药理学研究的一般性问题

1、药理学研究的科学训练药理学研究的科学训练科研全过程训练概况科研全过程训练概况专业课程、专业课程、专业专业外语、统计学、文献检索、常外语、统计学、文献检索、常用软件应用（用软件应用（Word, Excel, 图表制作软件，图表制作软件，Photoshop, SPSS, PowerPoint, etc）阅读文献，确定课题（查阅文献能力）阅读文献，确定课题（查阅文献能力）设计实验设计实验实验研究（取得初步结果，可以申请基金）实验研究（取得初步结果，可以申请基金）统计分析资料；统计分析资料；撰写论文撰写论文答辩、会议报告（答辩、会议报告（Chinese, English）一、药理学研究的类型一、药理学

2、研究的类型根据研究目的分类根据研究目的分类F基础研究：受体、递质、蛋白质、基础研究：受体、递质、蛋白质、神经通路、信号转导、基因神经通路、信号转导、基因F开发研究：围绕新药研发的药理开发研究：围绕新药研发的药理学研究学研究F应用研究：提高治疗效果、减少应用研究：提高治疗效果、减少不良反应的临床药理学不良反应的临床药理学一、药理学研究的类型一、药理学研究的类型根据研究内容和研究方法分类F药效及作用机制研究F药动学研究F实验研究U整体动物实验U离体器官、细胞实验F临床研究二、定位与选题二、定位与选题三定三定: 明确的目标明确的目标F定研究方向定研究方向 很稳定很稳定F定研究领域定研究领域 相对稳定

3、相对稳定F定研究课题定研究课题 非常活跃非常活跃如何定位如何定位: F学科发展的前景与可行性学科发展的前景与可行性F单位的可能条件单位的可能条件F个人兴趣个人兴趣如何选题如何选题导师：给方向、提供条件、审阅文导师：给方向、提供条件、审阅文章、组织答辩（不同于章、组织答辩（不同于technician）F根据导师的研究方向根据导师的研究方向F基金资助情况基金资助情况F确有兴趣的探索可以做出开创性的工确有兴趣的探索可以做出开创性的工作作二、定位与选题二、定位与选题三、要求三、要求独立研究工作的基本能力独立研究工作的基本能力F掌握信息掌握信息, 复习文献的能力复习文献的能力F科学实验设计能力（创新思维

4、能力）科学实验设计能力（创新思维能力）F科学实验操作能力科学实验操作能力F科学论文撰写发表能力科学论文撰写发表能力F科学基金申请能力科学基金申请能力良好的素质，杜绝造假、剽窃良好的素质，杜绝造假、剽窃 文章的可信率、实验的可重复率文章的可信率、实验的可重复率四、怎样写好实验记录认真、客观、全面的记录。认真、客观、全面的记录。F格式和内容格式和内容F实验方法实验方法F试剂称量试剂称量F配制时间配制时间F气候气候F仪器设备动物仪器设备动物F结果结果四、怎样写好实验记录四、怎样写好实验记录一般要求一般要求F记录本应事先印有页码，不得撕掉或挪作他用，即记录本应事先印有页码，不得撕掉或挪作他用，即使写错

5、了亦应如此。使写错了亦应如此。F封面或首页应写明科研课题名称，开始工作年、月、封面或首页应写明科研课题名称，开始工作年、月、日，工作者姓名，每本记录前日，工作者姓名，每本记录前12页应留作写实页应留作写实验目录及页次之用，便于查阅。验目录及页次之用，便于查阅。F所有数据，必须立即用不掉色的笔直接清晰地记录所有数据，必须立即用不掉色的笔直接清晰地记录在记录本上，严禁用铅笔记录，因为容易退色和被在记录本上，严禁用铅笔记录，因为容易退色和被涂改。如有写错不得涂改擦抹，必须改正时，可在涂改。如有写错不得涂改擦抹，必须改正时，可在错误处画道线或打错误处画道线或打，然后写上正确数据，并由课，然后写上正确数

