肿瘤微环境与非霍奇金淋巴瘤的发病与耐药

肿瘤微环境与非霍奇金淋巴瘤的发病与耐药肿瘤微环境与非霍奇金淋巴瘤的发病与耐药 2014 年 06 月 27 日 09:56 来源：中华血液学杂志 非霍奇金淋巴瘤（NHL）是一组生物学行为各异、治疗反应不同的恶性淋巴细胞增殖 性疾病，主要分为 B 细胞和 T/NK 细胞淋巴瘤，其发病率呈逐年上升的趋势。NHL 的治疗包 括化疗、放疗和靶向治疗。 除肿瘤细胞本身以外，肿瘤微环境对于 NHL 的发病与耐药具有重要意义。因此，人们 越来越多地关注肿瘤微环境与淋巴瘤疾病进展的关系以及针对肿瘤微环境的靶向药物的研 发。我们对淋巴瘤微环境与 NHL 发病及耐药的相关机制进行综述。 肿瘤微环境的组成主要包括单核/巨噬细胞、T 细胞、基质细胞、间充质干细胞 （MSC）、树突细胞等。淋巴瘤细胞能与上述细胞及其产生的趋化因子和黏附分子相互作用， 影响肿瘤的生长、增殖、迁移及归巢。 一、单核一、单核/ /巨噬细胞巨噬细胞 巨噬细胞的功能多元化，包括炎症反应、免疫应答、组织重构、形态发生等。经典 M1 型是由 IL-12 和 TNF- 介导的炎症反应，M2 型则是 IL-4、IL-3 和 IL-10 介导的组织重 构，促进肿瘤生长、增殖、扩散。 淋巴瘤相关巨噬细胞（lymphomaassociatedmacrophage，LAM）属于 M2 型，可释放调 节肿瘤生长、血管生成、侵袭和（或）转移相关的生长因子、细胞因子、趋化因子等。 B 细胞淋巴瘤中的巨噬细胞可分泌产生基质金属蛋白酶 MMP-9，促进 CD25（IL-2R 受体）阳性 T 细胞上的 sIL-2R 从细胞表面分离，导致血清 sIL-2R 升高，与淋巴瘤患者的 不良预后有关。 最近的研究发现，LAM 是滤泡性淋巴瘤（FL）的独立预后因素之一。在 FL 中 LAM 过 表达 IL-4，继而激活 STAT6 途径，保护肿瘤细胞免于自发性的 Fas 介导的细胞死亡。 FL 巨噬细胞还能释放免疫抑制分子 IL4I1，抑制 T 细胞的增殖与应答，引起局部免 疫逃逸。同时 LAM 分泌 IFN-，通过上调 STAT1 表达增加巨噬细胞的迁移。 套细胞淋巴瘤（MCL）中亦常伴大量巨噬细胞，高水平巨噬细胞的患者中肿瘤细胞有 丝分裂和原始淋巴样细胞比例更多。LAM 能表达 TNF 家族成员 B 细胞活化因子（BAFF）和 增殖诱导配体（APRIL），通过与相应的受体（BAFF-R、BCMA、TACI）结合给 MCL 细胞提 供了生存信号。 来那度胺能抑制 LAM，下调血管内皮生长因子 C（VEGF-C）的表达，抑制功能性肿瘤 淋巴血管生成。这一免疫调节药物已在复发/难治性 MCL 中显示了良好的治疗反应。 二、二、T T 细胞细胞 CD4 阳性 CD25 高表达 FOXP3 阳性的调节性 T 细胞（Treg）可抑制肿瘤微环境中抗肿 瘤免疫的应答，因此与淋巴瘤不良预后有关。由于淋巴瘤常伴有 EBV 感染，通过消耗 Treg 或阻断其抑制性的调控分子来调节 Treg 的功能可以作为 EBV 阳性淋巴瘤新的治疗策略。 在 FL 中滤泡内辅助性 T 细胞（TFH）是在 BCL6 调控下的辅助性 T 细胞。FL 的 TFH 过表达 IL-4、IL-2、IFN-。IL-4 与 STAT6、ERK 依赖的 FL 中 B 细胞激活有关。 IL-2 则可激活 JAK、STAT5、PI3K 等信号通路，与肿瘤生长、扩散有关。