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文档简介

1、生化考研重点知识总结第一章 单糖多糖与碘显色,至少需要的葡萄糖残基数:6唾液淀粉酶激活剂:Cl-几个典型非还原糖:蔗糖、糖原、淀粉形成N-糖肽键的单糖或衍生物是: 第二章 油脂几个非饱和脂肪酸双键数:油酸:1 亚油酸:2 亚麻酸:3人不能自身合成的必须脂肪酸: 亚油酸、亚麻酸四种脂类转运脂蛋白:CM:乳糜微粒,转运外源性三酰甘油酯 VLDL:极低密度脂蛋白,转运内源性三酰甘 油酯 LDL:低密度脂蛋白,转运内源性胆固醇 HDL:高密度脂蛋白,转运外源性胆固醇 第三章 氨基酸与蛋白质几种主要氨基酸及三字母缩写两特殊:Pro、Gly芳香:酪(Tyr)色(Trp/Try,吸光最强)苯(Phe)八种必

2、需氨基酸:甲携来一本亮色书,Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr侧链为羟基氨基酸:苏(Thr)丝(Ser)酪(Tyr)酸性氨基酸:天(Asp)谷(Glu)对应两酰胺:Asn、Gln碱性氨基酸:赖(Lys)精(Arg)组(His)其它:丙氨酸(Ala)PIPI的计算:PI=(PK1+PK2)/2=(PK1+PKRCOOH)/2=(PK2+PKRNH2)/2PH的计算:PH=PK1+Lg(R/R+)=PK2+Lg(R-/R)PH =7的水中溶蛋白,PH=6,则该蛋白PI<6:蛋白溶后PH下降为6,表明蛋白的COOH电离出H+,则产生了R-,PH=6>PI 时有

3、R-蛋白二级结构螺旋:Sn=3.613,存在Pro时不形成螺旋,右手螺旋折叠:同/反向,肽键中H与O成氢键,轴距0.35nm转角:转角处为Gly超二级结构:无规卷曲、结构域三级结构:作用力(二硫键、疏水作用力、氢键、静电离子键、范德华力)蛋白结构分析N端分析法:FDNB(Sanger)、PITC(Edman)、DNS-Cl(丹磺酰氯)、氨肽酶法C端分析法:羧肽酶法、无水肼解法 羧肽酶A:不能水解C端为Lys、Arg、Pro的肽键;羧肽酶B:能水解C端为Lys、Arg的肽键;C端倒数第二位是Pro时,A、B都不能水解打开二硫键:还原法(巯基化合物,碘乙酸保护)、氧化法(过甲酸)专一切断:胰蛋白酶

4、(Lys、Arg-COOH肽键);CNBr(Met-COOH肽键);胰凝乳蛋白酶();显色反应Follin酚:蓝色,酚基(Tyr)、吲哚基(Trp),组分(CuSO4+磷钼酸)Millon:红色,酚基(Tyr),组分(HgNO3+Hg(NO3)2)坂口反应:红色,胍基(Arg),组分(萘酚,NaClO)黄色反应:黄色,芳香氨基酸,组分(浓HNO3)双缩脲反应:紫红色,肽键,多肽,组分(NaOH+CuSO4)乙醛酸反应:紫色,吲哚基(Trp)几种重要氨基酸提供活性甲基的:S-腺苷Met形成N-糖肽键的:Asp胶原蛋白中含量高的氨基酸:Gly、Ala、Pro、HO-Pro、HO-Lys蛋白分离纯化

5、技术:透析、超滤;密度梯度离心;凝胶过滤;PI法、盐析、有机溶剂法;电泳、离子交换;吸附层析;亲和层析凝胶过滤大分子先出,凝胶电泳相反:机理分子运动速度决定因素:大小、电荷量、形状蛋白离子交换层析与洗脱:凝胶电泳三效应:电荷、分子筛、浓度效应蛋白含量测定测N:凯氏定氮、紫外吸光、双缩脲吸光、福林酚显色吸光测M:沉降离心、凝胶过滤(凝胶排阻层析)、SDS-PAGE凯氏定氮:HNO2反应,生成的N2中氨基酸占1/2其它分离二硫基的肽段可用:SDS-PAGE几个主要氨基酸的PI值:几种重要蛋白:镰刀贫血病:GluVal,第6位与烷化剂(碘乙酸)反应的氨基酸:Cys(半胱氨酸)第四章 酶学酶活化中心组