6、据，并由课题负责人签字，防止弄虚做假。电脑测得的数据应题负责人签字，防止弄虚做假。电脑测得的数据应输入电脑，自动打印，贮存，最好拷贝一份，以防输入电脑，自动打印，贮存，最好拷贝一份，以防丢失或损坏。丢失或损坏。四、怎样写好实验记录四、怎样写好实验记录写记录的要求写记录的要求F立即立即U不能先记在心上，实验后补写记录，因为记忆有时不能先记在心上，实验后补写记录，因为记忆有时不可靠。不可靠。F直接直接U要直接写在记录本上，不能先写在纸条上，然后重要直接写在记录本上，不能先写在纸条上，然后重抄，因为重抄有时抄错，有时甚至把纸条丢掉。抄，因为重抄有时抄错，有时甚至把纸条丢掉。F清晰清晰U字体清楚，不要

7、潦草，不要词不达意，自己能看懂，字体清楚，不要潦草，不要词不达意，自己能看懂，别人也看得清楚，今天清楚，日后也看得懂。自动别人也看得清楚，今天清楚，日后也看得懂。自动仪器打印的数据、结果、图谱等必须将原件依顺序仪器打印的数据、结果、图谱等必须将原件依顺序贴在记录本上，有条件的还可输入电脑保存。贴在记录本上，有条件的还可输入电脑保存。四、怎样写好实验记录记录的内容F年、月、日。有的实验还应注明室温F实验名称F目的F材料F实验方法，应注明引用参考文献；F结果：包括原始数据，图，表，统计方法F讨论或小结 五、研究设计三要素五、研究设计三要素处理因素（自变量）处理因素（自变量）试验对象（人、动物；器官

8、、试验对象（人、动物；器官、组织、细胞、分子）组织、细胞、分子）试验效应（因变量）试验效应（因变量）药物、方法和模型的关系药物、方法和模型的关系六、实验设计的基本原则对照原则F并行对照F配对对照F自身对照F前后对照F潜在对照六、实验设计的基本原则随机原则F排除实验者的主观性，使每个实验单位都有同等机会被分配到实验组和对照组。重复原则F实验的取样例数或实验次数如何针对课题复习文献如何针对课题复习文献1.站在巨人肩上看世界站在巨人肩上看世界知识爆炸时代知识爆炸时代: 广博、交叉学科广博、交叉学科知识广博与深入、专业化间的矛知识广博与深入、专业化间的矛盾盾开卷有益开卷有益？2.按科研需要来复习文献按

9、科研需要来复习文献充分占有文献充分占有文献 F方向方向 专业人员水平专业人员水平F领域领域 专家水平专家水平F课题课题 No.1 专家水平专家水平2.按科研需要来复习文献按科研需要来复习文献 文献分类文献分类F书书U 教科书教科书: 相关相关, 交叉学科的基础知识交叉学科的基础知识U 专著专著 编著编著 ( 资料性资料性 ) 著作著作 ( 文献性文献性 )( 方向方向 ) ( 领域领域 )F综述综述U 资料性资料性 ( 方向方向 ) ( 领域领域 )U 文献性文献性 ( 领域领域 , 课题课题 )FOriginal paper 课题课题 领域领域 ( 个别个别 )FData paperF快报快

10、报 摘要摘要F会议汇编会议汇编 自己定位不要变自己定位不要变, 别被文献牵着走别被文献牵着走3. 如何看文献如何看文献 精读与浏览精读与浏览 看懂看懂:F问题的提出问题的提出( Background ) F目的目的 F设计思想与依据设计思想与依据 F研究对象与方法研究对象与方法 F重要结果重要结果 F结论与启示结论与启示 熟悉程度熟悉程度F方向方向: 一般涉及一般涉及;基础知识基础知识;学科水准学科水准;当前重大进展与趋势当前重大进展与趋势 F领域领域: 了解焦点与热点了解焦点与热点;已已/正正/将进行的课题将进行的课题 F课题课题: (全面全面) 历史历史 现状现状 展望；主要方法、手段展望

11、；主要方法、手段4. 如何收集文献如何收集文献检索检索F重要文献重要文献; 实验室或学者追踪实验室或学者追踪; 确定本学科的重要确定本学科的重要( 核心核心 )期刊期刊分层次收集资料分层次收集资料F课题有关文献课题有关文献;尽可能收集原著尽可能收集原著/快报快报;要新要新,全全F本领域非课题文献本领域非课题文献;新综述新综述,影响大的原著影响大的原著F本方向非本领域文献本方向非本领域文献:经典专著经典专著/综述综述F不同方向相关知识不同方向相关知识:专著专著,教科书教科书5.文献整理文献整理运用自己专业知识运用自己专业知识按照文献的热点与焦点按照文献的热点与焦点参照相关综述模式参照相关综述模式

