食品分析试验内容

1、实验一仪器的认识、清点、洗涤、干燥和使用一、实验目的1 .牢记和遵守化学实验室规则、要求和安全守则。2 .认领、熟悉实验常用仪器。3 .掌握常用玻璃仪器的洗涤和干燥方法。4,掌握容量瓶和移液管等仪器的正确使用方法及溶液的配制方法。二、实验步骤1 .认领仪器按学生实验仪器配备清单”逐一认识并检查、清点所领仪器，要求熟悉其名称、规格、主要用途和使用注意事项。2 .仪器的洗涤和干燥(1)将一些常规仪器(试管、烧杯、锥形瓶、量筒等)先用自来水刷洗，然后用洗衣粉(去污粉)或肥皂液刷洗洁净。用去污粉或洗衣粉刷洗仪器时，应先用水将仪器内外浸湿后倒出水，再蘸取少量去污粉或洗衣粉直接刷洗，再用水冲洗。其效果比用

2、相应的水溶液刷洗要好得多，容易达到清洁透明，不挂水珠的要求。(2)将洗净的试管、烧杯、锥形瓶等在气流烘干器上烘干。3 .仪器的正确使用及溶液的配制(1)用水反复练习估量液体体积的方法直到熟练掌握为止。取1mL自来水，用小滴管滴入试管中，记录滴数并计算一滴大约是多少毫升，记下1mL在试管的大约位置。(2)用量筒从试剂瓶中取出5、10、20mL溶液至50mL烧杯中。反复练习，直至熟练。(3)粗配0.02mol-L-1NaCl溶液计算粗配500mL0.02molL-1NaCl溶液所需NaCl固体的质量，粗称所需质量的NaCl固体于250mL烧杯中，加入100mL水，用玻璃棒搅拌使其溶解，将其转入50

3、0mL试剂瓶中，再加入400mL水，摇匀即可。(4)将(2)配制溶液准确稀释10倍使用移液管移取25mL(2)配制的溶液于250mL容量瓶中，加水稀释摇匀即可。反复练习，直至熟练掌握容量瓶、移液管的使用。三、思考题1 .常用玻璃仪器可采用哪些方法洗涤？选择洗涤方法的原则是什么？怎样判断玻璃仪器是否已洗涤干净？2 .有哪些方法用于常用玻璃仪器的干燥？烤干试管时为什么要始终保持管口略向下倾斜？带有刻度的计量仪器为什么不能用加热的方法干燥？3 .取用固体和液体时，要注意什么？实验二分析天平称量练习一、实验目的1 .学习分析天平的基本操作和常用称量方法，为以后的分析实验打好基础。2 .经过称量练习后，

4、要求达到：固定质量称量法称一个试样的时间在8min内；递减称量法称一个试样的时间在12min内，倾样次数不超过3次，连续称两个试样的时间不超过15min。3 .培养准确、整齐、简明地记录实验原始数据的习惯，不可涂改数据，不可将测量数据记录在实验记录本以外的任何地方，注意有效数字。二、实验原理参见“实验基本操作知识”部分。三、试剂与仪器1 .电子天平，台秤，表面皿(1个)，称量瓶(1个)，烧杯(2个，50mL),牛角匙。2 .Na2SO4(粉末)。四、实验步骤1 .递减称量法(差减法)称取0.30.4gNa2SO4试样两份。(1)取两个洁净、干燥的小烧杯，分别在分析天平上称准至0.1mg。记录为

5、mo和mo'。(2)取一个洁净、干燥的称量瓶，先在台秤上粗称其大致质量然后加入约1.2g试样。在分析天平上准确称量其质量，记录为m1；估计一下样品的体积，转移0.30.4g试样(约占试样总体积的1/3)至第一个已知质量的空的小烧杯中，称量并记录称量瓶和剩余试样的质量m2。以同样方法再转移0.30.4g试样至第二个小烧杯中，再次称量称量瓶的剩余量m3。(3)分别准确称量两个已有试样的小烧杯，记录其质量为m，和m2'。(4)参照表1的格式认真记录实验数据并计算实验结果。(5)若称量结果未达到要求，应寻找原因，再作称量练习，并进行计时，检验自己称量操作正确、熟练的程度。表1称量练习记

