2025年新世纪版选择性必修3生物上册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年新世纪版选择性必修3生物上册月考试卷813考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四总分得分评卷人得分一、选择题(共7题，共14分)1、为有效防范由各类生物因子、生物技术误用滥用等引起的生物性危害，生物安全已纳入国家安全体系。以下选项中会给我国带来生物安全风险的是（）A.将新冠患者的血浆采集后注射到危重患者体内B.试管婴儿通过基因筛查技术阻断遗传疾病的遗传C.利用生物技术改造的工程菌获得大量的抗生素D.克隆技术可应用到器官移植但不能进行人体克隆2、下列关于家庭中制作果酒、果醋、泡菜过程的叙述，正确的是A.都需要严格的灭菌B.都需要接种相应微生物C.都在无氧条件下进行D.都利用异养微生物发酵3、下列对制作果酒、果醋、腐乳和泡菜的相关叙述错误的是（）A.制作果酒时，发酵液装入发酵瓶后留有约1/3的空间B.制作果醋时，通氧不足或温度过低可能造成发酵失败C.制作腐乳的卤汤时，料酒加的量较多，易造成豆腐腐败变质D.测定泡菜中的亚硝酸盐含量，每次取样后要迅速封口4、下列与土壤中尿素分解菌的分离与计数相关的叙述，正确的是（）A.可以通过设置空白对照组来检验培养基是否受到了杂菌的污染B.对样品中的尿素分解菌进行计数时可采用平板划线法进行接种C.统计尿素分解菌的数目时应该选择菌落数多的培养基进行计数D.尿素分解菌合成的脲酶将尿素分解成氨后会使培养基pH下降5、羊在畜牧生产和生物医学模型方面都具有重要价值，因此与羊相关的基础生物学研究也格外受到关注。科学家通过胚胎工程的方法繁育肉羊。下列相关叙述错误的是（）A.从雌性肉羊卵巢内取出的卵母细胞不可直接进行体外受精B.可用普通雌性羊作为受体进行胚胎移植但需生理状态相同C.可以通过胚胎分割技术，得到更多遗传性状相同的肉羊后代D.在胚胎移植前，需要对体外培养的原肠胚进行质量筛查6、为了示踪衰老细胞在机体中的分布，科研人员综合利用基因工程和细胞工程的技术手段，将绿色荧光蛋白基因gf插入到了小鼠p16基因的下游，使两个基因“融合”。转基因小鼠的衰老细胞中，p16和gfp会特异性表达，从而使其在紫外光下呈绿色。下列分析错误的是（）A.可用PCR技术特异性地快速扩增绿色荧光蛋白基因gfpB.转基因小鼠的p16基因和gfp基因具有各自独立的启动子C.常用显微注射法将改造好的融合基因注入小鼠的受精卵中D.可选择发育到桑葚胚期的转基因小鼠胚胎移植到受体母鼠子宫内7、科学家将含有人溶菌酶基因的表达载体注射到鸡胚细胞中获得转基因鸡，人溶菌酶基因能在鸡的输卵管细胞中特异性表达，最终在鸡蛋中收集人溶菌酶。将含有人溶菌酶基因的表达载体导入鸡胚细胞中常采用的方法是（）A.农杆菌转化法B.显微注射法C.钙离子处理法D.核酸杂交法评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)8、抗菌肽又名多肽抗生素，广泛存在于昆虫以及两栖类动物、哺乳动物体内，具有广谱抗菌活性。其作用原理是在细菌细胞膜上形成跨膜的离子通道，造成细胞内容物泄漏，最终导致细菌死亡。最新研究表明，某些抗菌肽对癌细胞甚至感染了病毒的宿主细胞均具有杀伤作用。下列相关叙述正确的是（）A.从免疫调节的方式分析，抗菌肽参与特异性免疫过程B.抗菌肽改变了细胞膜的通透性，使细胞不能保持正常渗透压而死亡C.利用转基因技术生产抗菌肽时，常选用大肠杆菌作为受体菌D.对抗菌肽的研究可为治疗癌症、新型冠状病毒肺炎等提供新思路9、多种实验材料都可以用于DNA的粗提取与鉴定，用香蕉也可以取得较好的实验效果。下列叙述错误的是（）A.将粗提取的DNA加入到2mol/L的NaCl溶液的目的是为了溶解DNAB.冷却的体积分数为95%的酒精可以溶解某些蛋白质，得到粗提取的DNAC.向剪碎的香蕉果肉组织中加入蒸馏水并研磨，以释放核DNAD.将DNA溶于NaCl溶液后加入现配的二苯胺试剂，沸水浴冷却后会出现蓝色10、为对某样品中噬菌体计数，工作人员将0.1mL稀释倍的噬菌体样品与敏感细菌混合后平铺在平板上培养一段时间，长满细菌的平板因部分细菌被噬菌体裂解而形成圆形透明斑，即噬菌斑（1个噬菌斑为1个pfu），噬菌体效价可用每毫升样品中含有的pfu数表示。下列叙述正确的是（）

