海水―挥发性酚的测定―4-氨基安替比林分光光度法

1、FHZDZHS0039海水挥发性酚的测定4氨基安替比林分光光度法F-HZ-DZ-HS-0039海水一挥发性酚的测定一4-氨基安替比林分光光度法1范围本方法适用于海水及工业排污口水体中低于10mg/L酚含量的测定。酚含量超过此值，可用溴化滴定法。检出限:1.1卩g/L2原理被蒸馏出的挥发酚类在PH10.0 ±.2和以铁氰化钾为氧化剂的溶液中，与4-氨基 安替比林 反应形成有色的安替比林染料/此染料的最大吸收波长在510nm处,颜色在30min内稳定，用三氯甲烷萃取，可 稳定4h并能提高灵敏度，但最大吸收波长移至460nm /本方法不能区别不同类型的酚，而在每份试样中各种酚类化合物的百分

2、组成是 不确定的/因此，不能提供含有混合酚的通用标准参考物，本方法选用苯酚作为参比 标准。来自水体的干扰可能有分解酚的细菌、氧化及还原物质和样品的强碱性条件/ 在分析前除去干扰化合物的处理步骤中可能有一部分挥发酚类被除去或损失。因 此，对一些高污染海水，为消除干扰和定量回收挥发酚类，需要较严格的操作技术。干扰物质的消除：氧化剂:水样中的氧化剂能将酚类氧化而使结果偏低。采样后取一滴酸化了的水样于淀粉-碘化钾试纸上,若试纸变蓝则说明水中有氧化剂。采样后应立即加入硫酸亚铁溶液或抗坏血酸 溶液以除去所有的氧化性物质。过剩的硫酸亚铁或抗坏血 酸在蒸馏步骤中被除去。油类和焦油：如水样中含有石油制品等低沸点

3、污染物 ，可使蒸馏液浑浊，某些酚 类化合物 还可能溶于这些物质中。采样后用分液漏斗分离出浮油 ，在没有硫酸铜存 在的条件下，先用粒 状氢氧化钠将pH调节至1212.5使酚成为酚钠，以避免萃取酚 类化合物。尽快用四氯化碳从水相中提出杂质（每升废水用40mL四氯化碳萃取两 次。并将pH调到4.0（见6.1。用三氯甲烷萃取时，须用无酚水作一试剂空白，或先用1g/L氢氧化钠溶液洗涤三 氯甲烷，以除去可能存在的酚。二氯甲烷可代替三氯甲烷，尤其在用氢氧化钠提纯三 氯甲烷溶液形成乳 浊液时。硫的化合物酸化时释放出硫化氢能干扰酚的测定，用磷酸将水样酸化至pH4.0, 短时间搅拌曝气即可除去硫化氢及二氧化硫的干

4、扰。然后加入足够的硫酸铜溶液 , 使样品呈淡蓝色或不再有硫化铜沉淀产生。然后将 pH调到4.0。铜（n离子抑制 了生物降解，酸化保证了铜（n离子的存在并消除样品为强碱性时的化学变化。3试剂除非另作说明，所用试剂均为分析纯，水为不含酚和氯的蒸馏水。3.1无酚水置普通蒸馏水于全玻璃蒸馏器中，加氢氧化钠至强碱性，滴入高锰酸钾溶液至深 紫红色,放入少许无釉瓷片（浮石或玻璃毛细管亦可，加热蒸馏。弃去初馏份。收集 无酚水于硬质玻璃 瓶中,或于每升蒸馏水中加入0.2g经280E活化4h的活性炭粉 末，充分振摇后用0.45卩n滤膜过滤。3.2三氯甲烷（CHCI3或二氯甲烷（CH2CI 2。3.3精制苯酚将苯酚

5、（C6H 50H置于50C70C热水浴中溶化，小心地移入100mL蒸馏水中, 用包有铝箔的软木塞塞紧，其中插有一支250C水银温度计,蒸馏瓶的支管与空气冷 凝管连接，用一干燥的锥形烧瓶接受器。如图1所示。电炉加热蒸馏，弃去带色的初馏出液，收集182C 184C馏份（无色密封避光保 存。3.4 盐酸（p 1.19 g/mJL3.5磷酸溶液，1+9。3.6硫酸铜溶液100 g/L:称取10g硫酸铜（CuS04 5H 20溶解于水中并稀释至100mL l3.7 溴酸盐-溴化物溶液，C（1/6KBrO3=0.100mol/L:称取2.7848g无水溴酸钾（KBrO3溶于水中，加10g溴化钾（KBr溶解

