2025年沪教版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案

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A.应用1中获得的良种小牛为雌性，是无性生殖的产物B.应用2、3、4所用的受精卵可以不通过人工授精获得C.应用3过程中对桑葚胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割D.应用4中的组织和器官是通过对胚胎干细胞进行定向诱导分化得到的2、下列有关哺乳动物精子和卵子的发生以及受精作用的叙述，正确的是（）A.卵细胞膜反应是防止多精入卵的第一道屏障B.排卵就是从卵巢排出成熟卵子的过程C.雄性动物排出的精子可直接与卵子结合完成受精D.受精作用的实质是雌雄原核的融合3、三糖铁（TSI）培养基含有牛肉膏、蛋白胨、蔗糖、乳糖、微量葡萄糖、硫酸亚铁、氯化钠、酚红、琼脂等成分，可根据观察单一细菌对三种糖的分解能力及是否产生硫化氢，来鉴别细菌的种类。操作流程如下：使用笔直的接种针挑取待测菌落，将接种针平稳刺入三糖铁固体斜面培养基内，然后沿原穿刺途径慢慢抽出接种针，最后在斜面上进行“之”字划线，36℃下培养18～24h，观察实验结果（酚红在酸性条件下显黄色，在碱性条件下显红色；硫化氢与铁盐反应生成黑色沉淀）。下列叙述错误的是（）A.先穿刺接种再进行“之”字划线，可以兼顾厌氧菌和好氧菌的培养与观察B.若底层穿刺线四周出现扩散生长现象，可推测细菌是可以运动的C.若培养基出现黑色沉淀，可推测该细菌能够分解牛肉膏、蛋白胨D.若细菌能分解乳糖而产酸、产CO2，推测斜面为黄色、底层为红色且有气泡4、新冠病毒包膜表面的S蛋白能识别人体细胞膜表面的ACE2受体并导致病毒入侵人体细胞。制备重组亚单位新冠疫苗的线路是：提取新冠病毒RNA→通过RT-PCR（反转录酶聚合酶链式反应）技术扩增筛选RBD蛋白（S蛋白中真正与ACE2结合的关键部分）基因（图1）→构建基因表达载体（图2）→导入CHO细胞并培养→提取并纯化RBD蛋白→制成疫苗。图3为利用电泳技术对PCR的产物进行纯度鉴定，1号泳道为标准（Marker），2号泳道为阳性对照组，3号泳道为实验组。下列相关叙述错误的是（）

A.利用RT-PCR技术获取RBD蛋白基因时，需加入逆转录酶、TaqDNA聚合酶B.利用PCR扩增含有限制酶切点的RBD蛋白基因时，应选择的引物为引物4、引物5C.2号泳道是以（提纯的）RBD蛋白基因片段为材料所做的阳性对照组D.为提高目的基因和运载体的正确连接效率，应选择限制酶EcoRI切割5、为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞。下列叙述正确的是（）

A.用限制酶BsaBI和DNA聚合酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因B.与只用KpnI相比，KpnI和XhoI处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确C.在含卡那霉素的培养基上能存活的植物细胞即为成功转入目的基因的细胞D.用PCR技术检测GNA和ACA基因成功导入棉花细胞后，棉花就一定表现抗蚜虫性状评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)6、科学家运用基因工程技术，将人凝血因子基因导入山羊的受精卵中，培育出山羊乳腺生物反应器，使山羊乳汁中含有人凝血因子。以下有关叙述错误的是（）A.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入山羊的受精卵B.在该转基因羊中，人凝血因子存在于乳腺细胞，而不存在于其他细胞C.人凝血因子基因开始转录后，DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNAD.科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因重组在一起，从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异表达7、限制酶BamHⅠ和BglⅡ是两种常见的工具酶，它们的识别序列及切割位点依次为G↓GATCC和A↓GATCT。研究中用BamHⅠ切割DNA获得目的基因，用BglⅡ切割质粒，并连接得到重组质粒。相关叙述错误的是（）A.酶切过程中，需控制好酶浓度、温度和反应时间等因素B.目的基因经BamHⅠ切割后形成的黏性末端是—CTAGC.分别用两种限制酶切割，保证了目的基因定向插入质粒D.经两种酶处理得到的重组质粒不能再被这两种酶所识别8、下图表示动物细胞培养的基本流程。有关叙述正确的是（）