A.透明的平板培养一段时间后变为不透明状态，是由细菌大量繁殖造成的B.噬菌体样品应有足够的稀释度，以保证初期一个细菌最多被一个噬菌体吸附C.若平均每个平板的噬菌斑数量为150，则该样品的噬菌体效价为1.5×108pfu/mLD.若有少数活噬菌体末能侵染细菌，噬菌斑计数结果比样品中实际活噬菌体数偏低11、甲图为牛胚胎移植示意图，乙图为胚胎发育某时期示意图，下列叙述错误的是（）

A.甲图中冲卵的目的是获取受精卵B.对供体母牛和受体母牛注射性激素，进行同期发情处理C.性别鉴定时需将图乙②处细胞做染色体分析D.受精卵形成乙的过程中进行卵裂，每个细胞的体积变小12、抗体的结构分为V区（识别并结合抗原的区域）和C区（抗体的支架），鼠源抗体具有外源性，会被人体免疫系统当作抗原而清除。用人抗体的C区替换鼠源抗体的C区，保留鼠单抗的V区，可构建人一鼠嵌合抗体，操作流程如图所示。下列相关说法错误的是（）

A.与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞为能分泌抗体的浆细胞B.用选择性培养基可筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞C.为获得结构正确的嵌合抗体，受体细胞应选用大肠杆菌D.人一鼠嵌合抗体在保留抗体特异性的同时外源性下降13、研究人员用无机盐、琼脂和石油配制的培养基从被石油污染的土壤中筛选出了一种石油降解菌，下列相关表述正确的是（）A.培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利B.这种培养基是一种选择培养基C.利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤D.相对于未被污染的土壤，从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌14、下图表示选用具有同一外源目的基因对某品种奶牛进行遗传特性改造的三种途径；下列有关叙述正确的是（）

A.获得奶牛1通常采用显微注射法导入外源基因B.奶牛2体内不同组织细胞的基因组成一定相同C.成功获得奶牛1、2、3表明三个受体细胞都具有全能性D.奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)15、一般包括______、______等技术16、哺乳动物核移植可以分为______核移植（比较容易）和______核移植（比较难）。17、请回答下列有关生物技术的安全性和伦理问题：

（1）一些持支持态度的科学家认为，由于不同物种间存在__________，同时花粉的传播距离和__________有限；转基因农作物很难与其它植物杂交，因而不大可能对生物多样性造成威胁。

（2）在转基因生物或产品研究过程中，绝大多数科学家都能自觉遵守科学研究道德。例如，把重组DNA的转移限制在遗传上具有___________的生物上；对外源DNA进行认真选择，避免能够表达出对人体有毒性或过敏的___________．

（3）一些持反对态度的科学家认为，由于克隆技术尚不成熟，现在就做克隆人很可能孕育出有严重缺陷的孩子。但是支持克隆人的科学家则认为，一些技术问题可以通过胚胎分级、______和__________等方法得到解决。

