2025年浙教版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

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①人类从来没有接触过这种致病菌②无药可医③具有某种易感基因的民族容易感染，而施放国的人却不易感染A.①B.②C.②③D.①②3、引发伦理问题的生物技术主要包括（）

①试管婴儿②设计试管婴儿③基因身份证④转基因生物A.①②B.②③C.①②③④D.④4、下列关于蛋白质工程的说法，正确的是（）A.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作B.蛋白质工程能生产出自然界中不存在的新型蛋白质分子C.对蛋白质的改造是通过直接改造相应mRNA来实现的D.蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的5、20世纪70年代以后，一大批生物技术成果进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用；甚至利用分子遗传学等知识和技术把改造生命的幻想变成现实；生物技术的发展在造福人类的同时也可能带来潜在的危害。下列有关生物技术的安全性与伦理问题描述正确的是（）A.将目的基因导入叶绿体基因组可以有效地防止目的基因随花粉扩散到自然界B.经济、文化和伦理道德观念的不同不会影响人们对转基因技术的看法C.生殖性克隆和治疗性克隆的结果本质是相同的，都会面临伦理问题D.人体不会对转基因技术制造的具有超强传染性和致病性的新型病原体产生免疫反应6、甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲中。相关叙述错误的是（）

A.照光处理的甲青花菜下胚轴细胞中有叶绿体，利于筛选杂种细胞B.流程中A处理可使用纤维素酶和果胶酶，B处理可使用聚乙二醇C.杂种细胞经过外源生长素和赤霉素的诱导，直接再分化成为杂种植株D.杂种植株含有控制甲青花菜优良性状的基因，并能通过父本进行传递评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)7、下图是快速RT-PCR过程示意图；①和②为逆转录酶催化的逆转录过程，③是PCR过程。据图分析下列说法错误的是（）

A.逆转录酶具有DNA聚合酶能力B.③PCR过程只需要引物bC.RT-PCR不能检测基因表达水平D.RT-PCR可检测新冠病毒等RNA病毒8、下列关于生物技术的安全性及伦理问题的观点，错误的是（）A.应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质B.当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，反对治疗性克隆C.反对设计试管婴儿的原因之一是因为试管婴儿技术属于无性繁殖方式D.生物武器具有传染性强、作用范围广等特点，应严格禁止9、下列关于生物技术的叙述，不正确的是（）A.烟草叶片可离体培养产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖B.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒C.目的基因必须位于重组质粒的起始密码和终止密码之间，才能进行转录D.目的基因与荧光标记的DNA探针进行分子杂交，能形成磷酸二酯键10、下图是胚胎干细胞潜能示意图,相关叙述正确的是()

A.由细胞形态判断,4种细胞中细胞②最可能连续分裂B.胚胎干细胞能分化为各种细胞的实质是基因的选择性表达C.分化得到的各种细胞,功能不同的主要差异是特定蛋白不同D.定向诱导胚胎干细胞分化形成的组织或器官,进行自体移植可避免免疫排斥反应11、在动物细胞培养的过程中，贴壁的细胞不一定都能增殖并形成克隆（单个细胞繁殖形成的细胞群体），而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞，这一特点可用于测定动物细胞的增殖能力。大致流程如下图，相关叙述不正确的是（）

A.出现接触抑制后，细胞克隆停止增殖B.克隆细胞与接种的细胞的遗传信息不一定相同C.胰蛋白酶可使细胞分散成单个利于计数D.需采用固体培养基培养才能形成细胞克隆评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)12、转化的概念：是______进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持______的过程。13、利用DNA和蛋白质等其它成分在___________中的溶解度不同，选择适当的盐浓度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。14、对于DNA的粗提取而言，就是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在__________方面的差异，提取DNA，去除杂质。（人教P54）15、在日常生活中，我们还遇到哪些有关生物技术安全与伦理问题？我们能基于所学生物学知识参与这些问题的讨论吗？尝试举一个实例加以说明______。16、最后检测目的基因是否翻译成______，方法是从转基因生物中提取______，用相应的______进行______。评卷人得分四、实验题(共4题，共36分)17、研究表明生物制剂W对不同种类动物细胞的分裂均有促进作用。有同学设计相关实验来验证这个观点。请根据以下提供的实验材料；完善该实验步骤，并预测实验结果。