6、录格式称量编号Inm称瓶+试样/gm1=m2=m2=m3=m称出士我羊/gms1=ms2=m空烧杯/gm0=m0'=m烧杯+试样/gm1'=m2'=m烧杯中试样/gms1'=ms2'=1Bit1/mg2 .固定质量称量法称取0.5000gNa2SO4试样两份。称量方法如下:(1)将一洁净干燥的表面皿放到天平秤盘上；（2）待天平示数稳定后，按清零去皮重键，至天平示数为0.0000g;（3）用药匙缓慢将药品放到表面皿上，直至天平示数与需要质量一致为止；（4）及时记录数据。（5）另取一表面皿再重复上述操作。五、思考题1 .用分析天平称量的方法有哪几种？固定质量

7、称量法和递减称量法各有何优缺点？在什么情况下选用这两种方法？2 .在实验中记录称量数据应准至几位？为什么？3 .使用称量瓶时，如何操作才能保证试样不致损失？实验三滴定操作练习一、实验目的1 .学习并掌握滴定分析常用仪器的洗涤和正确使用方法。2 .通过练习滴定操作，初步掌握甲基橙、酚酬:指示剂终点的确定。二、实验原理0.1molL-1HCl溶液（强酸）和0.1molL-1NaOH（强碱）相互滴定时，化学计量点的pH为7.0,滴定的pH突跃范围为4.39.7,选取在突跃范围内变色的指示剂，可保证测定有足够的准确度。甲基橙（简写为MO）的pH变色范围是3.1（红）4.4（黄），酚酬：（简写为pp）的

8、pH变色范围是8.0（无色）9.6（红）。在指示剂不变的情况下，一定浓度的HCl溶液和NaOH溶液相互滴定时，所消耗的体积之比值VHCl/VNaOH应是一定的，即使改变被滴定溶液的体积，该体积比也不变。借此，可以检验滴定操作技术和判断终点的能力。三、仪器与试剂1 .量筒（10mL）,试剂瓶（500mL,1000mL）,烧杯（250mL）,碱式滴定管（50mL）,酸式滴定管（50mL）,移液管（25mL）。2 .HCl溶液（6molL-1）,固体NaOH,甲基橙溶液（1gL-1）,酚酗:指示剂（2gL-1,乙醇溶液）。四、实验步骤1.溶液配制（1）0.1molL-1HCl溶液用量筒量取约8.5m

9、L6molL1-HCl溶液，倒入装有约490mL水的1L试剂瓶中，加水稀释至500mL,盖上玻璃塞，摇匀。（2）0.1molL-1NaOH溶液称取NaOH固体2g于250mL烧杯中，加入蒸储水使之溶解，稍冷后转入试剂瓶中，加水稀至500mL,用橡皮塞塞好瓶口，充分摇匀。2 .酸碱溶液的相互滴定（1）用0.1molL-1NaOH溶液润洗碱式滴定管23次，每次用510mL溶液润洗。然后将NaOH溶液倒入碱式滴定管中，排出碱管尖嘴的气泡，将滴定管液面调节至0.00刻度。（2）用0.1molL-1盐酸溶液润洗酸式滴定管23次，每次用510mL溶液，然后将盐酸溶液倒入滴定管中，排出酸管尖嘴的气泡，将液面

10、调节到0.00刻度。（3）在250mL锥瓶中加入约20mLNaOH溶液，2滴甲基橙指示剂，用酸管中的HCl溶液进行滴定操作练习。练习过程中，可以不断补充NaOH和HCl溶液，反复进行，直至操作熟练后，再进行（4）、（5）、（6）的实验步骤。（4）从碱管放出体积在2025mL范围内的NaOH溶液于锥形瓶中，控制放液速率为每秒约34滴，加入2滴甲基橙指示剂，用0.1molL-1HCl溶液滴定至溶液由黄色变为橙色。记下读数。平行滴定三份。数据按下列表格记录。计算体积比VHCl/VNaOH,要求相对偏差在土0.3%以内。（5）用移液管吸取25.00mL浓度为0.1molL-1的HCl溶液于250mL锥

