化妆品 抗热老化活性的评价 秀丽线虫法-征求意见稿_第1页
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1化妆品抗热老化活性的评价秀丽线虫法材料与试剂、实验仪器与设备、实验步骤、实验T/GDCA013—2022化妆品抗氧化活性的评价秀丽线T/GDCA033—2023化妆品抗羰基化活性的评价秀3.1热老化Antithermalaging基质金属蛋白酶过度降解细胞基质，造成胶原蛋白和弹性3.24检测原理HSP-16.2蛋白是分子量为16kd的小分子热休克蛋白（sHS绿色荧光蛋白报告基因（GFP）偶联的hsp16.2启动子，具有与HSP16.2相同的表达模式），测定化妆品5.2.1除非另有说明，化学试剂使用符合国家标准的分析纯试剂。25.2.2培养基与试剂配制按T/GDCA033—2023的规定进行实验。422PO4磷酸氢二钾（K2HPO4）、磷酸氢二钠十二水（Na27.2样品性调整前处理方法，具体按T/GDCA013—202称取0.001g虾青素于2mL离心管中，加入558μL二甲基亚砜。将离心管超声30min后置于80℃水浴取E.coliOP50菌液和虾青素母液按98:2比例混合均匀，用移液枪吸取150μL菌液轻缓地打在每个8.2预测试8.3线虫抗热老化测定收集繁殖期TJ375线虫用于同期化。将同期化的幼虫转移到含/不含药物的NGM上作用48h后暴露于片上，每个处理组挑选至少30条线虫转移至左旋咪唑液滴中以麻醉线虫至无任何反应，拍摄在激发/发9结果评价3采用ImageJ软件对图像中线虫荧光强度进行相对定量分析，得到各组荧光强度值。采用GraphPadPrism软件绘制柱状图，t-test在实验满足有效性的基础上，样品组荧光强度值显著低于空白组（p＜0.05说明该受试物在该浓度下，能下调热应激线虫的HSP16.2蛋白表达，保护线虫免受热应激损伤，可作为抗热老化活性评虾青素得到稳定的数据，以确保实验模型的成功若阳性对照组的线虫荧光强度值未显著低于空白组，则该次实验视435℃条件下TJ375线虫荧光图像见A.1，TJ375线虫荧光强度的相对定量分析见图A5[1]JinYoungSeo,JinHoChung.elegans,Food&Fuction,2021,12:9098-9110.smallheat-shockproteinSocietiesforExperimentalBiologycomplexity.JBiolChem.2019,294(6):2121-2132.Caenorhabditiselega

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