（4）对于克隆技术，中国政府的态度是___________．但不反对___________。18、统计的菌落数往往比活菌的实际数目_____________。这是因为______________________。因此，统计结果一般用而不是用活菌数来表示。除了上述的活菌计数法外，______________也是测定微生物数量的常用方法。19、获取目的基因的方法______、______、______评卷人得分四、综合题(共3题，共27分)20、丽轮枝菌（一种丝状真菌）是引起棉花黄萎病的主要病原菌。为观察大丽轮枝菌对棉花根侵染路径，研究人员利用绿色荧光蛋白基因（sGFP）转染大丽轮枝菌，培育出表达绿色荧光蛋白的转基因菌株，主要过程如下（图中a链和b链分别是相应基因转录模板链）。分析回答：

（1）过程①中，PCR扩增sGFP的原理是________，该过程除需要根据________设计特异性引物序列外，为保证sCFP正确插入到质粒中，还需要在引物的5ˊ端添加限制酶识别序列，图中b链的黏性末端碱基序列（5ˊ→3ˊ）为________。

（2）过程①中，除了要添加模板、引物、原料外，还需添加_____酶。若1个sGFP片段连续扩增4次，则会形成_____个两条链等长的sGFP片段，消耗_____个引物1。

（3）过程②需要的工具酶是________。研究中将sGFP插入到构巢曲霉启动子和终止子之间的目的是_________。

（4）将重组质粒导入农杆菌时，需要用_______处理农杆菌；使其转化为感受态细胞。

（5）过程③中需要配制细菌培养基，配制时要在培养基灭菌并冷却到80℃左右后，再加入用潮霉素溶液，潮霉素不能与培养基一同灭菌的原因是_________。

（6）选择过程③筛选培养得到的不同农杆菌菌落，分别提取细菌质粒DNA，并用BamHI和HindIII完全酶切可以得到________种长度不同的DNA片段。

（7）将导入重组质粒的农杆菌加入大丽轮枝菌的孢子细胞悬液中，在适宜条件完成转染后利用滤膜过滤得到孢子细胞，再在真菌培养基上培养获得菌落，最终通过检测_______筛选出绿色荧光蛋白旺盛表达的大丽轮枝菌。21、CRISPR/Cas系统是细菌在进化中形成的一种防御机制。Cas蛋白能截取噬菌体的DNA片段；并将其插入到细菌自身的CRISPR基因中，整合有噬菌体DNA片段的CRISPR基因经转录产生RNA，此RNA与Cas蛋白共同构成CRISPR/Cas复合物，在此RNA引导下，该复合物能定点切割对应的噬菌体DNA片段。科学家通过改造此系统，产生了CRISPR/Cas9基因编辑技术，可以实现对DNA的定点切割，其工作原理如下图所示。2019年上海科研团队通过基因编辑技术切除猕猴受精卵中的生物节律核心基因BMAL1，再利用体细胞克隆技术，获得了5只BMAL1基因敲除的克隆猴。这是国际上首次成功构建出的一批遗传背景一致的生物节律紊乱的猕猴模型。请回答下列问题：

（1）CRISPR/Cas系统中的Cas蛋白合成的场所是_________；该系统需要对特定的DNA序列识别并切割，其功能类似于基因工程工具酶中的_________，作用的化学键为_________。推测该系统在细菌体内的生理意义是____________________。

（2）由于Cas9蛋白没有特异性；用CRISPR/Cas9系统切割BMAL1基因，向导RNA的识别序列应具有的特点是能与____________________通过碱基互补配对结合。