A.在C瓶中进行的细胞培养称为原代培养B.培养瓶D可以通过松盖处理满足细胞培养的气体环境需要C.培养瓶D无需放置在CO2培养箱中，但需要保持恒温D.D瓶细胞出现接触抑制时，用胰蛋白酶处理，再用离心法收集细胞分瓶培养9、为保障公共健康；需要定期对公共饮用水进行卫生检测。饮用水的卫生标准是100mL不得检出大肠杆菌或者1000mL不超过3个大肠杆菌。若要确定饮用水是否合格，可采用膜过滤法检测，过程如下图所示。下列相关叙述错误的是（）

A.检测前一般需要对水样收集瓶、培养皿、镊子等进行干热灭菌B.完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上，在25℃下培养观察C.为减少实验误差，应按照上述实验步骤多次取样重复进行检测D.可用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测饮用水中的大肠杆菌数量10、下列关于传统发酵技术的说法中，错误的是（）A.果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧生物，在有氧条件下大量繁殖B.制作果醋需要醋酸菌，它是一种严格厌氧的微生物，可将葡萄中的糖分解为乙酸C.多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等D.制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸和二氧化碳11、克隆动物常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法两种。前者是用微型注射针将供体细胞的细胞核吸出注入去核卵母细胞质内；后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后促使两个细胞融合。世界首例体细胞克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园的一只野生北极狼的皮肤样本，卵母细胞来自一只处于发情期的母犬，代孕母体则是一只比格犬。下列叙述错误的是（）A.克隆北极狼的性状由野生北极狼、发情期的母犬和比格犬的基因共同决定B.相比之下，透明带下注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小C.供体细胞注入卵母细胞透明带内后，就可自行进入卵母细胞D.细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程中发生了基因重组评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)12、1.基因检测引发的伦理问题。

（1）基因身份证：基因身份证指把个人的_____和_____检测出来；记录在磁卡上，而做成的个人基因身份证。

（2）基因检测引发的争论①_____②_____③_____④_____⑤_____⑥_____

。项目。

反对。

支持。

技术方面。

目前人类对①及基因间的相互作用尚缺乏足够的认识；通过基因检测达到②的目的是很困难的；基因检测结果会给受检者带来巨大的③。

通过基因检测可以对遗传性疾病及早采取④；适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。

道德方面。

基因资讯的泄露造成⑤；如个人婚姻困难；人际关系疏远，更明显的是造成一支遗传性失业大军。

对于基因歧视现象；可以通过正确的科学知识传播；⑥教育和立法得以解决。

2.试管婴儿与设计试管婴儿的比较①_____②_____③_____④_____

。项目。

设计试管婴儿。

试管婴儿。

技术手段。

胚胎移植前①（填“需要”或“不需要”）进行遗传学诊断这一环节。

②（填“需要”或‘不需要”）进行遗传学诊断。

实践应用。

用于白血病；贫血病等遗传性疾病的预测。

解决不孕不育问题。

联系。

二者都是③受精；体外进行早期胚胎发育，再进行胚胎移植，从生殖方式上都为④

13、基因进入受体细胞的______——“分子运输车”14、DNA粗提取与鉴定实验中，二苯胺要___________。15、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的______，将它分散成______，然后放在适宜的______中，让这些细胞______。16、植物诱导融合的方法：物理法包括______等。化学法一般是用_____作为诱导剂。17、我国是一个爱好和平的国家，也是曾经遭受生物武器伤害的国家。我国政府对生物武器的态度是什么？我们为什么认同这种态度？__________评卷人得分四、判断题(共2题，共18分)18、蛋白质工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质。（选择性必修3P93）()A.正确B.错误19、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共14分)20、炭疽；是一种由炭疽芽孢杆菌引起的人兽共患性传染病，也是我国规定的乙类传染病。回答下列有关问题：

