公共卫生突发事件样品采集与处理

公共卫生突发事件样品

采集与处理

传染病的分类甲类传染病是指：鼠疫、霍乱。乙类传染病是指：病毒性肝炎、细菌性和阿米巴性痢疾、伤寒和副伤寒、艾滋病、淋病、梅毒、脊髓灰质炎、麻疹、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、猩红热、流行性出血热、狂犬病、钩端螺旋体病、布鲁氏菌病、炭疽、流行性和地方性斑疹伤寒、流行性乙型脑炎、黑热病、疟疾、登革热。丙类传染病是指：肺结核、血吸虫病、丝虫病、包虫病、麻风病、流行性感冒、流行性腮腺炎、风疹、新生儿破伤风、急性出血性结膜炎、除霍乱、痢疾、伤寒和副伤寒以外的感染性腹泻病。

一、鼠疫取材〔一〕疑似病人的取材疑似鼠疫病人应在服用抗茵药物前，依其病症和体征，按以下规定部位采取检材。各型疑似鼠疫患者，除采取相应部位材料外，均应采取静脉血3~5mL，供栓菌和血清学诊断用。1、疑似腺鼠疫病人取材选取肿大之淋巴结，用碘酒、酒精局部消毒，以左手姆指、食指固定，用灭菌注射器〔12~16号针头〕刺入淋巴结，抽取组织液适量，保存于灭菌试管内或直接接种于血琼脂平板。淋巴结肿大不明显者，可先向淋巴结注射0.3~0.5mL灭菌生理盐水，稍停后再行抽取。感染后期可在肿大的淋巴结周围穿刺抽取组织液。2、疑似肺鼠疫病人取材令病人对血琼脂平板咳嗽，或将带血痰液标本收集于灭菌平皿或广口瓶内备检。用灭菌棉拭子涂擦咽局部泌物，将拭子保存于灭菌试管或灭菌生理盐水管内备检。3、疑似败血型鼠疫应采取静脉血液1mL以上。4、疑似眼鼠疫应用棉拭子或无菌毛细吸管，采取眼的分泌物。5、疑似肠鼠疫应取病人粪便备检。6、疑似皮肤型鼠疫取材水泡、脓泡期，可将脓泡外表用酒精消毒，以灭菌注射器由泡的侧面刺入泡内，抽取内容物备检。溃疡、结痂期以灭菌镊子持灭菌棉球涂擦溃汤面和痂皮下的创面，将棉球保存于灭菌试管或灭菌盐水内备检。凡所取材料均应保存于灭菌器皿内；组织块可保存于灭菌生理盐水中，或用5~10mLBroke氏液保存；亦可应用CaryBleir培养基保存运送材料。容器用石蜡密封。1、检材应包装严密，保存场所适宜，保存温度不高于4℃2、准确详细填写送检单。3、指派二名人员〔其中一名专业人员〕，乘快速交通工具送检材。直接送达负责该地区检验工作的专业实验室。4、接交材料时首先检查包装，绝对不能有破损、污染，如有破损应立即消毒并报告有关单位处理。材料接交按清单点清种类、数量，并准确记录签字。〔二〕动物材料的采集昆虫材料包括：蚤类、蜱类、螨类、虱子等，以蚤类为重点。蚤的采集：

动物体蚤的采集：收集的体蚤及其他昆虫，拣入装有0.5×10-5龙胆紫、2%盐水的小瓶内，注明寄主、采集地点、采集日期。洞道蚤的采集：用顶端固定白色法兰绒或毛巾的探蚤棒收集，巢穴蚤的采集：主要靠挖掘穴内的窝巢及表层泥土而获得。必须一巢装一袋，然后放入大白搪瓷盆内检蚤，收集的蚤分装并登记。地面游离蚤的采集：常用粘蚤纸收集，将粘蚤纸按要求放在房屋地面的一定位置，昏置晨查，搜集蚤纸上的蚤类，分装并登记。将以上收集的蚤类进行分类鉴定并进行细菌学检验。昆虫材料的采集〔三〕鼠疫细菌检验根本要求与处理动物接种二、猩红热三、钩端螺旋体病1、钩端螺旋体直接镜检和别离病人血液的直接镜检取早期病人血一滴，加蒸馏水一滴，使血细胞溶解，在暗视野显微镜下检查有否活动的钩端螺旋体。取早期病人静脉血1~2mL于无菌试管中待凝固。离心沉淀，吸取血清与血细胞交界处略显白色的悬液。涂片后暗视野显微镜检查有否活动的钩端螺旋体。差速离心暗视野检查法：采集早期病人静脉血1mL，加于含2mL枸橼酸钠盐水管中，1000r/min离心10min，吸上层血浆置另一清洁管中，3000~3500r/min离心30~60min。弃上清，取沉淀物一滴于玻片上，暗视野显微镜检查有否活动的钩端螺旋体