（3）在个体水平鉴定BMAL1基因敲除成功的方法是观察猕猴是否表现为_____________。

（4）该团队利用一只BMAL1缺失的成年猕猴体细胞克隆出5只后代的实验中；涉及的生物技术有____________________(答出两项即可）。

（5）基因编辑后通过体细胞克隆得到的数只BMAL1缺失猕猴(A组)，与仅通过基因编辑多个受精卵得到的数只BMAL1缺失猕猴(B组)比较，________(填“A组”或“B组”)更适合做人类疾病研究模型动物，理由是_______________________。22、特异性重组的Cre/loxP敲除系统是首先利用同源重组将基因组上的靶基因替换为两端带有重组位点loxP的karR基因，然后由重组酶Cre识别loxP位点并发生重组反应，去除基因组上的karR基因，进一步利用质粒的温敏特性将其消除，从而实现靶基因的敲除。下图是研究人员利用Cre/loxP敲除系统敲除谷氨酸棒状杆菌argR基因（精氨酸代谢的调控因子），获得高产精氨酸菌株的过程，其中kanR是卡那霉素抗性基因；cat是氯霉素抗性基因，HindⅢ；BanHⅠ是限制酶。请据图回答下列问题：

(1)①过程的原料是_____，所需的酶是_____。

(2)下列引物1、引物2用于扩增argR基因上游序列，引物3、引物4用于扩增argR基因下游序列，下划线序列是相关限制酶识别序列，则HindⅢ、BamHⅠ的识别序列分别是_____、_____。

引物1：5'-GTCGACGGTATCGAT____AGGACTCAAACTTATGACTTCACAACCA-3'

引物2：5-CGCCCTATAGTGAGTCGTATTGGGATTTAAGTTTTCCGGTGTTGACG-3'

引物3：5'-CTTTAGTGAGGGTTAATTGCGCGTTAATCGCTTGTTAATGCAGGCA-3'

引物4：5'-CGCTCTAGAACTAGT____CAAAGCCTCGTGAGCCTTAATC-3'

(3)②过程（融合PCR）是采用具有互补末端引物，形成具有重叠链的PCR引物，通过PCR引物重叠链的延伸，从而将不同来源的DNA片段连接起来。下列引物5、引物6用于扩增两端含loxP的karR片段，引物5、引物6可分别与_____、_____（引物1；引物2、引物3、引物4）重叠从而实现不同DNA片段的连接。

引物5：5'-CGTCAACACCGGAAAACTTAAATCCCAATACGACTCACTATAGGGCG-3'

引物6：5-TGCCTGCATTAACAAGCGATTAACGCGCAATTAACCCTCACTAAAG-3'

(4)④过程将质粒3导入_____态谷氨酸棒状杆菌，⑤过程在同源重组的作用下谷氨酸棒状杆菌株的argR基因被替换为_____片段。

(5)⑥过程导入质粒4的目的是_____。

(6)由于质粒4的温敏特性，⑦过程先在37℃条件下培养消除质粒4，然后用影印接种（A、B、C三个培养基中接种菌种的位置相同）培养验证其抗性，其结果如下图，则_____是目的基因被敲除的目的菌株。

参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、A【分析】【分析】

1.转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。对待转基因技术的利弊；正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。

2.试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；新冠患者的血浆中可能含有病毒；采集后是不可以直接输入到任何人身体里的，输入到危重患者身体里存在安全隐患，与题意相符，A正确。

B；试管婴儿可以通过基因筛选技术来阻断遗传疾病的遗传；因此经过一定的技术手段可以避免安全风险，与题意不符，B错误；

C；利用生物技术改造的工程菌获得大量的抗生素已经投入生产；一般不会带来生物安全风险，与题意不符，C错误；

D；克隆技术可以克隆器官；但是不可以进行人体克隆，这样可以避免影响伦理道德，与题意不符，D错误。

故选A。

【点睛】2、D【分析】【分析】

【详解】

AB；制作果酒、果醋、泡菜；可以借助于水果、蔬菜表面的微生物，不一定需要接种相应微生物，不需要进行灭菌，AB错误；

C；果酒制作需要先通气后密封；果醋制作需要有氧条件，泡菜发酵需要在无氧条件下进行，C错误；

D；参与果酒制作的酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型；参与果醋制作的醋酸菌的代谢类型是异养需氧型，参与泡菜制作的乳酸菌的代谢类型是异养厌氧型，D正确。