(1)人通常是通过接触患炭疽的动物或动物制品被感染，皮肤炭疽病在人类炭疽病中最为常见，这类患者的皮肤渗出物中含有炭疽芽孢杆菌。皮肤炭疽病疑似患者就医时，医生先要取患者的皮肤渗出物稀释后涂布到固体培养基上，经过一段时间的培养获得的平板可能是_____。A．B．C．D．(2)挑取上述培养基上的菌落进行如图所示实验（注：实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽芽孢杆菌）。

①该实验的目的是_____。

②对照组试管中应加入_____，实验过程中为避免杂菌污染进行的操作包括_____（至少写出两点）。

③实验结果为_____时；表明该疑似患者被炭疽芽孢杆菌感染。

④实验过程中需将锥形瓶固定在摇床上，在35℃下振荡培养24h，直至液体培养基变浑浊。振荡培养说明炭疽芽孢杆菌的代谢类型是_____，振荡培养的目的是_____。液体培养基变浑浊的原因是_____。

(3)对炭疽芽孢杆菌进行计数时，选用10-4、10-5、10-6三个稀释度的菌液，各取0．2mL涂布，每个稀释度作三次重复，经24h恒温培养后结果如表。稀释度10-410-510-6平板编号A1A2A3B1B2B3C1C2C3菌落数31529830245535112911

由表可知，最适合计数的稀释度为_____，原因是_____。21、黏多糖贮积症是由IDUA基因突变导致的遗传病。科研人员对此病的治疗进行相关研究。

(1)黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因由于碱基对___________造成突变，转录出的mRNA长度不变但提前出现终止密码子，最终导致合成的IDUA酶分子量___________；与正常IDUA酶的空间结构差异显著而失去活性，积累过多的黏多糖无法及时清除，造成人体多系统功能障碍。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构、功能相同，但它的反密码子可以与终止密码子配对。在上述这一类突变基因的翻译过程中，加入sup-tRNA可以发挥的作用是___________；从而诱导通读获得有功能的全长蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以携带不同氨基酸；为比较它们的通读效果，科研人员进行了相关研究，实验结果如图。

注：“-”代表未加入。

据图分析，实验组将___________基因导入受体细胞，并采用___________技术检测导入基因的表达情况。据结果分析，携带酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人员利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠及IDUA基因敲除小鼠进行治疗，检测肝脏细胞IDUA酶活性和组织黏多糖的积累量，与不治疗的小鼠相比较，实验结果为_____________，表明携带酪氨酸的sup-tRNA可以治疗黏多糖贮积症。评卷人得分六、综合题(共2题，共12分)22、回答下列（一）；（二）小题。

（一）柑橘压榨取汁后；残留的果渣占果实质量的40%～50%，这些残渣中含有丰富的可溶性糖；酸、果胶、粗脂肪、粗纤维、维生素、氨基酸和矿物质等营养成分，然而，柑橘果渣利用相对较少，多作为废弃物处理，既浪费了资源，又污染了环境。下图是利用酶解法处理果渣示意图。试回答下列问题：

（1）利用酶解法处理果渣方法之一是利用从________中获得的________酶将果渣的果胶最终分解为________。

（2）为确定酶解法的处理效果，将离心分离后回收的果汁用________________法测定其OD值，OD值________________的处理效果好。也可对其进行________________；回收和记录相同体积果汁处理后的固形物的含量，固形物含量越少，时间越短，处理效果越好。

（3）下图为酶用量对柑橘果汁回收的影响实验结果。由图可知，随着酶用量的增加，柑橘汁回收率呈现________的状态。从节约成本考虑选择________的酶含量进行进一步优化试验。