11、瓶中，加23滴酚配指示剂，用0.1molL-1NaOH溶液滴定至溶液呈微红色，静置30s不褪色即为终点。平行测定三份，要求三次之间所消耗NaOH溶液的体积的最大差值不超过土0.04mL。3 .数据记录与处理（1）HCl溶液滴定NaOH溶液（指示剂：甲基橙）滴定序号记录项目InmVNaOH/mLVhci/mLVHCl/VNaOH平均值Vhci/VNaOH相对偏差/%相对平均偏差/%（2）NaOH溶液滴定HCl溶液（指示剂：酚儆）滴定序号记录项目InmVhci/mLVNaOH/mLn次hVNaOH最大绝对差值/mL五、思考题1.配制NaOH溶液时，应选用何种天平称取试剂？为什么？2.能否采用直接法

12、配制准确浓度的HCl和NaOH溶液？为什么？3.在滴定分析实验中，为何要用滴定剂润洗滴定管、用待移取的溶液润洗移液管？锥形瓶是否也要用滴定剂润洗？为什么？4.HCl与NaOH反应生成NaCl和水，为什么用HCl滴定NaOH时以甲基橙作为指示剂，而用NaOH滴定HCl溶液时使用酚酗（或其它适当的指示剂）？实验四容量仪器的校准一、实验目的1 .了解容量仪器校准的意义和方法。2 .初步掌握称量法和相对校准法分别校准滴定管、容量瓶和移液管。二、实验原理滴定管、移液管和容量瓶是实验中常用的玻璃量器，它们的准确度是实验测定结果准确程度的前提，国家对这些量器作了A、B级标准规定(参考§4.8)。对

13、准确度要求较高的分析测试，应使用经过校准的仪器。校准的方法有称量法和相对校准法。称量法的原理是，用分析天平称量被校量器中量入或量出的纯水的质量，再根据测定温度下纯水的密度，计算出被校量器的实际容量。由于玻璃的热胀冷缩，在不同温度下，各量器的容积也不同。各种量器上标出的刻度和容量，是在标准温度20c时量器的标称容量。但是，在实际校准工作中，容器中水的质量是在室温下和空气中称量的。因此必须考虑以下因素的影响：(1)空气浮力对质量的影响；(2)水的密度受温度的影响；(3)玻璃容器的容积受温度的影响。为了方便计算，综合考虑了上述的影响，可得出20c容量为1L的的玻璃容器，在不同温度时所盛水的质量(见表

14、5-14-1)。例如：某支25mL移液管在18c放出的纯水质量为24.921g；密度为0.99751gmL-1,计算该移液管在18C时的实际容积。V18“921g124.98mL0.99751gmL则这支移液管的校正值为24.98mL-25.00mL=-0.02mL。表5-14-1不同温度下1L水的质量(在空气中用黄铜祛码称量)t/m/gt/m/gt/m/g10998.3919997.3428995.4411998.3320997.1829995.1812998.2421997.0030994.9113998.1522996.8031994.6414998.0423996.6032994.34

15、15997.9224996.3833994.0616997.7825996.1734993.7517997.6426995.9335993.4518997.5127995.69需要特别指出的是：校准不当和使用不当都是产生容量误差的主要原因，其误差甚至可能超过允差或量器本身的误差。因而在校准时务必正确、仔细地进行操作，尽量减小校准误差。凡是使用校准值的，其校准次数不应少于两次，且两次校准数据的偏差应不超过该量器容量允许的1/4,并取其平均值作为校准值。有时，在实验中只要求两种容器之间有一定的比例关系，而无需知道它们各自的准确容积，这时可用相对校准法进行校正。例如，用25mL移液管移取蒸储水，注入