故选D。3、C【分析】【分析】

腐乳制作的步骤：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。在选葡萄时应先冲洗1～2次，再去除枝梗，以防葡萄破损被杂菌污染；醋酸菌好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸。表达式为：C2H5OH→CH3COOH+H2O；当氧气；糖源都充足时；醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。

【详解】

A；制作果酒时；将葡萄汁装入发酵瓶要留1/3空间，以保证含有一定量氧气，目的是让酵母菌进行有氧呼吸，快速繁殖，A正确；

B；醋酸菌为好氧菌；最适温度生长温度为30～35℃，因此制作果醋时，通氧不足或温度过低，B正确；

C；制作腐乳的卤汤时；料酒加的量较少，易造成豆腐腐败变质，加料酒的量多，成熟期延长，C错误；

D；测定泡菜中的亚硝酸盐含量；每次取样后要迅速封口，防止杂菌污染，D正确。

故选C。4、A【分析】【分析】

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中；需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的稀释倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数。

【详解】

A；该实验可设置空白对照组；以检验培养基是否受到杂菌污染，同时也能确定培养基是否符合要求，A正确；

B；对样品中的尿素分解菌进行计数时可采用平稀释涂布平板法进行接种；B错误；

C；统计尿素分解菌的数目时；以菌落数在30--300以上的平板进行计数，求其平均值，C错误；

D；尿素分解菌合成的脲酶可催化尿素分解成氨；从而会使培养基pH升高，据此通常在培养基中加入酚红指示剂来鉴别尿素分解菌，D错误。

故选A。

【点睛】5、D【分析】【分析】

试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精并通过培养发育为早期胚胎后；再经移植后产生后代的技术，可见试管婴儿技术主要包括体外受精；早期胚胎培养和胚胎移植技术。

【详解】

A；从卵巢内取出卵母细胞不可直接进行体外受精；需要培养到MII中期，A正确；

B；胚胎移植需要受体的生理状态满足胚胎的发育；B正确；

C；可以通过胚胎分割技术获得遗传性状相同的多个子代；C正确；

D；早期胚胎培养到桑基胚或囊胚阶段进行移植；D错误。

故选D。6、B【分析】【分析】

基因工程的操作步骤：(1)目的基因的获取；方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤。基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；(3)将目的基因导入受体细胞；根据受体细胞不同；导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；(4)目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；绿色荧光蛋白基因gfp为DNA片段；可用PCR技术特异性地快速扩增，A正确；

B；将绿色荧光蛋白基因gfp插入到了小鼠p16基因的下游；使两个基因“融合”，因此p16基因和gfp基因共用了一个启动子，它们之间关联表达，B错误；

C；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；C正确；

D；胚胎移植时；应选择处于桑葚胚或囊胚期的胚胎，D正确。

故选B。7、B【分析】【分析】

显微注射法是利用管尖极细（0.1至0.5μm）的玻璃微量注射针；将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中，然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组；缺失、复制或易位等现象而使外源基因嵌入宿主的染色体内。

【详解】

A；农杆菌转化法常用于转入植物细胞；A错误；

B；显微注射法常用于转入动物细胞；B正确；

C；钙离子处理法常用于转入微生物细胞；C错误；

D；核酸杂交法是检测目的基因的方法；不是导入细胞的方法，D错误。

故选B。二、多选题(共7题，共14分)8、B:D【分析】【分析】

1；病毒同所有生物一样；具有繁殖、遗传、变异、进化的特点，病毒是一种体积非常微小，结构极其简单的生物，仅由蛋白质外壳和内部的遗传物质组成，没有细胞结构。不能独立生活，只能寄生在活细胞内，并在寄主细胞内进行繁殖。一旦离开了活细胞，病毒就无法生存，就会变成结晶体。

2；真菌较细菌作为受体细胞的优势是真菌为真核微生物；含有内质网和高尔基体可对蛋白进行加工和修饰。

【详解】

A；通过题干信息可知；抗菌肽具有广谱抗菌活性，抗菌肽不参与特异性免疫过程，A错误；

B；根据题干信息；抗菌肽“在细菌细胞膜上形成跨膜的离子通道，造成细胞内容物泄漏，最终导致细胞死亡”，即改变了细胞膜的通透性，使细胞不能保持正常渗透压而死亡，B正确；