6、成:结合部位、催化部位计算:活力单位(IU、Kat)、比活力(IU/mg)、转化数/转化周期、米氏方程各可逆抑制作用的动力学特点:Km、Vmax几个抑制作用:竞争抑制(丙二酸对琥珀酸脱氢酶);有有机磷(与丝氨酸羟基共价不可逆);CO、CN(作用于Cytaa3);不可逆抑制(重金属、有机砷、CN化物、硫化物、CO)酶促反应初速度与E、T有关以“三点结合”模型作用的酶:甘油激酶酶的专一性专一水解葡萄糖形成的二酯键的酶:以O2为直接氢受体的氧化酶:VC氧化酶、细胞色素氧化酶别构酶两独立功能部位:活性中心、变构中心动力学曲线:S型,其它为双曲线具有效应:协同效应、变构效应典型代表血红蛋白:协同效应、波

7、尔效应、变构效应酶分离纯化要求:纯化倍数高、回收率高纯化倍数=比活力/纯化前总比活力 回收率=活力单位数/纯化前活力单位数方法:同蛋白质竞争性抑制剂:增S可减弱抑制作用患尿黑酸症的病人是由于:缺少尿黑酸氧化酶(尿黑酸氧化酶遗传缺陷)第五章 核酸反向互补配对:ACG-CGT(U)N-苷键:(C1-C5),嘌呤(N9-C1),嘧啶(N1-C1)SnRNA:核仁不均一RNA,功能(促进转录、)核酸分离技术2 凝胶电泳:三效应、分子运动速度决定因素 见蛋白质离子交换层析:阳离子交换层析,核苷酸脱下顺序:UGCA 阴离子交换层析,核苷酸脱下顺序:CAUG3 亲和层析:可用亲和层析法分离的核酸:mRNA(

8、PolyA尾)DNA测序三法:加减法(Sanger、1975),化学断裂法,双脱氧终止法(Sanger、1977、原理)不能形成两性离子的核苷酸是UMP:原因cNMP最重要的cNMP:cAMP、cGMPcAMP:第二信使cAMP分子内有:环化的磷酸二酯键cAMP与cGMP:生物作用并不是完全相反第六章 分子生物学与基因工程基因组学启动子组成3部分:识别部位(-35、CG/CAAT),结合部位(-10、TATA),转录起始点高度重复序列:卫星DNA、小卫星DNA、微卫星DNA原核生物基因重叠类型:基因家族按特点分三类:简单多基因家族、复杂多基因家族、发育调控的复杂多基因家族 基因家族按组成分三类

9、:DNA复制DNA复制方式:线性(眼型),环状【(大肠杆菌)、滚环(病毒质粒)、D型(线粒体、叶绿体)】DNA复制需引物:转录不需引物原核DNA聚合酶功能:损伤修复、校正、合成DNA基因工程酶RNase:RNaseA(嘧啶35)、RNaseT1(G的35)、RNaseT2(A的35)DNA连接酶所需能量:原核ATP、真核NAD+转移水解DNA-RNA中的RNA的酶:RNaseH、逆转录酶(有RNaseH活性)牛脾磷酸二酯酶水解RNA所得产物:5磷酸切开,产生3单磷酸核苷蛇毒磷酸二酯酶水解RNA所得产物:3-OH切开,产生5单磷酸核苷核酸合成酶:DDDP(依赖DNA的DNA聚合酶)、RDDP(依