2、培养别离病原体四、白喉白喉是由白喉杆菌引起的急性呼吸道传染病。其感染特征为咽、喉、鼻部等处粘膜充血，肿胀并有灰白色假膜形成，以及细菌外毒素引起的全身中毒病症，严重者常合并心肌炎和末梢神经麻痹。由于白喉菌苗〔百白破三联制剂〕的广泛应用，典型白喉逐渐减少，不典型白喉或轻型白喉日渐增多，尤其成人白喉的发病应引起关注。实验室诊断白喉棒状杆菌别离培养阳性并证明能产生外毒素，咽拭子直接涂片镜栓可见革兰氏阳性棒状杆菌，并有异染颗粒。病人双份血清特异性抗体四倍以上增长。以无菌棉拭子或无菌拭子吸附新鲜配制的亚碲酸钾、甘油盐水保存液从疑似患者咽喉假膜边缘蘸取标本或同时采取鼻咽拭子，放入灭菌试管内同时送检。带菌者或疑似病人由于未见到明显的假膜，故应采集鼻咽部或扁桃体粘膜上的分泌物送检。五、伤寒、副伤寒1、标本收集按不同病期采集不同种类的标本。血标本宜在病程的第1~2周采集，但只要发热未退，两周以后仍可获得阳性结果，采血量不少于5~10mL，已用氯霉素者取血凝块作培养。骨髓培养宜在病程的第1~2周送检粪便标本在病程的第3~4周送检。尿标本宜在病程的第3~4周送检，阳性率较低，采集时应防止粪便污染。玫瑰疹的刮取物或活检切片。2、培养血液和骨髓穿刺液先进行增菌培养，粪、尿〔沉渣〕可直接接种于鉴别培养基，经37℃24h培养后挑选可疑菌落，进一步作生化反响和血清学鉴定。伤寒的经典血清学诊断方法是肥达氏反响〔试管法〕，目前已采用微量疑集试验。六、细菌性痢疾细菌性痢疾〔以下简称菌痢〕是由志贺菌〔又称痢疾杆菌〕引起的急性肠道传染病，是常见多发病，其发病率在我国法定报告的甲、乙类传染病中居首位，而且往往引起爆发或流行。急性非典型菌痢病症轻，可仅有腹泻、稀便急性普通型〔典型〕菌痢急性起病、腹泻〔除外其他原因的腹泻〕、腹痛、里急后重、可伴发热、脓血便或粘液便、左下腹部压痛。急性中毒型菌痢发病急、高热、呈严重毒血症病症，小儿起病时可无明显腹痛腹泻状，常需经灌肠或肛试做粪检，才发现是菌痢。根据主要临床表现有以下类型：休克型〔周围循环衰竭型〕：有感染性休克症，如面色苍白、四肢厥冷、脉细速、血压下降、皮肤发花、发绀等。脑型〔呼吸衰竭型〕：有脑水肿表现，如烦燥不安、惊厥、嗜睡或昏迷、瞳孔改变，甚至出现脑疝、呼吸衰竭。混合型：同时出现休克型、脑型的症候，是最凶险的一型。标本的收集患者粪便标本的收集可采用便盒留便、肛拭或采便管采便便盒留便：留取粪便A时应采集新鲜粪便的脓血局部、粘液局部、水样便或稀便。便量1~5g。集体腹泻或食源性爆发患者粪便采集的数额，应根据患者人数的多少，决定采取标本的数量。当疑心患者为菌血症时，应以无菌操作，从静脉血管采取10~15mL血液，放入加有EDTA抗凝剂瓶中送检。所采取的粪便标本应尽快送检，不得越过2h送到化验室，否那么标本应放入Cary-Blair运送培养基中，运送时间超过2h者，应冰浴条件下送检。七、新生儿破伤风新生儿破伤风是破伤风杆菌由脐部，偶可由新生儿外伤处侵入而引起的急性感染性疾病。新生儿破伤风是发现中国家的严重卫生问题。