C；抗菌肽“是广泛存在于昆虫以及两栖类动物、哺乳动物体内的抗菌活性物质”；即来源于真核细胞，如利用转基因技术提高抗菌肽的产量，但最好选择真菌作为受体菌，因为真菌是真核细胞，繁殖速度快，遗传物质少，C错误；

D；根据题干信息；“某些抗菌肽对癌细胞甚至病毒等均具有强有力的杀伤作用”，则对抗菌肽的研究可为治疗癌症、新型冠状病毒肺炎等提供新思路，D正确。

故选BD。

【点睛】9、C【分析】【分析】

根据DNA的溶解性提取DNA；1；DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaC中的溶解度不同。2、DNA不溶于酒精，但是某些蛋白质则溶于酒精。3、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。

【详解】

A；将粗提取的DNA加入到2mol/L的NaCl溶液的目的是为了溶解DNA；A正确；

B；DNA不溶于酒精；而某些蛋白质溶解于酒精，可用体积分数为95%冷酒精溶解某些蛋白质，析出DNA，获得粗提取的DNA，B正确；

C；香蕉果肉组织细胞有细胞壁保护；因此加蒸馏水不会破坏细胞，不能将DNA释放岀来，C错误；

D；将DNA再次溶于NaCl溶液；加入现配的二苯胺试剂，沸水浴冷却出现蓝色，D正确。

故选C。

【点睛】10、A:B:D【分析】【分析】

病毒：是一种个体微小结构简单；只含一种核酸(DNA或RNA)和蛋白质组成的，必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞结构生物。

【详解】

A；噬菌体在细菌细胞中；没有裂解细菌，细菌繁殖导致透明的平板培养一段时间后变为不透明状态，A正确；

B；噬菌体样品应有足够的稀释度；以保证初期一个细菌最多被一个噬菌体吸附，如果稀释度不够，会出现两个或多个噬菌体吸附同一个细菌，从而导致噬菌斑数量减少，噬菌斑计数结果比样品中实际活噬菌体数偏低，B正确；

C、若平均每个平板的噬菌斑数量为150，则该样品的噬菌体效价为：150÷0.1×106=1.5×109pfu/mL；C错误；

D；若有少数活噬菌体末能侵染细菌；会导致形成噬菌斑数量减少，从而导致噬菌斑计数结果比样品中实际活噬菌体数偏低，D正确。

故选ABD。11、A:B:C【分析】【分析】

分析甲图：甲图为牛胚胎移植示意图；胚胎移植的具体过程为：对供；受体的选择和处理；配种或人工授精；对胚胎的收集、检查、培养或保存；胚胎进行移植；移植后的检查；对受体母牛进行是否妊娠的检查。分析乙图：①是滋养层；②是内细胞团；③是囊胚腔。

【详解】

A；冲卵是指把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来；甲图中冲卵的目的是获取早期胚胎，A错误；

B；为使供体和受体处于相同的生理状态；通常需要注射孕激素等激素使其同期发情，B错误；

C；进行性别鉴定需要取囊胚的①滋养层细胞做DNA分析；C错误；

D；受精卵形成乙囊胚的过程中进行卵裂；每个细胞的体积变小，细胞总体积不变或略有减少，D正确。

故选ABC。12、A:B:C【分析】【分析】

1；骨髓瘤细胞为无限增殖的细胞；分裂能力强，制备单克隆抗体的过程中还需该杂交细胞具备分泌特异性抗体的功能，而浆细胞为能够分泌抗体的细胞，故与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞为能分泌抗体的浆细胞。

2；骨髓瘤细胞与B淋巴细胞在融合的过程中可能会出现多种融合结果；如骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合，B淋巴细胞与B淋巴细胞融合，而实验需要的是骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合的细胞，需要用选择性培养基进行筛选，但只能筛选出能杂交瘤细胞，而要筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞则需要进行专一性抗体检测。