6、后稀释至1000mL l3.8缓冲溶液，pH 9.8:称取20g氯化铵（NH4Cl溶于100mL浓氨水（NH 3 H 2O , p 0.90g/m中。此溶液 pH 为 9.8。3.9 4氮基安替比林溶液，20g/L:称取2g 4-氨基安替比林C6H 5NN （CH 3 C （CH 3:C （NH 2 C :O溶于水中，并稀释至100mL ,贮于棕色瓶中，置冰箱内。有效期一 周。3.10铁氰化钾溶液，80g/L:称取8g铁氰化钾K3 Fe（CN 6溶于水中，并稀释至 100mL。贮于棕色瓶中。置冰箱内。可稳定一周。颜色变深时，应重新配制。3.11硫代硫酸钠标准滴定液，C（Na2S 2O 3=0.

7、0250mol/L称取6.21g硫代硫酸钠（Na2S 20 35H2O用刚煮沸冷却的水溶解,加入 约0.2g碳酸钠（Na2C0 3，待全部溶解后，移入1000mL容量瓶中 摇匀。移入棕色试 剂瓶中。置于阴凉处。其 准确浓度用重铬酸钾标准溶液标定。重铬酸钾标准溶，C（61K 2Cr 20 7=0.0250mol/L:称取1.2258g预先在110C烘2h的光谱 纯重铬酸钾 （K2Cr 2O 7，用水溶解，移入1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。硫代硫 酸钠溶液的标定：取20.00mL重铬酸钾标准溶液C（61K 2Cr 20 7 =0.0250mol/L三份,分别置于三个250mL具塞三角

8、瓶中，加50mL 硫酸溶液C（21H 2S0 4 =3mol/L, 1g碘化钾（KI ,于暗处放置5min。用硫代硫酸钠标准溶液 滴定至浅黄色，加1mL淀粉溶液（10g/L继续滴定至蓝色刚消失（终点显示三价铬离子 的绿色。记录消耗的硫代硫酸钠溶液的毫升数。同时用水作试剂空白用硫代硫酸钠滴定。按公式（1计算硫代硫酸钠溶液的浓度：C（Na2S 20 3=VV C 1 x （1式（1中:C（Na2S 20 3硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol/L;C 重铬酸钾标准溶液的浓度，mol/L;V 1 重铬酸钾标准溶液体积,mL ;V 滴定消化硫代硫酸钠溶液的体积（减空白，mL3.12酚标准溶液酚标准贮备溶液

9、，1.00g/L:称取I.OOOOg精制苯酚溶于水中，移入1000mL 容量瓶中,用水稀释至刻度，摇匀。此溶液1.00mL含1.00mg酚。通常直接称取精制的苯酚即可配标准溶液，若为非精制苯酚可按下法标定：移取10.00mL待标定的酚贮备溶液于250mL碘量瓶中，加入50mL水，加10.0mL溴酸盐-溴化钾溶液C （6IKBrO 3 =0.100mol/L及5mL盐酸（p 1.19g/mL立即盖紧瓶塞，摇匀。避光 放置 5min后用硫代硫酸钠标准溶液C（Na2S 2O 3=0.0250mol/L滴定至呈淡黄色时，加入 1mL淀粉溶液（10g/L继续滴定至蓝色刚好消失为止，记下硫代硫酸钠标准溶液

10、滴定 体积V 2。同时用 水作试剂空白滴定，消耗硫代硫酸钠标准溶液体积为 V 1。按公式（2计算酚标淮贮备溶液的浓度：（10100068. 150250. 021 XXX -=V V f p（2式（2 中：p f酚溶液浓度，卩g/mL; V 1试剂空白消耗硫代硫酸钠标准溶液的毫升数, mL ;V2酚贮备溶液消耗硫代硫酸钠标准溶液的毫升数，mL。酚标准溶液,10.0卩g/r移取 10.0mL （或相当于10.0mg酚的体积酚标准 贮备溶液（1.00mg/mL于1000mL容量瓶中,用水稀释至刻度，摇匀。此溶液1.00mL 含10.0卩酚,当天配制。酚标准使用溶液，1.00卩g/r移取 10.0m

11、L酚标准溶液（10.0卩g/mLT 100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液1.00mL含1.00卩酚。现用现配。3.13甲基橙指示剂溶液,2g/L3.14淀粉溶液,10g/L:称取1.0g可溶性淀粉，盛于200mL烧杯中，加少量水调成糊状加入100mL沸水搅拌，冷后加入0.4g氯化锌（ZnCI2或0.1g水杨酸（C7H 60 3 防腐。4仪器设备4.1分光光度计4.2蒸馏装置:全玻璃，包括500mL玻璃蒸馏器和蛇形冷凝管。如图1所示图1苯酚蒸馏装置示意图1 10mm或25mm微量蒸馏烧瓶；2空气冷凝管；3 250C水银温度计；4 电炉;5铁架后;6软木塞;7三角烧瓶（收集苯酚5试样制