10、赖RNA的DNA聚合酶)、DDRP(依赖DNA的RNA聚合酶)RNAPol2:RNAPolB,合成hnRNA,分布在核质中RNA用强碱水解产生:2 -核苷酸、3-核苷酸混合物限制内切酶切割特点:4-8bp、6bp主要,成黏性、平齐末端,成回文序列,甲基化难切tRNA结构含稀有碱基最多:D(二氢尿嘧啶)、(假尿嘧啶)、I(次黄嘌呤)四环四臂五区:D臂、TC臂、氨基酸臂(受体臂)、反密码子臂二级:三叶草三级:倒L基因表达DNA重组过程中DNA连接四方式:粘性末端连接、同聚物加尾法、加衔接物连接法、加DNA接头连接法转位:三类转位因子【(插入序列IS)、转座子(Tn)、可转座噬菌体】,转位后遗传效应

11、(突变、产生新基因、染色体畸变)转录:转录5端常见起始核苷酸是G、A,原核终止子在终止位点前有PolyU翻译:参与肽链延伸的因子(EF-Tu、EF-TS、移位酶/G因子),肽基转移酶催化组分(23SrRNA),蛋白合成时生成肽键的能量来自高能酯键水解转录抑制剂:利福平、利迪链霉素、放线素D、-鹅膏蕈碱翻译抑制剂:抗生素(氯霉素、链霉素、卡那霉素、新霉素、四环素、土霉素)机理 干扰素(使起始因子eIF2磷酸化失活),毒素(抑制真核肽链延长)基因工程基因工程载体:必备条件(自主复制、有标志基因便于筛选、易引入受体细胞、酶切位点少、M大可携带大片基因) 常用载体(质粒、病毒、噬菌体、人工大染色体改造

12、而来)DNA文库:含某种生物体全部被转录成mRNA的所有基因序列密码子起始密码子:原核(AUG、GUG、UUG,对应fMet)真核(AUG,对应Met)起始tRNA:tRNAMet、tRNAfMet终止密码子:UAA、UAG、UGA无义密码子:UAA、UAG、UGA线粒体中三种特殊密码子:UGA-色氨酸原核RF1识别的密码子:UAA、UAX RF2识别的密码子:UAA、UGA密码子性质:不重叠、特殊性、通用性、简并性、连续性、摆动性摆动性:A-U,U-A、G,C-G,G-C、U,I-A、U、C其它SnRNA功能:RNA成熟加工、与染色质结合、调节基因活性多拷贝基因有:组蛋白基因、3种印迹法对应

13、检测对象:S-DNA、N-RNA、W-ProTm的影响三因素:C三G、盐浓度(Na+)、DNA均一性(均一窄)Tm=(C+G)%×0.41+69.3第七章 维生素与激素几种重要酶的辅酶脱羧酶:酮酸脱羧酶(TPP/VB1)、氨基酸脱羧酶(磷酸吡哆醛(VB6)磷酸吡哆醛:氨基酸脱羧酶、转氨酶的辅酶以FAD为辅酶的酶:二氢硫辛酰胺脱氢酶、脂酰辅酶A脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、线粒体磷酸甘油脱氢酶羧化酶的辅酶:生物素(VB7)VB12:钴胺素(参与甲基转移)氧化还原酶的辅酶:NAD+以NADP为辅酶的酶:苹果酸酶、6-p-G脱氢酶以FAK为辅酶的酶:脂酰辅酶A脱氢酶几种特定功能的维生素凝血维生素:

14、VK,脂溶抗血维生素:VC,水溶含A的维生素:NAD+、NADP、FAD、CoASHVD:体内活性最高的VD是:1,25-二羟基胆钙化醇1,25-(OH)2D3两种VD原:VD3(7-脱氢胆固醇),VD2(麦角固醇)VD3的形成:胆固醇7-脱氢胆固醇VD3胰岛素等激素的受体是:含N激素受体在激素作用下与腺苷酸环化酶的耦联是由G蛋白介导实现的蛋白质类激素受体位于:细胞质膜上类固醇激素受体位于:细胞内第八章 生物氧化肌肉或神经细胞储存能量的高能化合物是:磷酸肌酸(IP3)高能化合物有:磷酸肌酸、1,3-二磷酸甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)、生物合成中主要的还原剂;NADPH,来源于HMS(磷酸

