高速逆流色谱法

1、编辑课件1第第9章章 高速逆流色谱法高速逆流色谱法High Speed CountercurrentChromatographyHSCCC编辑课件2一、概述一、概述l Ito，70年代提出，年代提出，80年代提出年代提出CCC，一种液液，一种液液色谱分离技术色谱分离技术逆流分配逆流分配液滴逆流色谱液滴逆流色谱高速逆流色谱高速逆流色谱l 参考书参考书1.逆流色谱技术逆流色谱技术张天佑，北京科学技术出版社，张天佑，北京科学技术出版社，1991年年2.高速逆流色谱分离技术与应用高速逆流色谱分离技术与应用曹学丽，化学工业曹学丽，化学工业出版社，出版社，2009年年编辑课件3二、分离原理二、分离原理l

2、连续液液萃取过程，固定相和流动相均为液体连续液液萃取过程，固定相和流动相均为液体l 问题是：如何在流动相流动时使固定相不动？问题是：如何在流动相流动时使固定相不动？两种基本模式两种基本模式 流体静力学平衡系统流体静力学平衡系统 洗脱速度太慢，一般需要两天或更长时间。洗脱速度太慢，一般需要两天或更长时间。 流体动力学平衡系统流体动力学平衡系统编辑课件4编辑课件5编辑课件6高速逆流色谱的仪器流程高速逆流色谱的仪器流程三、仪器结构三、仪器结构编辑课件7编辑课件8柱：柱：长的软管长的软管(如聚四氟乙烯管如聚四氟乙烯管)绕制成绕制成载体：载体：无无固定相：固定相：液体。用某一种有机水两相溶剂体系或双水液

3、体。用某一种有机水两相溶剂体系或双水和溶剂体系的上层或下层作为色谱过程的固定相，用离和溶剂体系的上层或下层作为色谱过程的固定相，用离心力场来支撑住柱内的液态相。心力场来支撑住柱内的液态相。流动相：流动相：若用溶剂体系中的另一层作为流动相，带着混若用溶剂体系中的另一层作为流动相，带着混合样品由泵的压力推入分离管柱，样品就会穿过两个液合样品由泵的压力推入分离管柱，样品就会穿过两个液相对流的整个管柱空间。相对流的整个管柱空间。分离：分离：溶剂萃取过程成千上万次地、高效地、自动连续溶剂萃取过程成千上万次地、高效地、自动连续地予以完成。各个组分也就会按其在两相中的分配系数地予以完成。各个组分也就会按其在

4、两相中的分配系数分离开来分离开来。编辑课件9四、方法特点四、方法特点1 固定相、流动相均为液体，完全排除了载体对样品组分的吸固定相、流动相均为液体，完全排除了载体对样品组分的吸附、玷染、变性、失活等不良影响，能避免不可逆吸附造成的色附、玷染、变性、失活等不良影响，能避免不可逆吸附造成的色谱峰拖尾现象，谱峰拖尾现象，实现高回收实现高回收。2分离柱容积可大，分离柱容积可大， 没有填料，柱内空间均为有效空间。因此，没有填料，柱内空间均为有效空间。因此，样品负载量较大样品负载量较大，制备量可从毫克到克量级。制备量可从毫克到克量级。3 逆流色谱不用填料，分离过程不是淋洗或洗脱过程，而是对逆流色谱不用填料

5、，分离过程不是淋洗或洗脱过程，而是对流穿透过程。溶剂用量少，流穿透过程。溶剂用量少，成本低。成本低。4. 逆流色谱的分离效率比不上气相色谱和高效液相色谱等技术，逆流色谱的分离效率比不上气相色谱和高效液相色谱等技术，不宜进行复杂混合物的全分析不宜进行复杂混合物的全分析。5. 适合用于分离纯化适合用于分离纯化，预处理条件宽松，回收率高，制备量大，预处理条件宽松，回收率高，制备量大。编辑课件10四、高速逆流色谱的溶剂选择四、高速逆流色谱的溶剂选择l 溶剂体系的选择原则溶剂体系的选择原则不造成样品的分解或变性不造成样品的分解或变性足够高的样品溶解度足够高的样品溶解度样品在系统中有合适的分配系数样品在系统中有合适的分配系数固定相能实现足够高的保留固定相能实现足够高的保留l 溶剂应该进行分层实验，实验结果决定流速和洗溶剂应该进行分层实验，实验结果决定流速和洗脱方式脱方式l 样品要溶解于流动相或固定相之中样品要溶解于流动相或固定相之中编辑课件11五、高速逆流色谱的应用五、高速逆流色谱的应用l 天然药物的分离和分析天然药物的分离和分析l