12、F例例 TGF在肾纤维化中的意义在肾纤维化中的意义 (作用作用) 背景知识背景知识 肾纤维化肾纤维化 TGF的理化特征的理化特征 TGF的生成与代谢、组织分布等的生成与代谢、组织分布等 肾纤维化病程中肾纤维化病程中TGF的变化的变化 血浆的和肾组织的，蛋白与基因表达血浆的和肾组织的，蛋白与基因表达 病程中的动态变化与临床病理生理表现病程中的动态变化与临床病理生理表现 的（相关）关系的（相关）关系5.文献整理文献整理 TGF的生物学（肾）效应：整体，器官，细的生物学（肾）效应：整体，器官，细胞及分子效应胞及分子效应 外源或刺激内源外源或刺激内源TGF的效应（在正常和的效应（在正常和疾病条件）疾病

13、条件） 拮抗或促失活的效应拮抗或促失活的效应 TGF效应的机理效应的机理 受体及细胞内信号转导机理受体及细胞内信号转导机理 TGF的基因表达和细胞表型改变的机理的基因表达和细胞表型改变的机理 肾脏疾病的肾脏疾病的TGF高高/低表达的机理低表达的机理 TGF与其他已知肾纤维化因子间的关系（包与其他已知肾纤维化因子间的关系（包括遗传易感因素）括遗传易感因素）5.文献整理文献整理 TGF参与肾纤维化发病的临床意义：参与肾纤维化发病的临床意义： 诊断，治疗，预防策略诊断，治疗，预防策略此外，常用方法学和技术的整理此外，常用方法学和技术的整理 肾纤维化整体活离体模型；肾纤维化整体活离体模型； 相关细胞的

14、培养；相关细胞的培养； 细胞增殖表型转变；细胞增殖表型转变； 胶元测定；胶元测定； TGF受体表达与活性检测受体表达与活性检测三三. 如何撰写文献综述如何撰写文献综述目的目的 F学科带头人与学科骨干写学科带头人与学科骨干写F科研工作人员开题前写科研工作人员开题前写F科学情报人员写科学情报人员写F研究生毕业论文研究生毕业论文(?)F基层人员为写而写基层人员为写而写文献性与资料性文献性与资料性,大综述与小专论大综述与小专论三三. 如何撰写文献综述如何撰写文献综述小专论内容小专论内容审定好内容与题目审定好内容与题目 (如上述例子如上述例子)要有思路，有观点，提炼科学问题，要要有思路，有观点，提炼科学

15、问题，要告诉读者什么？告诉读者什么？ F概述概述 问题的提出问题的提出-研究的历史与背景研究的历史与背景-本问题本问题(课题课题)的意义的意义F背景知识及相关基本知识背景知识及相关基本知识 （不要写成教科（不要写成教科书或讲义）书或讲义）F本专论要论述的主要内容本专论要论述的主要内容,注意从课题与背注意从课题与背景联系的学科高度分析景联系的学科高度分析F小结小结 存在的问题与今后的方向存在的问题与今后的方向三三. 如何撰写文献综述如何撰写文献综述资料处理资料处理 F按专业知识列好提纲按专业知识列好提纲; 文献文献 (作的摘作的摘要要)编号后按提纲归类编号后按提纲归类F背景材料背景材料,基础知识

16、基础知识,立论依据立论依据;权威甚权威甚或经典或经典;“教科书式或讲义式教科书式或讲义式”语言语言F不同意见不同意见,学术观点与资料如何处理学术观点与资料如何处理F资料的准确性资料的准确性,尤其是翻译尤其是翻译,讲不清楚讲不清楚不如不讲不如不讲F老课题文献多老课题文献多,新课题文献太少新课题文献太少三三. 如何撰写文献综述如何撰写文献综述F如何表达自己的学术观点如何表达自己的学术观点: 评述评述? 自引自引? 逻辑分析逻辑分析F内容集中内容集中,目标明确目标明确,不要广证博引不要广证博引(与研与研 究生论文不同究生论文不同)F参考文献参考文献: 新新(5年内年内2/3); 背景材料背景材料,立