实验材料：培养液；正常肝组织、肝癌组织、W、胰蛋白酶。

（要求与说明：答题时不考虑加入W后的体积变化等误差。提供的细胞均具有分裂能力；只进行原代培养且培养条件适宜）

（1）实验步骤：

①用_________分别处理正常肝组织和肝癌组织获得分散的细胞。将两种分散的细胞加入培养液中制成两种细胞悬液。培养液需要中加入__________等营养物质和__________用以灭菌。

②在显微镜下用_____________直接计数两种细胞悬液中细胞的数量；并进行记录。

③取灭菌后的培养瓶若干个均分为A、B两组，A组加入正常肝细胞悬液；B组加入_________。从A、B组中各取出一半培养瓶作为C、D组，分别加入_________。放入动物细胞培养箱在适宜条件下培养。

④各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，每组取部分样品，加入_____________后摇匀；在显微镜下计数并记录细胞数量。

⑤重复④若干次。

⑥统计并分析所得数据。

（2）预测实验结果（用坐标系和曲线示意图表示）_____________18、［生物——选修1生物技术实践］

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基；灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。

（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了___________________和___________________。除此之外，培养基还必须含有基本成分是___________________和___________________。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是___________________。

（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于___________________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种___________________作为对照进行实验。

（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有___________________种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越___________________。

（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐___________________细菌，这种培养基被称为___________________。19、科学家的发现给人类的生活带来了无限的想象；他们采集了某深海海域的沉积物样品，分离；鉴定得到其中的深海放线菌，以期获得具有前景的抗生素替代品。据此回答下列问题：

(1)研究人员欲筛选出深海放线菌进行研究，取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后取菌液通过_______________法接种到高氏一号（加数滴质量分数为10%的酚）培养基表面以获得单菌落。

(2)通过PCR技术扩增分离得到的放线菌的16SrRNA基因可进行菌株的种属鉴定。PCR技术中起关键作用的酶是_____________。该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR产物一般可通过_________________鉴定。

(3)科学家还将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中。2~3周后，这些细胞显示出ES细胞的形态、具有活跃的分裂能力，它们就是iPS细胞。在这个实验过程中，逆转录病毒的作用是_______________如何证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用？请写出实验设计思路______________20、黏多糖贮积症是由IDUA基因突变导致的遗传病。科研人员对此病的治疗进行相关研究。

(1)黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因由于碱基对___________造成突变，转录出的mRNA长度不变但提前出现终止密码子，最终导致合成的IDUA酶分子量___________；与正常IDUA酶的空间结构差异显著而失去活性，积累过多的黏多糖无法及时清除，造成人体多系统功能障碍。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构、功能相同，但它的反密码子可以与终止密码子配对。在上述这一类突变基因的翻译过程中，加入sup-tRNA可以发挥的作用是___________；从而诱导通读获得有功能的全长蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以携带不同氨基酸；为比较它们的通读效果，科研人员进行了相关研究，实验结果如图。

注：“-”代表未加入。

据图分析，实验组将___________基因导入受体细胞，并采用___________技术检测导入基因的表达情况。据结果分析，携带酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人员利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠及IDUA基因敲除小鼠进行治疗，检测肝脏细胞IDUA酶活性和组织黏多糖的积累量，与不治疗的小鼠相比较，实验结果为_____________，表明携带酪氨酸的sup-tRNA可以治疗黏多糖贮积症。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、D【分析】【分析】

检测土壤中细菌总数；可以看出采用的计数方法是稀释涂布平板法进行计数。用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，求平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数。

【详解】

A；由分析可知；至少要涂布3个平板，A错误；

B；由分析可知；至少要涂布3个平板，B错误；

C；由分析可知；至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，C错误；

D；由分析可知；至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，求平均值，D正确。

故选D。2、D【分析】【分析】

1；生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等，把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。

2；生物武器的特点：①单位面积效应大②有特定的伤害对象③具有传染性④危害时间久⑤不易被发现和鉴定⑥使用者本身易受伤害⑦生物武器造价低；技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。

