、南京军区质控中心及卫生部临检中心的微生物室间质控。4 细菌室记录内容明细4.1 环境条件：室

34、内温度、湿度每天一次，上午记录。4.2 恒温设备：培养箱、鉴定仪、普通冰箱的温度，每天一次，上午记录。4.3 分析仪器：常规每日保养一次，发现问题随时详细记录；室内、室间质控按要求测试完毕后，及时手工记录及存档。4.4 标本与结果：不合格标本记录，危急值报告记录、三级报告记录、口头报告记录 。4.5 其他记录 5 细菌室室内环境条件控制范围 温度1830，湿度4080%。标本采集、接收及保存要求1 总那么用于细菌培养的标本在收集时应注意严格无菌操作和及时送检，检测后标本应妥善处理。2 临床标本的采集2.1 下呼吸道分泌物(痰液):嘱患者早上起床用清水漱口,不要刷牙,立即从下呼吸道咳出第一口痰,

35、置无菌塑料痰盒中,及时送检。2.2 尿液(中段尿)：护理员协助采取中段尿约3 ml置无菌试管中，及时送检。2.3 粪便:取有粘液、脓血局部的粪便置于大便专用杯中，如为稀水便，可直接收集于专用杯中及时送检。2.4 眼、耳、鼻、咽拭子：将棉拭子沾取少许无菌生理盐水，然后采取可疑部位的分泌物，倒置于无菌试管内，及时送检。2.5 脓液：用沾生理盐水的棉拭子沾取脓液，尽量多取一些，然后将棉拭子置于无菌试管中，或用注射器抽取脓液，及时送检。2.6 血液： 凡疑心菌血症和败血症的患者，采血培养时，应尽量在未使用抗菌素前采血，如已使用过抗菌素，应尽量选择抗菌素在体内浓度最低时采血，或在病人第二次使用抗菌素之前

36、采集血培养标本；病人发热或寒颤时采集也可。 成人每次采血810ml，小儿采血23ml，按照实际情况选择相应类型的血培养瓶。 严格消毒病人采血部位和血培养瓶口，抽一定量血液后,无菌注入血培养瓶内,轻轻摇匀。 从抽血到注入瓶内，动作要快，防止血液凝固,同时要及时送检。 2.7 穿刺液：胸腹水、心包液、关节腔液、鞘膜积液：严格无菌抽取后，注入含肝素抗凝的无菌试管中，轻轻颠倒试管10余次，使肝素与穿刺液混匀到达抗凝的目的，或直接无菌注入血培养瓶内及时送检。3 标本的接收3.1护士采集好的标本，由护工在护士站进行刷条码传送后，再送到检验科再次刷条码进行传送确认后，由检验科工作人员进行排样确认后接收。具体

37、接收程序见LIS系统程序。3.2 标本接收必须由微生物室正式工作人员进行接收，具有检验专业文凭，接收人员必须对样本的合格性进行把关4 临床标本的保存细菌室标本原那么上要求及时送检，及时处理，不得保存。标本拒收标准1 脑脊液培养：如标本为非无菌管采集那么拒收。2 中段尿培养：如标本为非无菌管采集那么拒收。3 下呼吸道标本培养：肉眼观察标本是否有较多泡沬或明显为口水者，挑取痰标本直接涂片镜检，WBC25/LPF不适合做细菌培养。4 脓液及创伤分泌物培养：如标本为非无菌管采集那么拒收。5 穿刺液培养：如标本为非无菌管采集那么拒收。6 生殖道分泌物培养：如为淋球菌培养没有直接接种到淋球菌培养基上或者培

38、养基有问题那么拒收。7 各类培养标本原那么上都要求无菌采集并及时送检、及时接种、及时培养、不能保存。除非特殊情况可置于冰箱保存，别离脑膜炎细菌时，应注意标本的保暖。8 表格记录92-PF-020-02 ?不合格标本记录表?温度失控处理措施1 每天上班记录培养箱、冰箱的温度于温度记录本上，如发现生化培养箱的温度超过37不包括37或低于34不包括34；冷冻冰箱的温度超过-10包括-10或低于-30包括-30应按以下程序进行处理。2 当发现冰箱、培养箱温度失控时，应立即追测其失控的时间和原因。2.1 如失控的原因可以马上纠正(如冰箱断电、冰箱门未关好、温控调节器未正确控制、冰箱严重结霜、温度计损坏等

39、)，那么由本室人员马上纠正并填写失控报告。2.2 如冰箱、培养箱本身出现机械故障，本室人员应马上通知维修部或维修商，同时根据排除故障时间的长短是否会对其中的物品质量造成影响而采取相应的措施如把里面的物品转移到能满足需要条件的环境中，并填写失控报告单。3 培养箱中的培养物应全部拿到工作台，检查培养物的生长情况。如果培养基的菌落生长良好,那么按常规程序进行检验。 如果培养基的菌落生长受抑制,那么取标本重新接种,如标本确实无法再次接种,那么应与临床医生联系、解释并请医生重新采集标本送检。 如有药敏试验,那么重新做药敏试验,并写明原因。4 故障处理过程中应及时贴上红色标识，把温度记录本上用红笔记录失控