17、论依据立论依据;权威经典权威经典;专论内容专论内容: 新新,反映进展反映进展,可引会议可引会议,摘要及摘要及个人咨询个人咨询,准确准确F发表发表: 刊登进展刊登进展/综述的专业杂志综述的专业杂志(如如“进进 展展”“”“国外医学国外医学”); 专业论文杂志专业论文杂志;查阅国查阅国内类似综述有无内类似综述有无,避免重复避免重复. 按杂志稿约修按杂志稿约修改改(留底留底)四四. 如何进行科研课题设计如何进行科研课题设计原则原则: 目标明确目标明确;构思新颖构思新颖;立论依据充分立论依据充分;实实验方法恰当验方法恰当选题选题 (科研目标科研目标,目的目的)F目标具体目标具体:用实验手段解决科学问题

18、用实验手段解决科学问题,问题是什么问题是什么,攻关，攀科学高峰，攻关，攀科学高峰，“关关”、“高峰高峰”是什么是什么,在在哪里哪里? (目的与手段目的与手段,工具的关系工具的关系)F射箭中的射箭中的,忌打哪儿指哪儿，看看有什么变化，研忌打哪儿指哪儿，看看有什么变化，研究甚少，填补空白等。究甚少，填补空白等。F“三定三定”基础上明确该课题的学科地位基础上明确该课题的学科地位(与原创新与原创新关系关系);注意工作的积累和发展注意工作的积累和发展;可参考文献整理中可参考文献整理中发现的和未解决的问题；将确定的目标逐字推敲写发现的和未解决的问题；将确定的目标逐字推敲写下来。下来。四四. 如何进行科研课

19、题设计如何进行科研课题设计创新构思创新构思FIdea的来源的来源: 临床临床; 文献文献; 交叉交叉学科启迪学科启迪; (学科发展学科发展)自己工作的自己工作的连续性，连续性， 避免被文献牵着鼻子走，避免被文献牵着鼻子走，或赶时髦或赶时髦; 新技术应用更重视新新技术应用更重视新思维思维;交叉学科别交叉走了交叉学科别交叉走了(转向转向)四四. 如何进行科研课题设计如何进行科研课题设计设计思想合理设计思想合理,依据充分依据充分 如如:证明某因子证明某因子( TGF)是某疾病是某疾病(肾肾纤维化纤维化)的发病因素的发病因素.设计设计:F疾病时高表达疾病时高表达,与病程发展以及某些病理变与病程发展以及

20、某些病理变化相关化相关F外源外源TGF或诱导内源或诱导内源TGF高表达加剧发高表达加剧发病病F拮抗拮抗TGF或抑制内源或抑制内源TGF生成或促进灭生成或促进灭活活,消除疾病消除疾病F上述思路与文献上述思路与文献(or临床临床)是否相悖是否相悖?四四. 如何进行科研课题设计如何进行科研课题设计方法恰当方法恰当(方法先进方法先进) 方法选择：目的决定方法选择；实验条件方法选择：目的决定方法选择；实验条件选方法；工作者熟练程度选方法；假设全部选方法；工作者熟练程度选方法；假设全部顺利，所得结果能否达到设计目标？顺利，所得结果能否达到设计目标？F模型模型U经典与新建；是否需与人一致或接近；可行性；模型

21、与经典与新建；是否需与人一致或接近；可行性；模型与分组适合研究目的为原则分组适合研究目的为原则F观察指标观察指标U多（广）或少（精）好？明确每个指标的原理和意义多（广）或少（精）好？明确每个指标的原理和意义F背景指标背景指标U如证实疾病模型复制成功的指标；反映质控的指标；反如证实疾病模型复制成功的指标；反映质控的指标；反映阴性或阳性的对照指标等映阴性或阳性的对照指标等必须是肯定的结果必须是肯定的结果 F探索性指标探索性指标F前瞻性指标前瞻性指标四四. 如何进行科研课题设计如何进行科研课题设计建立操作程序建立操作程序F落实每个方法落实每个方法F预试成熟，建立程序预试成熟，建立程序F设计实验记录与