【详解】

利用基因重组技术制造的全新致病菌比一般生物武器的危害性大；是由于人类从来没有接触过这种致病菌，可以让大批受感染者突然发病，而又无药可医，D正确。

故选D。3、B【分析】【分析】

引发伦理问题的生物技术主要包括设计试管婴儿；基因身份证，即涉及人自身的社会地位；家庭观念、两性关系等伦理方面，但不包括转基因生物，试管婴儿等。

【详解】

①试管婴儿可解决不孕不育问题；属于生物技术的正常应用，不会引发伦理问题，是我国的法律所允许的，①错误；

②设计试管婴儿把试管婴儿当作人体零配件工厂；是对生命的不尊重；早期生命也有活下去的权利，抛弃或杀死多余胚胎，无异于“谋杀"，②正确；

③个人基因资讯的泄漏造成基因歧视；势必造成遗传学失业大军；造成个人婚姻困难、人际关系疏远等严重后果，③正确；

④转基因生物不涉及人自身的社会地位；家庭观念、两性关系等伦理方面；是目法律在一定范围内允许利用的，④错误。

B正确；ABD错误。

故选B。4、B【分析】【分析】

蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求．蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质；而基因工程原则上能生产自然界原有的蛋白质．

【详解】

蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。由概念可知：蛋白质工程是在分子水平上对现有蛋白质的基因分子进行操作，A错误；由概念可知：蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子，B正确；对蛋白质的改造是通过直接改造现有蛋白质的基因来实现的，C错误；蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是不完全相同的，D错误。

【点睛】

本题考查蛋白质工程的相关知识，蛋白质工程的原理（实质）是：改造基因．蛋白质工程的过程：（1）根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）；（2）进行基因修饰或基因合成；（3）最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成．因此蛋白质工程生产合成的蛋白质是自然界中不存在的新型蛋白质分子．5、A【分析】【分析】

因为叶绿体与线粒体在细胞质里；受精卵中的线粒体或叶绿体来自卵子，精子里没有，而植物传粉只传精子，卵子不离开本株，进而修改的基因不会被扩散出去。

治疗性克隆；运用克隆技术获得人体早期胚胎，但目的不是将胚胎培育成人，而是为了提取全能性的胚胎干细胞，然后在合适的条件下，使其发育成为人体的任何一个器官，包括大脑；肌肉、血液和神经，这些器官组织将用于医疗。

生殖性克隆：是指出于生殖目的使用克隆技术在实验室制造人类胚胎；然后将胚胎置入人类子宫发育成胎儿或婴儿的过程。

【详解】

A；因为叶绿体在细胞质里；受精卵中的叶绿体来自卵细胞，精子里没有，植物传粉只传精子，卵子不离开母本，所以将目的基因导入叶绿体基因组可以有效地防止目的基因随花粉扩散到自然界，A正确；

B；经济、文化和伦理道德观念的不同会影响人们对转基因技术的看法；B错误；

C；生殖性克隆和治疗性克隆的结果本质是不相同的；生殖性克隆会面临伦理问题，C错误；

D；转基因技术制造的具有超强的传染性和致病性的新型病原体也会引起人体产生免疫反应；D错误。

故选A。6、C【分析】【分析】

植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞；并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。诱导融合的方法：物理法包括离心；振动、电刺激等．化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。

【详解】

A；照光处理的甲青花菜下胚轴细胞中有叶绿体；原生质体融合后具备乙品种细胞质中的可育基因，在题目中的条件下只有杂种细胞能够存活下来，所以有利于筛选杂种细胞，A正确；

B；流程中A为去除细胞壁；可使用纤维素酶和果胶酶分解细胞壁，B过程为诱导原生质体融合，需要用聚乙二醇进行诱导，B正确；

C；杂种细胞经过外源生长素和细胞分裂素的诱导诱导后；需脱分化形成愈伤组织，再分化形成杂种植株，C错误；

D；甲品种控制多种优良性状的基因；为核基因，杂种植物细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，精子中具有一半核基因，能通过父本（精子）进行传递，D正确。