15、戊糖途径/磷酸己糖旁路)生物氧化过程中,ATP生成方式:底物水平磷酸化、氧化磷酸化线粒体的嵴:外表面与基质接触,含有氧化磷酸化组分ATP合成酶F0F1-ATPase是:催化ATP合成的酶形式,一种膜结合复合物,单独存在时没ATP酶活性F0:含H+通道ATP合成机理细胞质脱下的一对氢进入线粒体的三方式:异柠檬酸穿梭、苹果酸穿梭、甘油磷酸穿梭丙氨酸脱氢酶系的辅因子:TPP(VB1)、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+ 丙氨酸脱氢酶系的酶:丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶醛缩酶的底物是:F-1,6-2P在TCA、有氧呼吸链中产生的ATP最多的是:-酮戊二酸琥珀酸第九章 糖

16、代谢糖酵解部位:胞液过程:葡萄糖、糖元转变为丙酮酸三关键酶:己糖激酶:包括(葡糖糖激酶、果糖激酶),不受ATP/AMP的调节磷酸果糖激酶:限速,主要激活剂(2,6-二磷酸果糖),抑制剂(ATP、柠檬酸)丙酮酸激酶:受ATP/AMP的抑制产能:2ATP醛缩酶的底物:F-1,6-P2(1,6-二磷酸果糖)糖代谢中既催化脱氢又催化脱羧的两种酶:异柠檬酸脱氢酶、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶糖的有氧氧化丙酮酸乙酰辅酶A:部位:线粒体内膜丙酮酸脱氢酶系:3酶(丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶)5辅(TPP(VB1)、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+)TCA循环:柠檬酸循环、Kreb

17、s循环调节TCA循环运转最主要的酶:异柠檬酸脱氢酶(限速)、-酮戊二酸脱氢酶系部位:线粒体基质、内膜酶:柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶(限速)、-酮戊二酸脱氢酶系1分子葡萄糖有氧氧化产生ATP数:36(38)=2+6(4)+6+24草酰乙酸来源三途径:苹果酸酶和苹果酸脱氢酶、丙酮酸脱羧酶、磷酸丙酮酸脱羧酶磷酸戊糖途径、磷酸己糖旁路HMS核糖的分解途径是:HMS生物合成中除ATP供能外合成糖还需:UTP合成脂肪还需:GTP生物合成的还原力是NADPH,来源是HMS反应部位总结糖酵解(EMP):胞质TCA:线粒体基质、内膜氧化磷酸化:线粒体内膜糖元代谢合成糖元时,葡萄糖先活化成:UDPG植物合成淀粉时

18、需:ADPG合成蔗糖需:UDPG、6-P-G糖异生第十章 脂代谢三酰甘油代谢分解代谢-氧化:反应部位:线粒体基质产物:偶数碳(乙酰CoA)、奇数碳(几个乙酰CoA+1个丙酰CoA)反应过程:二步脱氢(生成1FADH2+1NADH)、产ATP(5个)饱和脂肪酸分解酮体生成部位:肝内成分:乙酰乙酸、-羟丁酸、丙酮利用部位:肝外,脑、肌不饱和脂肪酸氧化分解:两特殊酶:顺-反烯酯酰CoA异构酶、顺-反-羟酯酰CoA异构酶1分子软脂酸(16C)彻底氧化分解成CO2、H2O生成ATP数:脂肪酸合成脂肪酸合成代谢还原力是NADPH,来源是HMS催化胞液脂肪酸合成的限速反应由乙酰CoA羧化酶催化酰基载体为ACP,-氧化中酰基载体是乙酰CoA磷脂代谢合成磷脂所需能量来自:CTP胆固醇代谢在体内可直接合成胆固醇的化合物是:脂酰CoA第十一章 氨基酸与蛋白质代谢几种氨基酸生酮氨基酸:Leu、Lys生糖氨基酸:

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