22、观察内容实验记录表；单设计实验记录与观察内容实验记录表；单项归纳表；汇总表项归纳表；汇总表No.ControlGroup 1Group 21234 6. 6. 总体设计的预测评估总体设计的预测评估 预期结果阴性或阳性的解释与再证实；预期结果阴性或阳性的解释与再证实； 审定设计能否达到目标审定设计能否达到目标 预期结果追踪深入研究的方向和可行性预期结果追踪深入研究的方向和可行性 预期结果图表设计（发表是否单薄）预期结果图表设计（发表是否单薄） 预期结果的学术价值和地位预期结果的学术价值和地位 （写论文的（写论文的Introduction, M & M Introduction, M &a

23、mp; M ）一、药物一、药物-受体相互作用的测定受体相互作用的测定生化结合研究（全部受体）生化结合研究（全部受体）功能研究（部分受体）功能研究（部分受体）real time measurementstop time measurement 1 1种配体与种配体与3 3种不同受体群的相互作用种不同受体群的相互作用 配体与受体结合的特异性是相配体与受体结合的特异性是相对的，与药物浓度有关对的，与药物浓度有关二、放射受体结合研究二、放射受体结合研究20世纪世纪60年代，年代，125I-ACTH、125I -血管紧张素血管紧张素; preparation:制备制备基本原理：配基与受体特异性结合，基本

24、原理：配基与受体特异性结合，以放射性强弱表示结合容量。以放射性强弱表示结合容量。与放免分析相似（与放免分析相似（1955年发明，年发明，Yalow） 放射配基结合过程图解放射配基结合过程图解 已知药物浓度，可得到受体结合剂量已知药物浓度，可得到受体结合剂量-反应曲线反应曲线加入大剂量非标记配基，封闭受体，得加入大剂量非标记配基，封闭受体，得到非特异性结合到非特异性结合相应公式计算非特异性结合、总结合相应公式计算非特异性结合、总结合固定配基浓度，改变受体量固定配基浓度，改变受体量符合一级动力学：随时间增加，结合达符合一级动力学：随时间增加，结合达最大值；能被无药物介质逆转最大值；能被无药物介质逆

25、转受体结合研究时的平衡情形受体结合研究时的平衡情形 放射性配基结合实验中不同水平的特异性结合放射性配基结合实验中不同水平的特异性结合 特别注意点特别注意点去除非特异性结合去除非特异性结合在一定浓度的敏感在一定浓度的敏感“窗窗”内进内进行行三、功能性研究三、功能性研究测定功能性反应方法多样测定功能性反应方法多样经典生理反应经典生理反应酶活性酶活性第二信使水平第二信使水平反应、表达产物测定反应、表达产物测定报告物质（酶、基因等）报告物质（酶、基因等）要求：要求：F大的信大的信-噪比：机体、仪器噪比：机体、仪器F基础状态稳定基础状态稳定 办法：找出衰减规律办法：找出衰减规律F设对照（不常用）设对照（

26、不常用）F也必须在稳定的也必须在稳定的“窗窗”内进行内进行 图图5 5 生物制备的稳定窗生物制备的稳定窗 不同受体制备进行实验的前提不同受体制备进行实验的前提敏感性和反应性不变（实际不可敏感性和反应性不变（实际不可能）能）纠正系统不稳定性纠正系统不稳定性平衡周期达稳态平衡周期达稳态对照对照 图图6 6 移动基线对剂量移动基线对剂量- -反应曲线的影响反应曲线的影响 激动剂作用后指数性细胞死亡对剂量反应曲线的影响激动剂作用后指数性细胞死亡对剂量反应曲线的影响 组织失去敏感性后，最大反应也丢失组织失去敏感性后，最大反应也丢失一个系统不太可能充当不同组织间基一个系统不太可能充当不同组织间基础反应变化

27、的良好对照础反应变化的良好对照数据必须在稳定的数据必须在稳定的“窗窗”内进行，避内进行，避免继发作用免继发作用靠一个剂量得到的反应不能下结论靠一个剂量得到的反应不能下结论图图8 8 生物制备反应窗生物制备反应窗 图图9 9 剂量反应曲线形状的改变显示继发反应剂量反应曲线形状的改变显示继发反应 生物放大的基本原则生物放大的基本原则具有终端器官反应的细胞体系具有终端器官反应的细胞体系具有很大价值具有很大价值图图10 10 细胞代谢指示物氢离子从细胞释放调控示意图细胞代谢指示物氢离子从细胞释放调控示意图 四、药物反应的表述四、药物反应的表述基础与给药状态的差值基础与给药状态的差值原发反应变异性较大原