【详解】

A；与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞取自脾脏；不一定是能分泌抗体的浆细胞，A错误；

B；骨髓瘤细胞与B淋巴细胞在融合的过程中可能会出现多种融合结果；如骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合，B淋巴细胞与B淋巴细胞融合，而实验需要的是骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合的细胞，需要用选择性培养基进行筛选，但是只能筛选出能杂交瘤细胞，而要筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞则需要进行专一性抗体检测，B错误；

C；抗体为分泌蛋白；需要内质网和高尔基体对其进行加工，大肠杆菌为原核生物，无高尔基体和内质网，为获得结构正确的嵌合抗体，受体细胞不应该选用大肠杆菌，C错误；

D；结合题干“鼠源抗体具有外源性；会被人体免疫系统当作抗原而清除。用人抗体的C区替换鼠源抗体的C区，保留鼠单抗的V区，可构建人一鼠嵌合抗体”可知，该抗体不是原本的鼠源抗体，保留了其V区，但是其中还有一部分来自于人本身，使得人一鼠嵌合抗体在保留抗体特异性的同时外源性下降，D正确。

故选ABC。13、B:C:D【分析】【分析】

在微生物学中；将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。

【详解】

A；培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水；将出现失水过多而死亡的现象，对生长不利，A错误；

B；这种培养基以石油为唯一碳源；只有石油降解菌可在该培养基上正常存活，因此是一种选择培养基，B正确；

C；被石油污染的土壤通气性极差；利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤，C正确；

D；根据生物与其生存环境相适应的特点；未被污染的土壤中几乎不含石油分解菌，从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌，D正确。

故选BCD。14、A:D【分析】【分析】

分析题图：奶牛1的培育采用了基因工程技术；早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；奶牛2的培育采用可基因工程技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；奶牛3的培育采用了核移植、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。

【详解】

A；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；A正确；

B；奶牛2的培育过程中；在囊胚阶段注入了含有外源基因的受体细胞，因此其体内不同组织细胞的基因型可能不同，B错误；

C；奶牛3表明受体细胞的细胞核具有全能性；C错误；

D；结合分析可知；奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养，D正确。

故选AD。三、填空题(共5题，共10分)15、略

【解析】①.动物细胞培养和核移植技术、②.动物细胞融合与单克隆抗体16、略

【解析】①.胚胎细胞②.体细胞17、略

【分析】1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

3；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）；生物安全主要是指转基因生物释放到环境中，可能会对生物多样性构成潜在的风险和威胁。

【详解】

（1）一些持支持态度的科学家认为；由于不同物种间存在生殖隔离，同时花粉的传播距离和存活时间有限，不会造成转基因农作物与其它植物的杂交，因而也不太可能对生物多样性造成威胁。

（2）在转基因生物或产品研究过程中；为保证转基因生物的安全，要把重组DNA的转移限制在遗传上具有特定缺陷的生物上；对外源DNA进行认真选择，避免能够表达出对人体有毒性或过敏的蛋白质等等。

（3）坚持克隆人的科学家则认为；一些技术问题可以通过胚胎分级；基因诊断和染色体检查等方法得到解决。

（4）中国政府对于克隆技术的态度是禁止生殖性克隆；但不反对治疗性克隆。

【点睛】

本题难度一般，属于考纲中识记、理解层次的要求，结合基因工程的应用，综合考查了基因工程、试管婴儿和转基因生物的安全性问题，并且深入考查了相关基础知识，要求考生能够构建一定的知识网络．面对转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。【解析】①.生殖隔离②.存活时间③.特定缺陷④.蛋白质⑤.基因诊断⑥.染色体检查⑦.禁止生殖性克隆人⑧.治疗性克隆18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落菌落数19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因文库人工合成PCR技术四、综合题(共3题，共27分)20、略

