课件：微生物检测培训培养基.pptx

Summary from Global Micro Training Material - 培养基和配制,-,学习目的,Identify the different categories of media used in the lab / 识别用于不同实验的培养基 Identify the specific media used in each category / 识别不同试验中的各种培养基 Explain how typical media are made / 学习培养基的准备方法 Explain how to store media / 学习培养基的储存,-,主要内容,介绍 实验室使用的培养基 一般培养基 选择培养基 培养基的配制 培养基的储存,-,微生物实验的重要性,充分理解哪些微生物会影响我们的产品只是我们保护我们产品和品牌的第一步; 同时, 我们必须通过对我们的原料, 半成品和最终产品的微生物检测来确保符合公司有关质量和安全的要求. 进行微生物实验最重要的手段之一就是是微生物生长的营养培养基. 我们会一一介绍 可口可乐公司微生物实验室使用的各种不同种类的培养基, 它们的配制和储存, 它们如何使用以识别不同的微生物等等,第一章,-,培养基,我们可能会肉眼看见或者直接闻到一些腐败的现象, 我们也可以在显微镜下识别一些微生物, 然而, 为了了解哪些微生物需要更复杂一些的实验, 我们还需要更大的样本量. 一般来说, 我们通过营养培养基让微生物在实验室 生长. 简单来说, 培养基就是一种物质, 液态的或者固态的, 包含一系列微生物生长的营养物质. 由于微生物种类繁多, 我们有很多不同种类的培养基, 每一种都有不同的混合的营养物质或者化学品. 培养基让微生物学家能够判断特定微生物种群是否存在或者数量多少. 营养培养基分为三个主要类型: 一般培养基, 选择培养基, 差异培养基,第二章,-,培养基的分类,第二章,-,普通培养基,普通培养基可以用于增菌和计数的检测. 增菌是定性的, 用于判断微生物的存在与否; 而计数则是定量的, 可以得到存在微生物的数量. M-TGE and PCA: 最常用的普通培养基, 可通过薄膜过滤, 倾倒平板, 或者扩散平板用于固态的琼脂中以计数. pH值在7.0能使非嗜酸微生物很好的生长,第三章,-,TTC指示剂,M-TGE和PCA都可以用于获得瓶装水中的异养菌和糖样品中的总菌. 需要的话, 可以使用TTC指示剂, 用来改变菌落颜色成红色.,第三章,-,选择性培养基,选择性培养基能够培养特定的微生物, 举例来说, 当需要得知酵母菌数量时候, 可以选择相应的培养基 选择性培养基包含了营养成分和其他某种”允许”生长物质, 可能包含一些抑制剂来防止可能影响实验的微生物的生长. 选择性培养基可以用来识别酵母菌和霉菌, 嗜酸细菌, 和其他细菌, 比如大肠菌群.,第四章,-,霉菌和酵母菌,M-Green: 含有丰富的蛋白胨非常有利于微生物生长 pH 4.6抑制了大部分细菌的生长 溴甲酚绿(pH=3.8时呈黄色，pH=5.4时呈蓝绿色，pH=4.5时开始有颜色的明显变化)是指示剂, 大部分菌落被里面的色素变成率绿色, 酸性物质扩散到培养基把它变成黄色.,第四章,-,霉菌和酵母菌培养基,第四章,-,耐热霉菌 / 耐热细菌,第四章,-,大肠菌群,Endo, Tergitol-7, Chormocult, Colilert 和Readycult 都可以用来定性或定量地检测大肠菌群. 大肠菌群的存在表示了糟糕的卫生情况, 可能是由不充分的消毒或者没有很好执行GMP的要求. 这些细菌有三个主要来源: 水 植物性物质 动物 动物污染产生粪大肠, 能出现在水体或者植物中 如果数量较大, 种类又特别, 大肠菌群的存在可能会引起公共卫生事件,第四章,-,大肠菌群的培养基 - Endo,Endo培养基使用乳糖作为碳源, 硫酸品红还区别不同的微生物,亚硫酸钠和品红来抑制其他微生物的生长. M-Endo则含有十二烷基硫酸盐和脱氧胆盐作为抑制剂. 当使用Endo培养基时, 菌落显示带有绿色金属光泽的红色. 如果结果呈阳性, 则需要进一步确定其存在和种类 在一些情况下, 在Endo培养基上会有假阳性或者假阴性出现. 比如:阴沟肠杆菌 (Enterobacter cloacae) 在培养基上不会出现特征的金属光泽 (假阴性); 而食酸丛毛单胞菌(Comamonas acidovorans)会发出金属光泽 (假阳性),第四章,-,大肠菌群的培养基 Tergitol-7 / Chromocult,第四章,-,大肠菌群的培养基,第四章,-,肠球菌,肠球菌也是我们关心的一类微生物, 常用来定性或者定量的培养基有: S&B (Slanetz and Bartley), BEA (Bile-Esculin-Azide), 和Enterolert (R),第四章,-,乳酸杆菌,-,第四章,其他培养基,第四章,-,培养基的配制,培养基可以是实验室配制的也可以是市售的(放在培养皿中), 后者使用方便但是价格比较高 必须从有着良好声誉的生产商采购并且根据供应商要求来储存, 使用和安全注意事项 混合干粉培养基: 使用去离子水或者蒸馏水配制并调节pH值, 或者加入所需要的抑制剂.严格按照供应商的说明来配制培养基, 混合, 灭菌(时间温度)等, 并编好批号以方便使用 严格按照供应商注明的规程使用, 有些物质有刺激性, 需要防尘口罩和手套来防止吸入粉末以及皮肤接触 有效期: 使用前, 必须保证日期没有超过瓶上注明的有效日期; 一旦开瓶使用, 建议6个月内用完 质量管理: 配置完成后, 培养基批号, 配制日期必须要记录, 并且应与样品的分析相对应. 另外, 其他指标, 比如pH, 颜色, 数量(体积)也应该被记录在案,第五章,-,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考，实际情况实际分析,感谢您的观看和下载,The user can demonstrate on a projector or computer, or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field,培养基的储存,培养基需要妥善保存以避免污染和失效, 建议遵照供应商的说明. 吸湿的和对于光和热敏感的培养基需要保持凉爽并避免接触水分和光线 采购的培养基需要确认过期日期并记录实验室收货日期, 以杜绝过期培养基. 按照批号顺序使用并记录开瓶日期 旧瓶用完再开新瓶 储存于密闭容器, 保持温度在300C以下, 液体培养基, 通常需要冷藏 储存前, 液体培养基需要冷却并