12、备5.1海水样品用玻璃或金属采样器采集，水样现场预处理方法：加H 3P0 4至pH <4,每升水样 加入2g硫酸铜（CuSO 4 5H 20 ,贮存于硬质玻璃瓶中,在4C保存。 保存时间 24h ,详见 GB17378.3 1998。5.2试样量测定水样用量200mL。6操作步骤6.1水样前处理量取200mL海水样（若酚量高可少量取水样，记下体积V ,加纯水至200mL , 置于500mL全玻璃蒸馏器中，用磷酸溶液（1+9调节pH到4.0左右以甲基橙作指示 剂（2g/L,使水样由 桔色变为橙红色。加入5mL硫酸铜溶液（100g/L ,放入少许无釉 瓷片（浮石或玻璃毛细管，加热。蒸出150

13、mL左右时，停止蒸馏,在沸腾停止后,向 蒸馏瓶内加入约50mL水，继续蒸馏,直到收集馏出液（D大于或等于200mL为止。 若样品已按5.1条所述的方法加磷酸和硫酸铜 保存,则可直接蒸馏（若水样经稀释则 须补加磷酸及硫酸铜溶液。用磷酸将样品酸化到pH4.0以防止酚类化合物分解.加 入硫酸铜抑制生物对酚的氧化作用。注1：将水样蒸馏，馏出液清亮、无色，从而消除浑浊和颜色的干扰，铁（川能与铁 氰酸根生成棕色产物而干扰测定，蒸馏将排除这一干扰。注2:测定酚的水样必须用全玻璃蒸馏器蒸馏，如用橡皮塞，胶皮管等联接蒸馏烧 瓶及冷凝管，都能使结 果偏高和出现假阳性而产生误差。注3:停止蒸馏时，须防电炉余热引起的

14、爆沸，以免将瓶塞冲起砸碎或沾污冷凝 管。6.2工作曲线的绘制移取 0、0.50、1.00、2.00、4.00、7.00、10.00、15.00mL 酚标准使用溶液 （1.00卩g/mL分别置于预先盛有100mL水的250mL分液漏斗中,最后加水至200mL 系列各点含酚浓度分别 为 0、2.50、5.00、10.0、20.0、35.0、50.0、75.0 卩 g/L向各分液漏斗内加入I.OOmL缓冲溶液（pH9.8，混匀。再各加入1.0mL4-氨基安 替比林溶 液（20g/L ,混匀。力卩1.0mL铁氰化钾溶液，混匀。放置10min。力卩10.0mL 三氯甲烷（CHCI 3 ,振摇2min，静

15、置分层。有机层于波长 460nm处,用三氯甲烷作参 比，测定吸光度（A i和标准 空白（A o。以吸光度（A i -A o为纵坐标，酚浓度（卩g/为横坐标绘制标准曲线。注1:pH在8.010.0范围内显示的颜色都可以，但为了防止芳香胺（苯胺、甲苯 胺、乙酰苯胺 的干扰,以pH9.810.2最合适，因为此范围内20mg/L苯胺所产生的颜 色仅相当于0.1mg/L酚的颜色。注2:NH 4OH-NH 4Cl体系的缓冲溶液比较稳定，由于增大了溶液NH 3的浓度， 可以抑制4-氨基安替比林被 氧化为安替比林红的反应。注3:游离氯能氧化4-氨基安替比林，还能与酚起取代反应生成氯酚。注4:主试剂在空气中易变

16、质而使底色加深，此外,4-氨基安替比林的纯度越高，灵 敏度越高，如配制的4-氨基安替比林溶液颜色较深时，可用活性炭处理脱色。注5:过硫酸铵（NH 4 2S 20 8可代替铁氰化钾K3F e （CN6。注6:各种试剂加入的顺序很重要，不能随意更改。注7:吸收皿在连续使用过程中，宜用氯仿荡洗，挥发至干。6.3水样测定将馏出液（D转入250mL分液漏斗中，按标准曲线绘制操作步骤（6.2测定试样 吸光度A w和试样空白吸光度A b。7结果计算由A w -A b .查标准曲线或用线性回归方程计算水样中挥发酚的浓度（卩g/L若是经稀释后再蒸馏的水样则按公式（3计算水样中挥发酚的浓度V V Cif = P式33 中：p f海水中挥发性酚的浓度，卩g/L；C 查标准曲线得挥发性酚的浓度，卩g/L;V 1 馏出液（D体积,mL ;V