16、干净且倒立晾干的100mL容量瓶中，转移4次后，观察容量瓶瓶颈处水的弯月面下缘是否刚好与刻线相切。若不相切，应作一记号为标线，以后此移液管和容量瓶配套使用时就用校准的标线。为了更全面、详细了解容量仪器的校准，可参考JJG196-920常用玻璃量器检定规程。三、仪器与试剂1 .分析天平，滴定管（50mL）,容量瓶（50mL）,移液管（10mL）,锥形瓶（50mL,带磨口玻璃塞）。2 .蒸储水。四、实验步骤1 .滴定管的校准（称量法）取一只洗净并且外表干燥的带磨口玻璃塞的锥形瓶，放在分析天平上称量，得空瓶质量m瓶，记录至0.001g。再向一洗净的滴定管中装满纯水，将液面调至0.00mL刻度处，从滴

17、定管向锥形瓶中放出一定体积（记为V。）如5.00mL的纯水，盖紧塞子，称出瓶+水”的质量m并无+水,m井卮+水与m瓶之差即为放出水的质量m水。用上述方法称量表5-14-3中所列的刻度间的m水，并测量水温，查表5-14-1得该温度下水的密度，即可计算滴定管各部分的实际容量V20。重复校准一次，两次相应区间的水质量相差应小于0.02g,求出平均值，并计算校准值V（V20-V0）。以V0为横坐标，V为纵坐标，绘制滴定管校准曲线。现将一支50mL滴定管在水温21c校准的部分实验数据列于表1。表150mL滴定管校正表（水温21C,p=0.99700gmL1）V0/mLm并+水/gm并Jgm水/gV20/

18、mLV校正值/mL0.005.0034.14829.2074.9414.96-0.040.0010.0039.31729.31510.00210.03+0.030.0015.0044.30429.35014.95415.000.000.0020.0049.39529.43419.96120.02+0.020.0025.0054.28629.38324.90324.98-0.02移液管和容量瓶也可用称量法进行校准。校准容量瓶时，只需称准至0.01g即可。表250mL滴定管校正表（水温C,p=g_mL1）M/mLmstJgm并s+水/gm*/gm水（平均）/gVzo/mLV校正值/mL0.0010

19、.000.0020.000.0030.000.0040.000.0050.002 .移液管和容量瓶的相对校准取一只洗净且晾干的50mL容量瓶，用洁净的10mL移液管移取10mL纯水5次于容量瓶中，观察液面的弯月面下缘是否恰好与刻线上边缘相切，若不相切且间距超过1mm,则用胶布在瓶颈上另作标记，以后实验中，此移液管和容量瓶配套使用时，应以新标记为准。五、思考题1 .容量瓶校准时为什么需要晾干？在用容量瓶配制标准溶液时是否要晾干？2 .在实际分析工作中如何应用滴定管的校准值？3 .分段校准滴定管时，为什么每次都要从0.00mL开始？4.试写出以称量法对移液管(单刻线吸量管)进行校准的简要步骤。实验

20、五食品中总酸的测定(见课本)一、酸碱摘定法1 .目的与要求了解食品酸度测定的实验原理及意义。根据实验结果的分析，简述影响实验准确性的因素。2 .实验原理食品中的酒石酸、苹果酸、柠檬酸、草酸、醋酸等有机酸，其电离常数Ka均大于10-8,可以用强碱标准溶液直接滴定试样中的酸，以酚猷为指示剂确定滴定终点。按碱液的消耗量计算食品中的总酸含量。测定结果包括了未离解的酸的浓度和已离解的酸的浓度。3 .仪器与试剂(1)仪器酸碱滴定装置；分析天平，感量分别为0.0001g及0.00lg;组织捣碎机；研钵。(2)实验用水实验用水应符合GB/T6682规定的二级水规格或蒸储水，使用前应经煮沸，冷却。(3)试剂Na