（二）农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞；并且整合到受体细胞染色体的DNA上，故农杆菌转化常运用于基因工程。回答下列问题：

（1）质粒的本质是________，根据农杆菌Ti质粒的这一特点，将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的________作用；就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。

（2）农杆菌能感染双子叶植物而通常不感染单子叶植物，是因为受伤的双子叶植物能分泌某些酚类物质诱导Ti质粒中的Vir基因区段表达，该表达产物能诱导Ti质粒产生一条新的T-DNA单链分子。此单链分子可进入植物细胞并整合到染色体。若使农杆菌也能感染单子叶植物，可通过在伤口施加________，合成新的T-DNA单链需要的酶有________________等。

（3）“筛选”是生物工程中常用的技术手段。Ti质粒作为载体还需具有标记基因，通过标记基因筛选________细胞，筛选出的细胞________（填“一定”或“不一定”）是含有目的基因的细胞。植物体细胞杂交过程中，诱导________后，需要对获得的细胞进行筛选。单克隆抗体制备需要两次筛选，第二次筛选目的是________。23、自然界中能够产生生物荧光的酶的统称为荧光素酶。荧光素酶及其合成基因在生物研究中有着广泛的利用。

（1）荧光素酶基因常被作为基因工程中的标记基因，其作用是将__________________________筛选出来。

（2）下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点，下图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。若需利用酶切法（只用一种酶）获得荧光素酶基因，最应选择的限制酶是___________。

（3）利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用________________的原理，使荧光素酶基因数量呈______________方式增加。

（4）迄今为止，可将上述具有荧光素酶基因的运载体导入动物细胞的技术，应用最多的、最有效的是________________。经一系列步骤，将所获得的胚胎早期培养一段时间后，再移植到雌性动物的____________或子宫内；使其发育成为具有新性状的动物。

（5）囊胚阶段的胚胎进行胚胎分割，可以提高胚胎的利用率，但在进行分割时应注意___________________。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、C【分析】【分析】

分析题图：应用1中：供体1提供细胞核；供体2提供细胞质，经过核移植技术形成重组细胞，并发育形成早期胚胎，再胚胎移植到受体子宫发育成小牛，称为克隆牛；

应用2中：优良公牛和供体1配种形成受精卵；并发育成早期胚胎，再胚胎移植到受体子宫发育成小牛，属于有性生殖；

应用3中：采用了胚胎分割技术；

应用4中：从早期胚胎和原始性腺中获取胚胎干细胞；并进行体外干细胞培养。

【详解】

A；应用1中获得的小牛为克隆牛；其细胞核遗传物质来源于供体1（荷斯坦高产奶牛），所以良种小牛是雌性，A正确；

B；应用2、3、4所用的受精卵不一定来源于体外受精；也可以来自体内受精，B错误；

C；对囊胚阶段的胚胎进行分割时需要将内细胞团进行均等分割；否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，C错误；

D；应用4中细胞为胚胎干细胞；进行定向诱导，可分化形成各种组织和器官，用于器官移植研究，D正确。

故选C。

【点睛】2、D【分析】【分析】

哺乳动物精子和卵子发生的不同点：

（1）精子的减数两次分裂是连续的；场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一。（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）。

（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的；MⅡ是在受精过程中完成的。

（3）精子的形成过程需要变形；卵细胞的形成过程不需要变形。

【详解】

A；卵细胞膜反应是防止多精入卵的第二道屏障；A错误；

B；排卵就是指卵子从卵泡中排出的过程；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，故排卵排出的不是成熟的卵细胞，B错误；

C；雄性动物排出的精子需要经过获能培养后才能与卵子结合完成受精；C错误；

D；卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体；但受精完成的标志是雌雄原核融合成为合子，D正确。

故选D。3、D【分析】【分析】

鉴别培养基：利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同；在培养基中加入特定的作用底物和指示剂，观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物，通过指示剂的反应不同来鉴别细菌。