同时，IFN- 可诱导基质细胞表达色氨酸分解代谢酶 IDO，抑制 T 细胞增殖与应答。因此，TFH 在产 生促进免疫逃逸、肿瘤生存生长的免疫抑制的肿瘤微环境中起着重要作用。 在 MCL 中 CD40 的表达及其对 CD40 配体（CD154）阳性 T 细胞的相互作用也可促进 肿瘤细胞的生存和转移。来那度胺不仅作用于 LAM，还能刺激细胞毒性 T 细胞和 NK 细胞的 活性，促进两者的增殖，增加 Fas、CD80、CD86、CD83 的表达，促进抗肿瘤 B 细胞的效应。 临床试验证实，来那度胺单药或联合利妥昔单抗治疗复发/难治性弥漫大 B 细胞淋巴 瘤（DLBCL）已取得良好的疗效。 此外，FL 的 TFH 表达 PD-1，运用抗 PD-1 和 PD-L1 拮抗剂单抗可以阻断肿瘤抑制性 的 PD-1 信号途径，发挥 PD-L1/PD-1 介导的抑制 TFH 增殖的功能，从而起到抗淋巴瘤的作 用。 三、基质细胞三、基质细胞 基质细胞主要包括成纤维细胞、免疫细胞、周细胞和炎性细胞等。DLBCL 中可检测到 两种基质细胞相关信号通路的异常，一种与患者较好的预后有关，称为 stromal-1 信号通 路；另一种 stromal-2 信号通路提示不良预后，由 VEGF 等一系列编码内皮细胞及血管生 成的关键调控因子组成。 VEGF 高表达能促进肿瘤血管形成，导致肿瘤微血管密度增加，与 DLBCL 进展及恶性 程度成正比28。一些具有抗 VEGF 活性和血小板衍生生长因子受体（PDGFR）效应的药 物可能成为 stromal-2 信号通路的治疗靶点。 在 FL 中网状成纤维细胞（fibroblastic reticular cell，FRC）可特异性释放 CCL2 趋化因子，募集 LAM，发挥 LAM 促肿瘤增殖及转移的作用。 在基质细胞产生的旁分泌分子中，Hedgehog（Hh）配体、BAFF、IL-15、肝细胞生长 因子（HGF）和黏附分子 CD106，都可在正常和恶性的生发中心 B 细胞上促进抗肿瘤细胞凋 亡的效应。 旁分泌的 Hh 信号传导途径可通过上调药物转运蛋白 ATP 结合盒（ABC）G2 促进基质介 导的化疗耐药。VLA-4 阳性 FL 细胞黏附在 CD106 阳性基质细胞上能使肿瘤细胞逃逸利妥 昔单抗诱导的凋亡作用。 此外，MCL 细胞与基质细胞黏附，能触发一种 c-Myc/MiR-548m 的前馈环，使得 c- Myc 持续激活和 MiR-548m 下调，进而上调 HDAC6，导致基质介导的肿瘤细胞生长和淋巴瘤 进展。 已有的体内、体外实验均表明，HDAC6 选择性抑制剂单药或联合使用 c-Myc 抑制剂可 促进肿瘤细胞死亡、消除细胞黏附介导的耐药、减少克隆生成，从而抑制肿瘤生长36， 因而 HDAC6、c-Myc 将成为淋巴瘤研发新药的重要靶点。 四、四、MSCMSC MSC 是一类存在于多种组织、具有多向分化潜力的非造血干细胞的成体干细胞，具有 独特的细胞因子分泌功能，维持着骨髓的微环境。 MSC 通过在 MCL 细胞高表达的 G 蛋白连接的趋化因子受体（CXCR）4 和 5 吸引肿瘤细 胞。VLA-4 整合体（CD49d）与 CXCR 通过绑定各自的基质配体血管细胞黏附分子 1（VCAM-1）和纤维连接蛋白（FN）联合作用，这种肿瘤细胞与辅助细胞间的“对话 （cross talk）”导致了肿瘤生存及耐药途径的激活。 