21、0H标准滴定溶液0.1mo1/L1%酚猷溶液称取1g酚猷，溶于60mL95%乙醇中，用水稀释至100mL。4 .实验步骤(1)样品预处理固体样品。取有代表性的固体样品至少200g,用捣碎机捣碎至均匀，置于密闭玻璃容器内。固、液样品。取按比例组成的固、液样品至少200g,用研钵或用组织捣碎机捣碎，混匀后置于密闭的玻璃容器内。含二氧化碳的液体样品。至少取200g样品至500mL烧杯中，置于电炉上，边搅拌边加热至微沸腾，保持2min,冷却，称量，用煮沸过的水补至煮沸前的质量，置于密闭玻璃容器中。不含二氧化碳的液体样品。充分混合均匀，置于密闭玻璃容器内。(2)测定试液的制备液体样品。若总酸含量小于或等

22、于4g/kg,将试样用快速滤纸过滤。收集滤液，用于测定。若总酸含量大于4g/kg,称取1050g样品，用煮沸过的水定容至250mL,过滤。收集滤液，用于测定。固体、半固体样品。称取均匀样品1050g,精确至0.00lg,置于烧杯中。用约80c煮沸过的水150mL将烧杯中的内容物转移到250mL容量瓶中，置于沸水浴中煮沸30min(摇动23次，使试样中的有机酸全部溶解于溶液中)，取出，冷却至室温，用煮沸过的水定容至250mL。用快速滤纸过滤，收集滤液，用于测定。(3)样品测定准确吸取试样滤液2550mL,使之含0.0350.07g酸，置于250mL锥形瓶中，加水4060mL及0.2mL1%的酚猷

23、指示剂，用0.lmol/LNaOH标准溶液滴定至微红色且30s不褪色。记录消耗0.lmol/LNaOH标准滴定溶液的体积(Vi)。同一被测样品须测定两次。用水代替样品做空白试验，操作相同。记录消耗NaOH标准滴定溶液的体积(V2)o(4)实验数据记录见表6-5。表6-5数据记录表项目第一次第二次第三次平均值滴定时取样体积/mL滴定样品消耗NaOH溶液的体积Vi/mL空白试样消耗NaOH溶液的体积V2/mL5 .结果计算c(ViV2)KFXc(y_1000(6-2)m式中，X为样品中总酸的含量，g/kg(或g/L)；c为NaOH标准滴定溶液的浓度，mol/L;Vi为滴定样品时消耗NaOH标准滴定

24、溶液的体积，mL;V2为空白试样消耗NaOH标准滴定溶液的体积，mL;m为样品质量或体积，g(或mL);F为试样的稀释倍数；K为酸的换算系数：苹果酸0.067、乙酸0.060、洒石酸0.075、柠檬酸0.064、柠檬酸(含一分子结晶水)0.070,乳酸0.090、草酸0.045、盐酸0.036、磷酸0.049。计算结果精确到小数点后两位。6 .注意事项此方法适用于果蔬制品、饮料、乳制品、饮料酒、蜂产品、淀粉制品、谷物制品和调味品等食品中总酸的测定，但不适用于有颜色或浑浊不透明的试样，建议它们改用pH电位法测定。对于酸度值较低的食品，测定时可使用0.05mo1/LNaOH标准滴定溶液或0.0lm

25、ol/LNaOH标准滴定溶液（用时当天稀释配制）。一般要求滴定时消耗的氢氧化钠标准滴定液不少于5mL,最好在1015mL。一样品，两次测定结果之差，不得超过两次测定平均值的2%般情况下，柑橘、柠檬及柚子其总酸以柠檬酸计；葡萄（汁）以洒石酸计；仁果、苹果、桃、李等以苹果酸计；盐渍发酵的制品、肉、鱼、家禽及乳品以乳酸计；醋渍及以醋酸发酵制品，以醋酸计；果汁型固体饮料以结晶水柠檬酸计；菠菜以草酸计。实验六邻二氮菲吸光光度法测定铁（条件试验和试样中铁合量的测定）一、实验目的1 .学习如何选择吸光光度分析的最佳实验条件。2 .掌握邻二氮菲吸光光度法测定铁的原理及方法。3 .学会绘制吸收曲线和标准工作曲线

