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1、白及甘露聚糖抗胃溃疡及抗炎、镇痛作用的实验研究(1)【摘要】 目的观察白及甘露聚糖的抗炎、镇痛及抗实验性胃溃疡作用。方法从白及中分离白及甘露聚糖。采用二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀法、小鼠毛细血管通透性进行抗炎试验;采用小鼠醋酸扭体法、热板法进行镇痛实验观察;采用冷水应激、幽门结扎等方法进行胃溃疡试验。结果白及甘露聚糖对小鼠耳廓肿胀有明显对抗作用;对小鼠毛细血管通透性有一定对抗作用;白及甘露聚糖能明显抑制热板和醋酸所致小鼠疼痛,减少热板引起的小鼠疼痛反应和减少扭体次数。大鼠幽门结扎实验显示,白及甘露聚糖(3mg/只)能有效降低溃疡指数(P0.05);大鼠应激性溃疡实验显示,白及甘露聚糖(3mg/只)能
2、有效降低溃疡指数(P0.01)。结论:白及甘露聚糖具有良好抗炎和一定镇痛作用及对实验性胃溃疡有较好治疗作用。 【关键词】 白及甘露聚糖 抗炎 镇痛 胃溃疡白及为多年生草本植物,是常用的止血药物,研究表明,白及块茎中含大量粘胶类物质,一般认为,自芨的止血作用正是与其所含粘胶类成分有关13。本文拟对白及甘露聚糖抗炎镇痛及抗胃溃疡药理作用进行研究。1 材料 (1)药品与试剂:白及购自浙江省中医院。雷尼替丁胶囊:由杭州民生药厂生产,批号20070112,为本实验西药阳性对照药。阿斯匹林:由无锡阿斯特拉公司产,批号20070318。(2) 动物:ICR种小鼠,雌雄各半,体重1822g。SD种大鼠,雌雄各
3、半,体重200220 g。均由浙江中医药大学实验动物中心提供。2 方法2.1 白及甘露聚糖的提取 白及块茎烘干、破碎,用95%乙醇连续抽提两次,残渣干燥后,在残渣中加入蒸馏水浸泡2h,不断搅拌,水浴抽提2次,合并抽提液,离心除沉淀,上清液浓缩至小体积,加入三倍量95%乙醇,4静置过夜,用Sevag 法除去蛋白质,真空干燥得白及粗多糖。用甲醇分级沉淀和DEAE纤维素柱层析得白色干燥甘露聚糖粉末。2.2 白及甘露聚糖镇痛抗炎作用研究2.2.1 白及甘露聚糖对小鼠扭体的影响4 ICR小鼠,雌雄各半,随机分成6组,按照白及甘露聚糖高剂量组4mg/只、中剂量组2mg/只、低剂量组1mg/只,阿斯匹林组8
4、mg/只,空白对照组(等容积水)灌胃给药15d,末次灌胃给药1h后,腹腔注射0.6%醋酸(HAC),0.2ml/只,记录15min内动物扭体次数。2.2.2 白及甘露聚糖对小鼠热板反应的影响4 ICR小鼠,雌雄各半,随机分成6组,按照白及甘露聚糖高剂量组4mg/只、中剂量组2mg/只、低剂量组1mg/只,阿斯匹林组8mg/只,空白对照组(等容积水)灌胃给药15d,末次给药后15、30、60min分别将小鼠放在(550.5)的热板上,测定小鼠痛阈值。如60sec小鼠仍无反应,其痛阈以60sec计算,记录实验数据。2.2.3 白及甘露聚糖对小鼠耳廓肿胀的影响4 ICR小鼠,雌雄各半,随机分成6组,
5、按照白及甘露聚糖高剂量组4mg/只、中剂量组2mg/只、低剂量组1mg/只,阿斯匹林组8mg/只,空白对照组(等容积水)灌胃给药15d,末次给药0.5h后,将二甲苯20l滴涂于左耳,15min后将动物处死,用直径8mm打孔器在左、右耳相同部位打孔,分别称重,计算重量差值,记录实验数据。2.2.4 白及甘露聚糖对小鼠毛细血管通透性的影响4 ICR小鼠、雌雄各半,随机分成6组,按照白及甘露聚糖高剂量组4mg/只、中剂量组2mg/只、低剂量组1mg/只,阿斯匹林组8mg/只,空白对照组(等容积水)灌胃给药15d,末次给药后0.5h,尾静脉注射10%伊文氏蓝生理盐水溶液0.2ml,再腹腔注射醋酸(HA
6、C)1ml,30min后取腹腔液于620nm测光密度,以光密度值作组间统计学处理,记录实验数据。2.3 白及甘露聚糖对胃溃疡的治疗作用2.3.1 白及甘露聚糖对幽门结扎性溃疡的影响4 SD大鼠,雌雄各半,随机分成5组,按照白及甘露聚糖高剂量组12mg/只、中剂量组6mg/只、低剂量组3mg/只,阿斯匹林组70mg/只,空白对照组(等容积水)连续灌胃15d,在末次给药前48h禁食,自由饮水,末次给药1h后,用乙醚麻醉动物,打开腹腔,结扎幽门。手术18h后,开腔取胃,向胃腔内注入1%甲醛6ml,将胃浸入1%甲醛中,10min后沿胃大弯剪开胃,观察胃部的溃疡情况,记录胃部溃疡点数,以溃疡点数为指数计