FL 的 MSC 则高表达 CCL-2 及其配体 CCR2，介导单核细胞募集至肿瘤部位，触发其分 化成为 LAM，促进淋巴瘤生长。 五、树突细胞五、树突细胞 大部分 DLBCL 包含 CD1a 阳性的未成熟树突细胞，后者可募集肿瘤中 CD83 阳性的成 熟树突细胞，有利于疾病预后，提示在 DLBCL 中促进肿瘤内树突细胞成熟和分化可能成为 DLBCL 治疗的靶点。 还有研究显示，对化疗反应不佳的 DLBCL 患者采用抗原处理过的树突细胞进行接种， 可能是一种理想的免疫学治疗方法。 在 FL 中，滤泡树突细胞（follicular dendritic cell，FDC）可通过两种机制阻滞 生发中心 B 细胞的凋亡：其中一种消除生发中心 B 细胞核内组织蛋白酶依赖的核酸内切酶 的活性； 另一种是通过维持生发中心 B 细胞内高水平的 Fas 相关死亡域（FADD）样转化酶 （FLICE）抑制蛋白（cFLIP），防止 FDC 黏附的生发中心 B 细胞中凋亡酶 caspase-8 和 caspase-3 的活化。FDC 还可上调 MDR1，一种 ATP 结合盒转运蛋白，触发 FL 细胞多药耐 药。 六、六、CXCRCXCR、黏附分子、黏附分子 淋巴细胞迁移和归巢需要 CXCR 与黏附分子，包括整联蛋白、CD44、L-型选择素等 45。CXCR5 是 CXCL13 趋化因子的受体，表达于 CD4 阳性和 CD8 阳性的 T 细胞，与后者 结合后参与引导 T 细胞的迁移以及 B 细胞进入次级淋巴器官的 B 细胞区。 一项队列研究发现，血清中升高的 CXCL13 与 B 细胞性 NHL 的发病危险度增加密切相 关。在胃黏膜组织相关性淋巴组织边缘区淋巴瘤（MALT）中，肿瘤细胞通过 CXCR7 信号通 路介导向胃黏膜层归巢，结内 DLBCL 和其他边缘区 B 细胞淋巴瘤细胞通过 CXCR4 向骨髓归 巢，导致边缘区淋巴瘤疾病进展及转化至 DLBCL. DLBCL 淋巴瘤细胞可分泌 BCL2 及促炎细胞因子，继而激活 NF-B，促进 CCR7 的异常 表达，最终导致 DLBCL 向中枢神经系统浸润。 在 MCL 中 CXCR5 高表达可促进恶性 B 淋巴细胞的迁移，导致淋巴瘤的播散，VLA4 也 呈中-高表达，能与 VCAM-1 结合，介导淋巴细胞及其他造血细胞与表皮细胞、基质细胞相 黏附，导致细胞黏附介导的耐药；LPAM-1 高表达，与地址素（也称为 MAdCAM-1）结合， 通常与胃肠道受累有关。 在靶向治疗方面，黏附分子作用下，淋巴瘤细胞黏附于基质细胞，可免于利妥昔单抗 诱导的细胞凋亡。以黏附分子 VLA-4 为靶向的药物那他珠单抗（Natalizumab），能显著 减少 B 细胞黏附于 FN，从而一定程度上克服细胞黏附介导的对利妥昔单抗及细胞毒性药物 的耐药。 肿瘤细胞表面的 CXCR4 与基质中的 CXCL12 相互作用可激活 CXCR4，触发肿瘤细胞增 殖和促生存信号通路，导致肿瘤生存和耐药。 CXCR4 拮抗剂普乐沙福（Plerixafor）可通过干扰 CXCL12 传递的促肿瘤生长信号（如 AKT、ERK、STAT3、PI3K 等）、破坏肿瘤与基质相互作用、动员能诱导抗体依赖细胞介导 的细胞毒性作用的中性粒细胞，影响肿瘤生长，并使淋巴瘤细胞对抗体（如利妥昔单抗） 介导的细胞凋亡更敏感，达到加强抗肿瘤单抗药物的治疗效果。 以 CXCR4 为靶向的细胞穿透性肽拮抗剂可特异性地针对 CXCR4 中 i1