40、的温度度数，故障处理后应利用培养箱、冰箱的温度调节器，把温度调回到规定范围的中值，并把专业人员的检查的结果记录在仪器的档案袋中。另外还需填写?内部质量控制失控报告单?，当温度再次受控时，记录温度的读数并上报负责人，申请恢复工作。 标本的接种和移种法接种标本是细菌实验室的一项根本操作技能，目的是使细菌能得到充分的生长和能别离出单个菌落获得纯培养而供分析鉴定之用，所以作此项技术的操作应按以下方式进行。1 左手的操作要点：左手负责持平板、试管、烧瓶等物品，操作中，左手应尽量减少摆动，否那么，不利于保持物品的无菌状态。左手持物品时，最好固定在一个空间方位上，以防止因移动使空气中的细菌进入器皿，造成随机

41、性污染。所持的器皿其开口尽量防止向上，持平皿时，可以让平板的外表与地面尽量垂直，试管与器皿烧瓶也可倾斜，当从标本器皿或平板上挑取接种物或菌落后应立即塞上试管塞或扣上平皿盖，随即接种标本。2 右手的操作要点：捏有接种工具的右手，将接种标本之前应作好接种环或针、镊子等工具的火焰消毒工作，待冷却后再挑取接种物，在挑取标本后，其接种工具应尽量防止接触试管壁及试管口等，随后将接种物在培养基上别离划线。3 移种或接种的根本步骤：3.1 右手持接种工具,在火焰上烧灼3次灭菌。3.2 左手持起标本容器或原代培养物的平皿或试管等3.3 用接种工具挑取适量标本或细菌,挑取标本时，应注意选择真实反映感染情况的局部，

42、如粪便挑取粘液脓血局部。纯化细菌应从原代培养物上挑取单个菌落，从液体培养基中取菌，只要将接种环在培养液中蘸取一环即可。3.4 接种时可根据要求采用不同的接种方法。3.5 接种后，应在火焰上反复烧灼接种工具并作编号记录，所用工具应放回原处。微生物室标本操作流程1 标本的接收标本接收的时间：原那么上全天任何时间均可。对于急诊标本，值夜班的工作人员接收标本及时接种。标本的接收：接收标本者要认真核对病人标本的唯一标识，包括姓名、床号、ID号、数量、申请工程、条形码等是否与检验申请单相符合以及检查标本的质量是否符合要求等。标本编号：按接收年月日排序，如2021年9月1日第WA00N个标本，编号为：202

43、10901 WA00N2 临床标本的接种2.1 检验目的：为进行细菌培养、药敏试验的各种临床标本选择适合的培养基 标本类型及相应培养基表2-1 标本类型及相应培养基标本类型培养基血血培养瓶中段尿血琼脂平板、麦康凯平板脑脊液血琼脂平板、普通巧克力平板穿刺液血平板、麦康凯平板胆汁血平板、麦康凯平板呼吸道标本血平板、巧克力平板粪便标本SS平板、麦康凯平板、血平板分泌物血平板、麦康凯平板2.2 接种的方法：详见细菌别离及纯化。3 所接种的平板必须写上标本的编号或条码号，然后根据要求进行培养。4 标本的培养条件、温度、时间表4-1 标本培养条件、温度、时间表平板培养条件、温度、时间血琼脂平板恒温培养箱、

44、3537、1824小时巧克力平板CO2、3537、1824小时麦康凯平板恒温培养箱、3537、1824小时5 根据生长在平板上的细菌菌落形态、涂片、染色、镜检等来综合判断细菌形态和染色性质，按各菌属鉴定的作业指导书进行各菌属的常规鉴定及药敏试验。6 结果的报告确认细菌鉴定及药敏结果后，进行检验结果报告的保存、打印。血培养仪操作规程1 仪器概述与原理培养瓶内的各种营养物质是提供微生物生长的物质根底,微生物生长过程中的代谢产物CO2将激活瓶内底部荧光物质,该物质受光照而被激发出荧光,荧光信号变化与CO2变化成正比.仪器瓶位内的探测器探测到该荧光信号的变化并经一组运算公式的运算,得出荧光信号变化的各

45、种参数,从而判断培养瓶内是否有微生物生长,BACTEC 9120设定瓶位探测器检测与计算时间间隔为每10分钟一次,并根据运算结果提供生长曲线。2 环境条件2.1 环境温度:1030。2.2 环境湿度：相对湿度为1090%之间。2.3 其他：防止阳光的直射，220V交流电源、频率、功率符合说明书要求。3 授权操作人详见?科室授权记录?4 每日开关程序4.1 开机步骤 翻开UPS On/Off按钮，接通电源。 翻开仪器电源开关。4.2关机 以下情况需要关闭或重新启动主机：将要停电、移动系统到一个新的位置、对无应答的鼠标，显示器或键盘进行维修。 按ESC键 输入YES. 等待软件退出到一个黑屏，上面