【分析】【分析】

1；基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

2；根据PCR过程的特点可绘制1个sGFP片段复制图示如下：

【详解】

（1）PCR扩增sGFP的原理是双链DNA复制，由于DNA两条链反向平行，且DNA聚合酶只能使新合成的DNA子链从5′→3′方向延伸，所以该过程需要根据sGFP两端（3′端）碱基序列设计特异性引物序列，为了保证sGFP正确插入到质粒中，还需要在引物的5′端添加限制酶识别序列，由于质粒大片段是利用HindⅢ和BamHⅠ共同切割得到的质粒的长片段，所以B链5′是利用HindⅢ切割形成的黏性末端，根据HindⅢ识别的碱基序列可知，图中b链的黏性末端碱基序列（5′→3′）为AGCT。

（2）扩增过程中需要用到Taq酶（热稳定DNA聚合酶）。由分析图示可知；第一；二轮循环合成的子链长度均不同，第三轮循环产生的子代DNA分子中，存在两个含有等长的两条核苷酸链的DNA分子，即仅含引物之间的序列，第三轮的DNA再进行一次半保留复制，可形成8个两条链等长的sGFP片段，消耗7个引物1。

（3）过程②为构建重组DNA；需要的工具酶是DNA连接酶。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，而终止子是使转录终止的序列，而目的基因不携带启动子和终止子，所以将sGFP插入到构巢曲霉启动子和终止子之间的目的是保证sGFP能在大丽轮枝菌细胞中表达。

（4）将重组质粒导入农杆菌时利用的方法是Ca2+处理法，即需要用Ca2+（CaCl2）处理农杆菌；使其转化为感受态细胞。

（5）由于潮霉素在灭菌时结构被破坏；不能发挥选择作用，所以潮霉素不能与培养基一同灭菌。

（6）根据质粒中BamHⅠ和HindⅢ的识别位点、以及用BamHⅠ和HindⅢ酶切后得到的质粒大片段为3500bp，可知质粒小片段应为3750-3500=250bp，应出现3500bp和250bp两种片段。sGFP的基因长度为720bp，质粒大片段为3500bp，二者连接后的长度为3500+720=4220bp。用BamHⅠ和HindⅢ完全酶切后会形成3500bp和720bp两种片段。综上共出现3种，即3500bp、250bp、720bp片段。

（7）转基因成功的标志是形成目的基因的产物；所以最终可通过检测大丽轮枝菌菌丝细胞中绿色荧光强度，以筛选出绿色荧光蛋白旺盛表达的大丽轮枝菌。

【点睛】

本题主要考查基因工程相关知识，要求考生掌握基因工程的操作步骤，能准确识别图示的各个过程，理解基因表达载体的组成及其各组分的作用，理解PCR扩增的原理和过程。【解析】DNA分子复制sGFP两端的碱基序列AGCTTaq酶87DNA连接酶保证sGFP基因可以在大丽轮枝菌细胞中表达Ca2+（CaCl2）潮霉素在高温灭菌时结构会被破坏3大丽轮枝菌细胞中绿色荧光的强度21、略

【分析】【分析】

1.基因工程的工具：①限制酶；能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；②DNA连接酶，连接两个核苷酸之间的磷酸二酯键；③运载体，质粒是最常用的运载体，除此之外，还有λ噬菌体衍生物；动植物病毒。

2.基因治疗：把正常的基因导入病人体内有缺陷的细胞中；使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。基因治疗分为体外基因治疗和体内基因治疗两种类型。

【详解】

（1）核糖体是蛋白质的合成车间；显然Cas蛋白合成的场所是核糖体，该系统需要对特定的DNA序列识别并切割，其功能类似于基因工程工具酶中的限制酶，作用的化学键为磷酸二酯键，细菌体内含有该系统，其意义在于切割外源DNA，保护细菌自身的遗传信息不受干扰。

（2）由于Cas9蛋白没有特异性；而CRISPR/Cas9系统能特定切割BMAL1基因，显然向导RNA能识别BMAL1基因中特定的序列，从而在特定部位完成定向切割。

（3）BMAL1是控制生