7、算溃疡抑制百分率和溃疡发生百分率。2.3.2 白及甘露聚糖对应激性溃疡的影响4 SD大鼠,雌雄各半,随机分成5组,按照白及甘露聚糖高剂量组12mg/只、中剂量组6mg/只、低剂量组3mg/只,雷尼替丁组6mg/只,空白对照组(等容积水),连续灌胃给药15天,在末次给药前25h禁食自由饮水,在禁食至24h,各组末次给药,将动物垂直浸入25水中,深度至动物剑突,24h后取出处死,结扎幽门和贲门后取出胃。向胃内注入1%甲醛10ml,再将胃浸泡于1%甲醛液中10min。沿胃大弯剖开,观察溃疡情况,拍照记录,记录胃粘膜损伤长度,并以胃粘膜损伤长度总和为溃疡指数。2.4 统计学处理 采用t检验,所有数据以
8、xs表示。本篇论文由网友投稿,3COME文档只给大家提供一个交流平台,请大家参考,如有版权问题请联系我们尽快处理。3 结果3.1 白及甘露聚糖镇痛作用研究 在小鼠扭体实验和热板疼痛反应实验结果见表1。表1 白及甘露聚糖镇痛作用(略)与空白对照比较,*P0.05,*P0.013.2 白及甘露聚糖抗炎作用研究 小鼠耳阔肿胀实验和小鼠毛细血管通透性实验结果见表2。表2 复方蜂胶片对小鼠抗炎作用的影响(略)与空白对照比较,*P0.05,*P0.013.3 白及甘露聚糖对幽门结扎性溃疡的影响 在幽门结扎性实验中,以溃疡点数为指数计算溃疡抑制百分率,计算结果见表3。表3 白及甘露聚糖对大鼠幽门结扎溃疡的影
9、响(略)与空白对照比较,*P0.05,*P0.013.4 白及甘露聚糖对应激性溃疡的影响 在应激性溃疡实验中,溃疡指数计算结果见表4。表4 白及甘露聚糖对大鼠应激性溃疡的影响(略)与空白对照比较,*P0.05,*P0.014 讨论 目前治疗 PU 的药物取得很大进展,但因目前使用的药物存在不同程度的毒副作用,使很多患者无法接受长期治疗。因此,各国学者仍在努力寻找疗效好、毒副作用小的新型抗溃疡药物。多糖是一类天然高分子化合物具有多种生物活性,而且几乎无毒。近些年,学者们陆续发现某些多糖具有明显的抗溃疡活性,为抗消化性溃疡药物的研发提供了一个广阔的前景7。 白及 “生肌治疮,胃中邪气、痱缓不收”,
10、局部应用即有止血收敛作用。临床常用于创伤性治疗,也广泛应用于胃溃疡的临床治疗,但相关实验研究甚少。白及中含丰富的白及胶质,但对白及胶质中富含的白及多糖的研究尚未见相关药理报道。前期文献报导,甘露聚糖临床研究发现具有较好抗胃溃疡作用8。本实验再次确证白及甘露聚糖具有抗动物胃溃疡作用。 白及可以提高创面羟脯氨酸的量,促进创面组织中纤维细胞、血管内皮细胞的增生,提高创伤巨噬细胞的量,这些均可以促进创面的愈合。在本研究中,白及甘露聚糖在镇痛试验中对于醋酸引起的扭体反应具有明显的抑制作用,对于热板引起的小鼠疼痛反应具有明显的延后作用。这一药理实验结果明确显示了白及甘露聚糖具有明显的镇痛作用。在抗炎试验中
11、,我们可以看到白及甘露聚糖能明显抑制二甲苯引起的小鼠耳片肿胀,这说明白及甘露聚糖同样具有抗炎作用。白及甘露聚糖很可能也是通过抗炎镇痛作用而起到抗胃溃疡的作用。【参考文献】 1 吴宗德,刘汉君,孙颖媛.白及粉治疗消化性溃疡60例疗效观察J.遵义医学院学报,2004,27(3):255256.2 陶振宇,兰克涛,史春雷.白及和三七联合奥美拉唑和克拉霉素治疗胃溃疡70例疗效观察J.河北医学,2004,10(3):203205.3 刘莹,崔炯莫,李洪斌,等.白及超微粉对大鼠实验性胃溃疡的影响J.中草药,2008,39(3):397400.4 陈奇.中药药理研究方法学M.北京:人民卫生出版社,1994: 467.5 李兆申.应激性溃疡发生机制及预防对策研究现状J.解放军医学杂志,1999,24(6):3913.
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