标本采取于脐部未进行消毒处理和注射破伤风抗霉素之前，用无菌棉棒于脐部化脓部位深处取脓汁及坏死组织，至少应同时取两份标本，一份用做涂片镜检，另一份做动物试验。流行性脑脊髓膜炎〔简称流脑〕是由脑膜炎奈瑟氏菌〔Neisseriameningitidis,Nm〕通过呼吸道传播所引起的化脓性脑膜炎，常在冬春季节引起发病与流行，患者以儿童为多见，流行时成年人发病亦增多。标本的采集CSF：无菌操作，吸出CSF2mL，立即放到无菌试管内离心〔2000~3000r/min，30min〕，用灭菌过的毛细管吸取沉淀物直接接种到10%羊血巧克力色琼脂上〔CSF上清液局部供检测Nm特异抗原，亦可将其置于-20℃待测〕，5%二氧化碳环境37℃培养24~72h，每日检查细菌生长的情况，及时别离纯培养物供鉴定。血液：采取病人急性期静脉血液6mL，无菌操作往盛有30mL增菌用的葡萄糖肉汤三角瓶内注入4mL血液〔余下的2mL血液同上离心后吸出血清，供检测Nm特异抗原和抗体，亦可将其置于-20℃待测〕，同上述条件培养24-72h，每日进行别离培养。八、感染性腹泻肠产毒性大肠杆菌〔ETEC〕标本：霍乱样水样便肠侵袭性大肠杆菌〔EIEC〕标本：细菌性痢疾样便

肠出血性大肠杆菌〔EHEC〕标本：早期为水样便，后为血便。九、炭疽〔Anthrax〕炭疽〔Anthrax〕是由炭疽芽孢杆菌〔Bacillusanthracis〕引起的一种人与动物共患传染病，主要存在于食草动物和牲畜群落之中，并能造成环境的广泛污染。由于炭疽芽孢具有对外界环境极强的抵抗力，造成这种污染常持续存在。人类主要通过接触患病的牲畜、进食感染本病的牲畜肉类、吸入含有该菌的气溶胶或尘埃，以及接触污染的毛皮等畜产品而罹患本病。采取标本时必须遵循的两条原那么尽可能在抗生素治疗开始前采取标本除必要时并在具备操作病毒细菌条件的实验室内，不得用解剖的方式获取标本。所需的血液与组织标本，均应以穿刺方式取得。

血液标本所有的疑似人类病例和病畜，都应采取血液样本，标本量至少应满足以下检查的需要。涂片进行显微镜检查接种培养基进行细菌别离培养别离血清检查抗体常规血液检查。粪便与呕吐物标本表现消化道病症的可疑病人收集粪便或呕吐物标本，特别注意选取其中混有血液的局部，置无菌容器中。痰与咳碟标本表现为呼吸道病症的可疑病人应收集其痰液标本，无痰液者，应取供细菌别离培养用的培养基，翻开平皿盖置病人口鼻10cm处；令病人对平皿咳嗽，然后迅速盖上平皿。脑脊液标本表现脑膜刺激病症的病人，腰椎穿刺获取脑脊液，标本量参照A1.2的要求。尸体标本食草动物死于炭疽时，通常会从口、鼻、肛门等腔道开口流出血液，这种血液应是首先采取的标本。如果血液已渗入土壤，那么应收集混有血液的土壤作为标本，没有血液流出，或已不可不可能获取血液标本时，可通过穿刺心脏获得血液或穿刺肝脏等实质性脏器获得组织标本。肉类标本如果疑心罹患炭疽的家畜已被宰杀，或对商品肉类进行常规检查时，可剪取小块肉类标本。如有可能，特别应剪取肝脏、脾脏等富含血液以及含淋巴组织的标本