【详解】

A；“之”字划线的要领是：往复不间断划线；但是又不与划过的路线重复或重叠。如果菌量比较大，就可以划得更为密集或者增加一块平板继续“之”字划线（即连续划两块板）。“之”字划线一般适用于分离本身在此培养基上单一且黏性较大的菌类或可疑菌落的纯培养，可以兼顾厌氧菌和好氧菌的培养与观察，A正确；

B；细菌有运动能力；可由穿刺线向四周扩散生长，B正确；

C；牛肉膏、蛋白胨中含有蛋白质；细菌产生的硫化氢与铁盐反应生成黑色沉淀。若培养基出现黑色沉淀，可推测该细菌能够分解牛肉膏、蛋白胨，产生硫化氢，C正确；

D；细菌分解葡萄糖、乳糖产酸产气；使斜面与底层均成黄色，D错误。

故选D。4、D【分析】【分析】

PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，利用的原理是DNA复制，需要条件有模板DNA；四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶），过程包括：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；RT-PCR技术是将RNA的反转录和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术；利用RT酶PCR技术，获取S蛋白基因时，需加入逆转录酶、Taq酶，A正确；

B；引物与模板链的3'端碱基互补配对；故引物1、引物2、引物7和引物8不合适，扩增得到的RBD蛋白基因也应该含有限制酶的酶切位点，故引物3和引物6不合适，故选引物4和引物5，B正确；

C、PCR的产物可通过电泳鉴定，设置如下：1号泳道为标准（Marker）；2号泳道是以RBD蛋白基因片段为材料做的阳性对照组，3号泳道为实验组，C正确；

D；质粒上没有SmaⅠ酶切位点；且若使用EcoRⅠ酶切，易造成目的基因和质粒自身环化，故应该选择BamHⅠ和HindⅢ，D错误。

故选D。5、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、复制原点和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4)）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术和PCR技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；由图可知；GNA、ACA都含有限制酶BsaBI的酶切位点，故用限制酶BsaBI和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因，DNA聚合酶是催化单个核苷酸连接，而DNA连接酶是催化DNA片段连接，A错误；

B；图中质粒与ACA-GNA上都含有KpnI和XhoI的酶切位点；与只用KpnI相比，KpnI和XhoI处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确，避免反向连接，B正确；

C；由于载体上含有卡那霉素抗性基因；在含卡那霉素的培养基上能存活的植物细胞为成功转入目的基因的细胞或含有普通质粒的细胞，C错误；

D；PCR技术可用于基因探针的制备；可用来检测目的基因是否导入受体细胞，基因GNA和ACA导入棉花细胞后不一定正常表达，所以不一定具有抗虫性状，D错误。

故选B。

二、多选题(共6题，共12分)6、B:C:D【分析】【分析】

转基因动物生产药物：

(1)基因来源：药用蛋白基因+乳腺组织特异性表达的启动子(原理：基因的选择性表达)。

(2)成果：乳腺生物反应器。

(3)过程：将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起；导入哺乳动物的受精卵中，最终培育的转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁生产所需要的药物。(只有在产下雌性动物个体中，转入的基因才能表达)。

【详解】

A；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；因此可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵，A正确；

B；在该转基因羊中；人凝血因子存在于所有细胞中，但只在乳腺细胞中表达，B错误；

C；人凝血因子基因开始转录后；RNA聚合酶以DNA分子一条链为模板合成mRNA，C错误；

D；科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起；从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异表达，D错误。