26、的方法。4 .掌握分光光度计的结构和使用方法。二、实验原理吸光光度法测定铁的理论依据是朗伯一比耳定律。如果固定比色皿厚度，测定有色溶液的吸光度，则溶液的吸光度与浓度之间有简单的线性关系，可用标准曲线法进行定量分析。采用吸光光度法测定物质的含量时，通常要经过取样、显色及测量等步骤。显色反应受多种因素的影响，为了使被测离子全部转变为有色化合物，应当通过条件试验确定显色剂用量、显色时间、显色温度、溶液酸度及加入试剂的顺序等。本实验在测定试样中铁含量之前，先做部分条件试验，以便初学者掌握确定实验条件的方法。条件试验的简单方法是：变动某实验条件，固定其余条件，测得一系列吸光度值，绘制吸光度一某实验条件的

27、曲线，根据曲线确定某实验条件的适宜值或适宜范围。吸光光度法测定铁的含量所用的显色剂较多，有邻二氮菲（又称邻菲啰咻，菲绕林）及其衍生物、磺基水杨酸、硫氧酸盐、5-Br-PADAP等。其中邻二氮菲分光光度法的灵敏度高，稳定性好，干扰容易消除，是目前普遍采用的一种方法。在pH为29的溶液中，Fe2+与邻二氮菲（Phen）生成稳定的橘红色络合物Fe（Phen）32+:（橘红色）上述反应的lgK稳=21.3,摩尔吸光系数508=1.1104Lmol1cm1。铁含量在0.16gmL-1符合比尔定律。而Fe3+与邻二氮菲作用形成蓝色络合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂使Fe3+还原为Fe2+,常

28、用的还原剂是盐酸羟胺：2Fe3+2NH20H-HCl=2Fe2+N2T+4H+2H2O+2Cl测定时，酸度高，反应进行较慢；酸度太低，则Fe2+易水解，因此本文采用pH5.06.0的HAc-NaAc缓冲溶液，可使显色反应进行完全。Bi3+,Cd2+,Hg2+,Zn2+&Ag+等离子与邻二氮菲作用生成沉淀，干扰测定。实验证实，相当于铁质量40倍的Sn2+,Al3+,Ca2+,Mg2+,Zn2+,SiO32-,20倍的Cr3+,Mn2+,VO3,PO43-,5倍的Co2+,Ni2+,Cu2+等离子不干扰测定。本法测定铁的选择性虽然较高，但选择试样时仍应注意上述离子的影响。三、仪器与试剂1

29、.分光光度计，50mL容量瓶8个（或比色管8支）。2 .铁标准溶液：100dgMl准确称取0.8634g分析纯NH4Fe（SO4）212H2O置于200mL烧杯中，加入20mL6molL-1HCl溶液和少量水，用玻璃棒搅拌使其溶解，然后定量转移至1L容量瓶中，用蒸储水稀释至刻度，摇匀。3,铁标准溶液：10gm.L用移液管吸取10mLl00科gM映标准溶液于100mL容量瓶中，加入2mL6molL-1HCl溶液，用蒸储水稀释至刻度，摇匀。4,邻二氮菲（1.5gL?）,盐酸羟胺（100gL-1,用时配制）,NaAc（1molL-1）,NaOH（lmolL-1）,HCl（6molL-1）。四、实验步

30、骤1 .条件实验试验（1）吸收曲线的绘制取两个50mL容量瓶（或比色管），用吸量管分别加入0.0mL和1.0mL100科g吊映标准溶液，1mL盐酸羟胺溶液，才§匀。再加入2mL邻二氮菲（Phen）,5mLNaAc溶液，用水稀释至刻度，摇匀。放置10min后，用1cm比色皿，以试剂空白（即0.0mL铁标准溶液）为参比溶液，在440560nm之间，每隔10nm测一次吸光度，在最大吸收峰附近，每隔5nm测量一次吸光度。在坐标纸上，以波长入为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A-入吸收曲线。从吸收曲线上选择测定Fe的适宜波长，一般选用最大吸收波长福ax。（2）显色剂用量的选择取7个50mL容量瓶