46、显示Cprompt. 关闭仪器电源开关。 关闭UPS开关。 5 工作前检查做好每天的仪器使用及状况记录。使用前检查仪器的电源、环境温度和湿度，开机后查看仪器状态是否正常仪器一般为24小时开机，每天只需查看运行状态。6 样本检测程序6.1 抽血成人培养瓶:810ml的血液或体液。小儿培养瓶:13ml的血液或体液。6.2 装载卸载培养瓶的简易流程： 装瓶：先将血培养费用收取第一按步：点击装瓶图标 含有可用单元的孵育抽屉的绿色指示灯会变亮。第二步：扫描培养瓶条形码，输入资料第三步：将培养瓶瓶底插入亮灯提示的可用孵育单元，指示灯闪确认培养瓶被加载。 加载完后，关闭孵育抽屉，然后点击 按钮 ？+卸载培养

47、瓶 第一步：点击需要卸载的阳性/阴性/和匿名瓶图标第二步：循闪灯指示，取出阳性/阴性/匿名瓶，核对培养瓶的资料，匿名瓶卸载时一定要扫描条。第三步：卸完瓶后，轻轻关紧抽屉；然后点击 按钮。 7 结果处理程序7.1 取出阴性瓶主机对普通细菌培养的默认培养周期为5天，5天内如检测不到细菌生长，将作为阴性瓶处理。 点击电脑桌面图标 翻开主机门。 阴性瓶所在位置瓶位指示灯(绿)亮。 逐个取出阴性瓶。操作结束，关门。+7.2 取出阳性瓶Remove Positive主机检测到阳性瓶后，电脑桌面显黄色给出阳性指示，点击电脑桌面图标 7.2.2 翻开主机门。 阳性瓶所在位置瓶位指示灯(红绿)亮。 逐个取出阳性

48、瓶 7.3 解决匿名瓶程序Identify Anonymous？+？当培养瓶未插入指定瓶位或培养瓶上机时未扫描瓶上条码，仪器无法找到相关培养瓶资料，因而报错，错误类型为匿名瓶与孤儿瓶，点击主屏幕上需卸载的阳性/阴性匿名瓶图标 进行操作： 翻开主机门。 孵育架上匿名瓶瓶位指示灯(绿)亮。 从指定位置取出匿名瓶，扫描瓶上条码。注：匿名瓶卸载时一定要扫描条。卸完瓶后，轻轻关紧抽屉；然后点击 按钮。8 质控操作程序祥见?室内质量控制程序?9 考前须知9.1 关闭主机和监控电脑时必须依照关机程序操作,不能直接关闭电源。9.2 切勿在靠近水源的地方使用仪器。9.3 切勿将仪器放置在靠近热源的地方。9.4

49、电源插座应为带地线的三线插座,接地良好。9.4 及时卸载到期瓶。9.5 请严格按照操作说明进行操作。10 参考资料仪器说明书血培养仪维护与校准1 目的为保证仪器的正常运行,需定期对仪器进行维护和保养。包括每日、每周、每月、每半年的定期维护保养。2 每天维护2.1 检查电源、线路等辅助设备，发现问题及时处理。2.2 每日翻开仪器机门从存放温度计的培养计查看实际温度,应在34.535.5之间。2.3 观察仪器操作屏幕，了解仪器工作情况，及时发现仪器的报警或其他异常情况，及时处理。2.4 对阴性瓶和匿名瓶要及时处理，阳性瓶要及时转种、报告。3 每周维护 每周用清水清洗仪器后部的空气过滤器,做好仪器的

50、清洁卫生,保证内外环境清洁。4 每月维护保养程序4.1 定期清洁仪器四周的灰尘,除去仪器内的纸屑及杂物。4.2 定期检查仪器内温度计读数与显示屏显示的温度是否一致(误差0.5),须保证仪器内关闭时间2小时。5 半年维护保养程序5.1 检查稳压电源的输出电压是否正常。5.2 请工程师对仪器进行全面清洁。5.3 请工程师对仪器各参数进行检测并适当调整,以到达出厂要求。6 血培养仪校准程序该仪器的校准工作主要由公司专业技术人员定期完成。7 记录表格WSW-SOP1-037-01 ?BACT60血培养仪日常维护保养记录?WSW-SOP1-037-02 ?BACT60血培养仪每周保养记录?WSW-SOP1-037-03 ?BACT60血培养仪每月保养记录?一级生物平安柜操作规程1 概述生物平安柜用于微生物操作和实验,其作用充分表达于人员、操作对象及环境的平安保护性能。生物平安柜开口处的负压风幕用于阻止污染气溶胶外溢，从而起到保护人员的作用。经高效过滤器过滤的