故选BCD。7、B:C【分析】【分析】

关于限制酶；考生可以从以下几方面把握：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端。

【详解】

A；影响酶促反应的因素有温度、pH、酶浓度、底物浓度等；因此酶切过程中，需控制好酶浓度、温度和反应时间等因素，A正确；

B；根据题意可知；限制酶BamHⅠ的识别序列及切割位点为G↓GATCC，因此目的基因经BamHI切割后形成的黏性末端是是-GATC或CTAG-，B错误；

C；由于这两种酶切割形成的黏性末端相同；因此分别用这两种限制酶切割，不能保证目的基因定向插入质粒，C错误；

D；经两种酶处理得到的重组质粒的相应部位的序列不能再被这两种酶识别；D正确。

故选BC。

【点睛】8、A:B:D【分析】【分析】

动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】

A；将动物组织分散为单个细胞制成细胞悬液中进行的第一次培养为原代培养；因此在C瓶中进行的细胞培养称为原代培养，A正确；

BC、进行动物细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，以满足细胞培养的气体环境需要，其中氧气是细胞呼吸必需的，CO2是为了维持培养液的pH；B正确；C错误；

D；D瓶细胞出现接触抑制时；应用胰蛋白酶处理使其分散为单个细胞，再用离心法收集细胞分瓶以进行传代培养，D正确。

故选ABD。9、B:D【分析】【分析】

细菌的数目可以通过滤膜法来测定。将已知体积的水过滤后；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈黑色，根据黑色菌落的数目，计算水样中大肠杆菌的数量。微生物接种时，为了避免其它杂菌的污染，接种过程要进行无菌操作。灼烧灭菌常适用于接种环；接种针；干热灭菌常适用于玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具；高压蒸汽灭菌常适用于无菌水、培养基。

【详解】

A；检测前需要对水样收集瓶、滤膜、培养基、镊子灭菌；防止杂菌干扰，A正确；

B；完成过滤后需将滤膜置于固体培养基上；在37℃下培养观察，B错误；

C；为减少实验误差；按照上述实验步骤多次取样重复进行检测，取平均值作为实验数据，C正确；

D；大肠杆菌较小；不能用血细胞计数板直接计数法替代膜过滤法检测，D错误。

故选BD。10、B:D【分析】【分析】

参与豆腐发酵的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多种；其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一种丝状真菌，常见于土壤、水果、蔬菜、谷物上，具有发达的白色菌丝。毛酶等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【详解】

A；果酒的制作原理是酵母菌的无氧呼吸产生酒精；酵母菌属于兼性厌氧生物，在有氧条件下大量繁殖，A正确；

B；制作果醋需要醋酸菌；它是一种好氧的微生物，可将葡萄中的糖（或乙醇）分解为乙酸，B错误；

C；多种微生物参与了腐乳的制作；如酵母菌、毛霉、曲霉等，其中起主要作用的是毛霉，C正确；

D；制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物；可以通过无氧呼吸产生乳酸，D错误。

故选BD。11、A:C:D【分析】【分析】

动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成为动物个体。

【详解】

A；克隆北极狼的供体细胞来自野生北极狼；卵母细胞来自发情期的母犬，因此性状由野生北极狼、发情期的母犬的基因共同决定，比格犬只是代孕母体，不提供遗传物质，A错误；

B；透明带下注射法不抽取供体细胞的细胞核；操作简单且对供体细胞核损伤小，同时注射的位置是卵母细胞外的透明带，然后诱导两个细胞融合，对卵母细胞的损伤小，B正确；

C；供体细胞注入卵母细胞透明带内后；还需要电融合法等诱导才能使供体细胞进入卵母细胞形成重构胚，C错误；

D；细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程是有丝分裂过程；而基因重组发生在减数分裂过程，D错误。