31、（或比色管），用吸量管准确吸取1.0mL100dg-mL铁标准溶液加入各容量瓶中，然后加入lmL盐酸羟胺溶液，摇匀。再分别加入0.1mL,0.3mL,0.5mL,0.8mL,1.0mL,2.0mL,4.0mLPhen和5mLNaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀。放置10min。用1cm比色皿，以蒸储水为参比溶液，在选择的波长（Max）下测定各溶液的吸光度。以所取Phen溶液体积V为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A-V曲线。得出测定铁时显色剂的最适宜用量。（3）显色时间的选择取一个50mL容量瓶（或比色管），用吸量管准确加入l.0mL100wg。!铁标准溶液，1mL盐酸羟胺溶液，才§匀。

32、再加入2mLPhen,5mLNaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀。立刻用1Cm比色皿，以蒸储水为参比溶液，在选定的波长（Zmax）下测量吸光度。然后依次测量放置5min,10min,30min,60min,90min,120min后的吸光度。以时间t为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A-t曲线。得出铁与邻二氮菲显色反应完全所需要的适宜时间。2 .铁含量的测定（1）标准曲线的绘制取6个50mL容量瓶（或比色管），用吸量管分别加入0.0mL,2.0mL,4.0mL,6.0mL,8.0mL,10.0mL10科gr1i铁标准溶液，lmL盐酸羟胺溶液，才§匀。再加入2mLPhen,5mLNaAc溶

33、液，摇匀。用水稀释至刻度，摇匀后放置10min。用1cm比色皿，以试剂空白为参比溶液（该显色体系的试剂空白为无色溶液，在条件试验中用蒸储水作参比溶液，操作较为简单。），在所选择的波长（加ax）下，测量各溶液的吸光度。以含铁量为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A-Fe含量标准曲线。在绘制的标准曲线上，查出某一铁浓度适中的标准溶液所对应的吸光度，计算Fe2+-Phen络合物的摩尔吸光系数So（2）试样中铁含量的测定准确吸取1.0mL试液于50mL容量瓶（或比色管）中，按上述标准曲线相同条件和步骤，测量其吸光度。从标准曲线上查出其相应的铁含量，然后计算出试液中铁的含量（单位为g-n-iL0五、思考题1

34、 .从实验测得的吸光度求铁含量的依据是什么？如何求得？2 .试拟出一简单步骤，用吸光光度法测定水祥中的全铁（总铁）和亚铁的含量。3 .吸光光度法进行测量时，为何使用参比溶液，参比溶液选用的原则是什么？实验七亚硝酸盐含量的测定（见课本）一、目的与要求1 .学习肉制品中食品添加剂一一亚硝酸盐的检测方法。2 .掌握盐酸蔡乙二胺法的基本操作技术。二、实验原理样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸蔡乙二胺偶合生成紫红色化合物，颜色的深浅与亚硝酸盐含量成正比，其最大吸收波长为538nm,可测定吸光度并与标准比较定量。三、仪器与试剂1仪器721型分光光度计；比

35、色管、各种移液管及常用玻璃仪器；小型绞肉机。2试剂(1)饱和硼砂溶液溶解5g硼酸钠(Na2B4O710H2O)于100mL热水中，冷却后备用。(2)硫酸锌溶液溶解30g硫酸锌(ZnSO47H2O)于100mL水中。(3)对氨基苯磺酸溶液(0.4%)溶解0.4g对氨基苯磺酸于100mL2刖酸中，避光保存。(4)盐酸蔡乙二胺溶液(0.2%溶解0.2g盐酸蔡乙二胺于100mL水中，避光保存。(5)亚硝酸钠标准溶液精确称取0.1000g亚硝酸钠(硅胶干燥剂中干燥24h),加水溶解，移入500mL容量瓶，并稀释至刻度，混匀，临用前吸取5.00mL于200mL容量瓶中，加水至刻度，混匀，此溶液每毫升相当5