28、发反应变异性较大利用差值较好利用差值较好有多种转换方法有多种转换方法图图11 11 两种描述药物反应的方法两种描述药物反应的方法 图图12 12 生物制备剂量反应曲线误差范围生物制备剂量反应曲线误差范围 实验的药物数据的不同处理实验的药物数据的不同处理直接反应以对数浓度作图直接反应以对数浓度作图F有较高精确性有较高精确性药物反应减去基础值药物反应减去基础值F降低反应测量误差降低反应测量误差反应值以基础水平的百分数表示反应值以基础水平的百分数表示F变异大变异大以最大反应值的百分数表示以最大反应值的百分数表示F较好；需要较少的实验次数较好；需要较少的实验次数图图13 13 直接反应以对数浓度作图直

29、接反应以对数浓度作图 图图14 14 从图从图1313显示的数据所计算的显示的数据所计算的deltadelta反应反应 图图15 15 反应以基础值的百分率表示反应以基础值的百分率表示 图图16 Delta16 Delta反应以最大反应以最大deltadelta反应的百分数计算反应的百分数计算 图图17 17 连续累积剂量反应曲线连续累积剂量反应曲线 一、研究文章的撰写确定投哪本杂志F文章的质量与杂志的档次要相称F发表周期论文撰写基本格式与要求论文撰写基本格式与要求 Bacon: Writing makes an exact man.二、基本要求二、基本要求值得研究值得研究数据真实、经过统计学

30、处理数据真实、经过统计学处理按照国际科学界公认的格式编按照国际科学界公认的格式编排排文体要好，含义确切、合乎逻文体要好，含义确切、合乎逻辑辑1978年年1月美、加、英医学期月美、加、英医学期刊编辑：刊编辑：温哥华宣言温哥华宣言1991年年 国际医学期刊编辑委员国际医学期刊编辑委员会修改会修改Br Med J 1991; 302:338-3411995年年 人民军医出版社人民军医出版社医学医学生物学文献方法学生物学文献方法学 题目（题目（title） 作者姓名（作者姓名（authors name） 作者单位地址（作者单位地址（address） 摘要（摘要（abstract） 关键词（关键词（ke

31、y words） 引言（引言（introduction） Nature 例外例外 材料与方法（材料与方法（materials and methods） 结果（结果（results） 讨论（讨论（discussion） 总结或结论（总结或结论（conclusion or summary） 致谢（致谢（acknowledgement） 参考文献（参考文献（reference） 题目（题目（title）：）： 短！短！具体；简洁：通常不超过具体；简洁：通常不超过20个字个字确切；通常在论文写完后确定确切；通常在论文写完后确定“甲氨蝶呤加四物汤治疗白血病甲氨蝶呤加四物汤治疗白血病46例例”避免避免“关

32、于关于 的研究、调查、分析、的研究、调查、分析、观察观察”作者姓名（作者姓名（authors name）：）： 第一作第一作者者correspondence; contributed equally 作者单位地址（作者单位地址（address）摘要（摘要（abstract）目的、方法、结果、结论。目的、方法、结果、结论。150250个字符，或不超过个字符，或不超过1000个英文字母。个英文字母。关键词（关键词（key words）：）：37个。个。引言（引言（introduction）：）：背景、本项研究的理论基础、为什么要背景、本项研究的理论基础、为什么要进行此研究或提出假说。进行此研究或提出假说。全部论文的全部论文的1/10左右篇幅。左右篇幅。引言的最后一句：目的。引言的最后一句：目的。材料与方法（材料与方法（materials and methods）动物：种类、数量、来源、性别、年龄、体重、动物：种类、数量、来源、性别、年龄、体重、饲养条件饲养条件微生物、细胞：种、型、株、系、培养条件微生物、细胞：种、型、株、系、培养条件技术、方法的步骤、条件控制技术、方法的步骤、条件控制仪器设备名称、产地、型号、精度仪器设备名称、产地、型号、精度药品试剂来源、