故选ACD。三、填空题(共6题，共12分)12、略

【分析】【分析】

1.基因检测可以把人体内的致病基因和易感基因检测出来；通过采取一定的预防措施预防遗传病的发生，但同时可能会带来基因歧视等伦理道德方面的问题。

2.设计试管婴儿不同于试管婴儿；试管婴儿是为了解决不孕不育的问题，而设计试管婴儿是为了解决器官移植方面的医疗问题。

【详解】

1.（1）基因身份证是指把每个人的致病基因和易感基因都检测出来；并记录在磁卡上，这样到医院看病时，只要带上这种身份证，医生就可以“对证”治疗。

（2）反对基因检测的人认为：目前人类对基因结构及基因间相互作用尚缺乏足够的认识；要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的；况且人类的多基因病，既与基因有关，又与环境和生活习惯有关，有某种致病基因的人不见得就会患病。但是，基因检测结果本身就已经足以给受检者带来巨大的心理压力。个人基因资讯的泄露所造成的基因歧视，势必造成奇特的失业大军，即遗传性失业大军。个人基因资讯被暴露之后，还会造成个人婚姻困难；人际关系疏远等严重后果。支持基因检测的人认为：通过基因检测可以对遗传性疾病及早采取预防措施，适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。对于基因歧视现象，可以通过正确的科学知识传播、伦理道德教育和立法得以解决。

2.设计试管婴儿需要因而具有特定的性别或遗传性状；因此胚胎移植前需要进行遗传学诊断这一环节，而试管婴儿是为了解决不孕不育问题，不需要考虑婴儿的性别等问题，不需要进行遗传学诊断。二者的共同点是：两者都是体外受精，并进行体外早期胚胎培养，都要经过胚胎移植，都是有性生殖。

【点睛】

1.基因与疾病的关系：具有致病基因的个体不一定患遗传病；因为生物的性状还受到环境因素的影响；没有致病基因也可能患病，因为基因表达的蛋白质，在加工或修饰过程中出现错误，也会出现症状。

2.明确设计试管婴儿和试管婴儿目的的不同是解答本题的关键之一。【解析】致病基因易感基因基因结构预防疾病心理压力预防措施基因歧视伦理道德需要不需要体外有性生殖13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】载体14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】现配现用15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】组织单个细胞培养基生长和繁殖16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】离心、振动、电刺激聚乙二醇17、略

【分析】【详解】

我国是一个爱好和平的国家，也是曾经遭受生物武器伤害的国家，如在抗日战争中就遭受到了日军发动的细菌战的伤害，由于生物武器致病能力强、攻击范围广，因而我们深知生物武器不仅能对我国、甚至会对整个人类造成毁灭性的灾难，因此我国政府在1998年6月重申了我国对生物武器的态度，即为不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。【解析】我国是一个爱好和平的国家，由于生物武器致病能力强、攻击范围广，生物武器不仅能对我国、甚至会对整个人类造成毁灭性的灾难，因此我国政府在1998年6月重申了我国对生物武器的态度，即为：

在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。四、判断题(共2题，共18分)18、B【分析】【详解】

基因工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质。蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程，通过改造和合成基因来改造现有的蛋白质或制造出一种新的蛋白质，可见蛋白质工程可以制造出自然界不存在的、但是能符合人类生产和生活需求的蛋白质，故说法错误。19、A【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等，故正确。五、实验题(共2题，共14分)20、略

【分析】【分析】

1；稀释涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液；尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。2、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。

【详解】

（1）A；B、C中的菌落分布较均匀；是通过稀释涂布平板法获得的，而D是通过平板划线法获得的，划线平板法是从上一次划线的末端开始划线。故选ABC。

（2）①从整个实验过程可以看出；实验通过对皮肤渗出物稀释培养形成的菌落进行扩大培养后，利用噬菌体的作用检测其中是否含有炭疽芽孢杆菌。②对照组中加入的液体不应含有噬菌体，因此应加入等量的生理盐水；在进行微生物培养时为防止杂菌的混入，消毒和灭菌工作是关键，主要包括对操作的空间；操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；实验操作在酒精灯火焰附近进行；操作过程中避免已经灭菌的材料用具与周围物品相接触等。③若实验组液体培养基的浑浊度低于对照组，说明实验组中的炭疽芽孢杆菌被噬菌体侵染与破坏，即该疑似患者感染了炭疽芽孢杆菌。④炭疽芽孢杆菌属于细菌，能寄生在人和动物体内，说明它是异养型生物，培养时需要借助摇床振荡培养，说明它是需氧型生物；振荡培养的目的是增加培养液中的氧气含量，使细菌与营养物质充分接触，有利于炭疽芽孢杆菌的大量繁殖；培养液变浑浊表明炭疽芽孢杆菌大量繁殖。