36、国亚硝酸钠。(6)材料午餐肉或腊肠。四、测定步骤1 .样品中亚硝酸钠的提取称取2.50g经绞碎混匀的样品于50mL烧杯中，加硼砂饱和溶液6.3mL,搅拌均匀。以70c左右的热水约150mL将样品全部洗入250mL容量瓶中，置沸水浴加热15min。取出冷却至室温，一面转动，一面滴加1.3mL硫酸锌溶液以沉淀蛋白质，加水至刻度，混匀，放置30min。除去上层脂肪，用滤纸过滤，弃去最初20mL,滤液备用。2 .样品测定取6支25mL比色管，编号，按表6-11顺序加入各试剂及操作。加水至25.00mL,混匀，静置15min,用2cm比色皿，以零号管调节零点，于波长538nm处测吸光度，记录。绘制标准曲

37、线。以亚硝酸钠量(ug)为横坐标，与其对应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。用样品提取滤液的吸光度，在以上亚硝酸钠标准曲线上查出亚硝酸钠的量(囚)。表6-11加入试剂顺序及结果记录混匀35min0.500.500.2%盐酸茶乙二月$溶液体积/mL0.500.500.500.50吸光度A1000X=20m1000五、结果计算(6-13)250式中，X为样品中亚硝酸盐的含量，mg/kg;；A为测定用滤液中亚硝酸钠的含量，闺；m为样品的质量，g；20/250为测定用样液体积(mL)/试样处理液总体积(mL)。六、注意事项1 .本法适用于肉制品中硝酸盐的测定。具方法是把沉淀蛋白质、除脂肪的溶液通过镉柱，使

38、其中的硝酸根离子还原成亚硝酸根离子，按此法测得总量B减去试样中亚硝酸盐含量C,即得试样中硝酸盐(以硝酸钠计)含量。硝酸盐(以硝酸钠计)含量(g/kg)(6-14)=(B-C)X1.232式中，1.232为亚硝酸钠换算为硝酸钠的系数。2 .样品提取时，也可用亚铁氟化钾溶液2.5mL和乙酸锌溶液2.5mL代替1.3mL硫酸锌溶液，以沉淀蛋白质，配法如下。(1)亚铁氟化钾溶液称取106g亚铁氟化钾K4Fe(CN)63H2O,溶于水并稀释至1000mL0(2)乙酸锌溶液称取220g乙酸锌Zn(CH3COO)22H2O,力口30mL冰醋酸溶于水，并稀释至1000mLo3 .本法与国标方法大同小异，只是用

39、实验室现有的25mL比色管，所有试剂相应减少。4 .当亚硝酸盐含量高时，过量的亚硝酸盐可以将偶氮化合物氧化变成黄色，而使红色消失，这时可以采取先加入试剂，然后滴加样液，从而避免亚硝酸盐过量。七、思考题1 .本实验中参比溶液的作用？2 .为什么要对食物中亚硝酸盐的含量进行测定？实验八食品中水分活度值的测定扩散法（见课本）1 .目的与要求学习水分活度值测定的意义及实验原理图6-2康威扩散皿A一内室；B外室；C玻璃盖;D一铝皿或玻璃皿掌握康威扩散法测定水分活度值的操作方法。2 .实验原理样品在康威微量扩散皿的密封和恒温条件下，分别在Aw较高和较低的标准饱和溶液中扩散平衡后，根据样品质量的增加（在较高Aw标准溶液中平衡）和减少（在Aw较低标准溶液中平衡），以样品质量增减为纵坐标，各种标准饱和溶液Aw值为横坐标，绘出样品质量随溶液Aw值变化的曲线，从而计算样品的水分活度值。3 .仪器与试剂（1）仪器康威微量扩散皿。构造如图6-2所示。圆形小铝皿或玻璃皿。盛放样品用，直径为2528mm,深度为夕mm。分析天平。感量0.0001g。（2）标准试剂溶液配制标准试剂饱和溶液，具在25c时的