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专题2:细胞工程22 动物细胞工程【基础知识】动物细胞工程常用的技术手段有 、 、 、 等,其中 技术是其他动物工程的基础。 一. 动物细胞培养()1.概念:从动物机体中取出相关的 ,将它分散成 ,然后放在适宜的 中,让这些细胞 。2.动物细胞培养的流程:取动物组织块剪碎用 或 处理分散成 制成 转入培养瓶中进行 培养贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养液中进行 培养。3.细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就贴附在 ,称为细胞贴壁。细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面 时,细胞就会停止 ,这种现象称为细胞的接触抑制。细胞株 (10代50代) 细胞系 (50代以后。特点: )4.动物细胞培养需要满足以下条件: 环境:培养液应进行 处理。通常还要在培养液中添加一定量的 ,以防培养过程中的污染。此外,应定期更换培养液,防止 对细胞自身造成危害。 :合成培养基成分: 等。通常需加入 等天然成分。 :适宜温度:哺乳动物多是 为宜;ph: :95% 5% 。o2是 所必需,co2的主要作用是 。5.动物细胞培养技术的应用:例如:6.植物组织培养与动物细胞培养的比较:项目原理培养基结果培养目的植物组织培养动物细胞培养二.动物体细胞核移植技术和克隆动物()1. 概念:将动物的一个细胞的 ,移入一个已经去掉细胞核的 中,使其 并发育成一个新的 ,这个新的胚胎最终发育为动物个体。2.原理: 3.哺乳动物核移植可以分为 核移植(比较容易)和 核移植(比较难)。4.选用去核卵(母)细胞的原因: 5体细胞核移植的大致过程是:供体高产奶牛的体细胞 克隆高产奶牛 期的卵母细胞 的卵母细胞 细胞 早期胚胎 受体母牛 技术 方法 技术6.体细胞核移植技术的应用:7.体细胞核移植技术存在的问题:克隆动物存在着 问题、表现出 缺陷等。三.动物细胞融合()1.动物细胞融合也称 ,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来 细胞遗传信息的单核细胞,称为 。2.动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似,常用的诱导因素有 等。3.动物细胞融合技术为制造 开辟了新途径。4.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:项目原理融合前的处理诱导融合方法用途植物体细胞杂交 动物细胞融合 四.单克隆抗体()1.抗体:一个b淋巴细胞只分泌一种 。从血清中分离出的抗体 。2.单克隆抗体的制备过程:3.杂交瘤细胞的特点:既能大量 ,又能产生 。4.单克隆抗体的优点: 。5.单克隆抗体的作用:作为 :准确识别各种抗原物质的细微差异,并跟 发生特异性结合,具有准确、高效、简易、快速的优点。用于 :主要用于治疗 治疗,可制成“ ”,也有少量用于治疗其它疾病。【重点知识】1.动物细胞培养的过程及条件2.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程3.单克隆抗体的制备和应用【典型例题】1(2009江苏)动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图县一个新牛小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。(1)肝脏切成小薄片,这有利于肝脏细胞 。(2)气室中充入5c0:气体的主要作用是 。(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长,但要注意选择抗生素的 ,以保证抗生素对肝脏无害。(4)有机物x有毒性,可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具,探究肝脏小块对有机物x是否具有解毒作用。 材料用具:肝脏小块,外周血淋巴细胞,淋巴细胞培养液,植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂);显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,滴管;吉姆萨染液(使染色体着色),有机物x溶液等。实验过程: 在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞,取4等份,备用。 利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置,按下表步骤操作(“”表示已完成的步骤)。 甲 乙 丙 丁步骤一:加人肝脏培养液 步骤二:加入有机物x溶液 ,步骤三:放置肝脏小块 上表中还需进行的操作是 。 培养一段时间后,取4组装置中的等量培养液,分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察 ,并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常,而甲组的淋巴细胞正常,则说明 。2(2008年宁夏)回答下列有关动物细胞培养的问题:在动物细胞培养过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的 。此时,瓶壁上形成的细胞层数是 。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是 。随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现 现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成细胞,该种细胞的黏着性,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量。现用某种大分子染料,对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不染色,原因是 。检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到期的细胞用显微镜进行观察。在细胞培养过程中,通常在 条件下保存细胞。因为在这种条件下,细胞中 的活性降低,细胞 的速率降低。给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当作 进行攻击。3(2007上海)右图表示用生物工程制备人抗a抗体的过程。请回答下列问题(1)人的红细胞膜表面有被称为凝集原的特异_ _:从免疫学角度看,这种凝集原是_ _。(2)图中细胞中1是小鼠体内注入人a型血红细胞后而获得的_细胞,这种细胞具有产生_的特点,但难以在体外培养。甲培养皿中培养的细胞2,是从患骨髓瘤的小鼠体内获取的骨髓瘤细胞,这种细胞在体外培养时能_,但不会产生抗体。(3)为了能充分发挥上述两种细
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