（3）分析表中数据可知，只有稀释度为10-5时菌落数在30~300之间，适合用于计数。【解析】(1)ABC

(2)检验皮肤炭疽病疑似患者的皮肤渗出物中是否含有炭疽芽孢杆菌与实验组等量的生理盐水对操作的空间；操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；实验操作在酒精灯火焰附近进行；操作过程中避免已经灭菌的材料用具与周围物品相接触实验组液体培养基的浑浊度比对照组低（异养）需氧型增加培养液中的氧气含量；使细菌与营养物质充分接触炭疽芽孢杆菌大量繁殖。

(3)10-5稀释度为10-5时菌落数在30~300之间21、略

【分析】【分析】

基因突变是指DNA分子中发生碱基对的替换；增添和缺失；而引起的基因结构的改变。翻译是指在核糖体上，以mRNA为模板、以氨基酸为原料合成蛋白质的过程，该过程还需要tRNA来运转氨基酸。

密码子由位于mRNA上决定一个氨基酸的三个相邻的碱基组成。终止密码子的作用是终止翻译过程。

基因工程中检测目的基因在受体细胞内是否成功表达可以用抗原-抗体杂交技术。

【详解】

（1）由题干信息可知；黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因突变后，转录出的mRNA长度不变，说明其没有发生碱基对的增添和缺失，因为这两者改变会导致转录出的mRNA长度改变，因此推测其基因突变是由于碱基对替换。由于终止密码子提前出现，导致翻译提前终止，肽链变短，IDUA酶分子量变小，空间结构改变而失活。

（2）由题干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最终诱导核糖体通读mRNA上的遗传信息合成具有功能的全长蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构；功能相同，据此推测该抑制性tRNA可以携带氨基酸至核糖体并与终止密码子碱基配对使翻译过程继续。

（3）本实验目的是比较携带不同氨基酸的sup-tRNA的通读效果；需要保证实验组细胞含有突变IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶对实验结果产生干扰），同时保证在不同的实验组细胞中可以转录出携带不同中氨基酸的sup-tRNA，因此实验组中受体细胞中应该含有导入携带不同氨基酸的sup-tRNA基因和突变IDUA基因。若要判断各个实验组细胞中携带不同氨基酸的sup-tRNA是否成功诱导了具有功能的IDUA酶，可以采用该酶的特异性抗体对其进行检测，即进行抗原-抗体杂交。分析题图可知，与对照组（含正常IDUA基因的组）相比，含携带酪氨酸的sup-tRNA的受体细胞中表达的全长IDUA蛋白量比其他实验组都多，说明其能有效恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上实验可知，携带酪氨酸的sup-tRNA能有效诱导核糖体对突变IDUA基因转录出的mRNA进行通读，进而产生具有正常功能的IDUA酶，因此利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA突变基因纯合小鼠相比，治疗组小鼠的IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；同时，利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA基因敲除小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，则其细胞内都没有相应mRNA，因此携带酪氨酸的sup-tRNA无法发挥作用，最终导致治疗组与不治疗组的IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异。【解析】(1)替换减少。

(2)识别终止密码子并携带氨基酸至核糖体使翻译过程继续。

(3)携带不同氨基酸的suptRNA基因和变IDUA抗原一抗体杂交恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突变基因纯合小鼠IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异六、综合题(共2题，共12分)22、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作步骤为：获取目的基因；形成重组DNA分子、将重组DNA分子导入受体细胞、筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达。

【详解】

（一）

（1）果胶是植物细胞壁的主要成分；利用果胶酶水解果胶，可以提高新鲜果渣的出汁率。黑曲霉；苹果青霉等都可用于生产果胶酶。果胶由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯组成，在果胶酶和果胶甲酯酶的作用下，最终被水解成半乳糖醛酸。

（2）利用光电比色法测量果汁中的果胶含量；OD值越低，