故选C。二、多选题(共5题，共10分)7、B:C【分析】【分析】

据图可知，逆转录酶可以催化以RNA为模板合成cDNA，还可催化以cDNA为模板合成其互补DNA；RT-PCR过程中需要a、b两种引物。

【详解】

A；逆转录酶催化合成DNA；所以具有DNA聚合酶的能力，A正确；

B、③PCR过程需要引物a、b；因为后续的模板链序列既有与靶RNA一致的，也有与cDNA一致的，B错误；

C；RT-PCR可检测基因的转录情况从而推知基因的表达水平；C错误；

D；通过设计RNA的特异性引物进行RT-PCR检测新冠病毒等RNA病毒；D正确。

故选BC。8、B:C【分析】【分析】

1；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。对待转基因技术的利弊；正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。

2；生物武器的特点：单位面积效应大；有特定的伤害对象；具有传染性；危害时间久；不易被发现和鉴定；使用者本身易受伤害；生物武器造价低；技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。

【详解】

A；严格选择转基因植物的目的基因；可避免产生对人类有害的物质，减少人们对转基因食物安全的担忧，A正确；

B；当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验；反对生殖性克隆，但是不反对治疗性克隆，B错误；

C；试管婴儿技术利用了体外受精技术；属于有性繁殖，试管婴儿可以设计婴儿的性别，反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿，C错误；

D；生物武器是指有意识的利用微生物、毒素、昆虫侵袭敌人的军队、人口、农作物或者牲畜等目标；以达到战争目的一类武器，有传染性强、作用范围广等特点，应严格禁止，D正确。

故选BC。9、C:D【分析】【分析】

基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建（核心）；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。细胞工程中用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体和用胰蛋白酶处理动物组织得到单个细胞都采用了酶的专一性原理。诱导原生质体融合和动物细胞融合都采用了生物膜的流动性原理；植物组织培养的原理是细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖。

【详解】

A；由细胞工程原理可知；植物细胞或组织离体培养可以得到植物个体，动物细胞可以进行培养而实现增殖，A正确；

B；细胞工程应用非常广泛；动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒，B正确；

C；基因表达载体构建必须使目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间；这样才能有利于目的基因表达，C错误；

D；DNA分子杂交的原理是碱基互补形成杂交带；不能产生磷酸二酯键，D错误。

故选CD。10、A:B:C:D【分析】【分析】

干细胞：在个体发育过程中；通常把那些具有自我复制能力，并能在一定条件下分化形成一种以上类型的细胞的多潜能细胞称为干细胞。

（1）全能干细胞：如胚胎干细胞；

（2）多能干细胞：如造血干细胞；

（3）专能干细胞：如骨髓瘤细胞；皮肤生发层干细胞。

【详解】

A；由细胞形态判断；①为精细胞，③为肌肉细胞，④为神经细胞，这3种细胞都是高度分化的细胞，所以推测图示4种细胞中细胞②分化程度最低，最可能连续分裂，A正确；

B；胚胎干细胞分化为各种细胞的实质是基因的选择性表达；B正确；

C；分化得到的各种细胞；功能不同的主要差异是特定蛋白不同，C正确；

D；定向诱导胚胎干细胞分化形成的组织或器官；进行自体移植可避免免疫排斥反应，D正确。

故选ABCD。

【点睛】11、D【分析】【分析】

动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】

A；在动物细胞培养的过程中；当出现接触抑制后，细胞克隆停止增殖，A正确；

B；在细胞分裂的过程中；可能会发生基因突变，因此，克隆细胞与接种的细胞的遗传信息不一定相同，B正确；

C；胰蛋白酶可使细胞分散成单个；从而利于计数，C正确；

D；需采用液体培养基培养才能形成细胞克隆；D错误。

故选D。三、填空题(共5题，共10分)12、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因稳定和表达13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不同浓度的NaCL溶液DNA杂质14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】物理和化学性15、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。【解析】在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质蛋白质抗体抗原－抗体杂交四、实验题(共4题，共36分)17、略

【分析】【分析】

1；动物细胞培养的条件：

（1）无菌；无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液；以清除代谢废物；

（2）营养物质：糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等；还需加入血清、血浆等天然物质；

（3）适宜的温度和pH；

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。

2；实验操作步骤的安排一般如下：第一步：取材随机均分为几组；编号；第二步：不同组自变量的处理；第三步：把上述各组放在无关变量相同且适宜等条件下处理一段时间；第四步：观察并记录比较相应的因变量。根据题意可知，本实验的目的是验证生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用，则该实验的自变量是细胞的种类及是否加入生物制剂W，因变量是细胞悬液中细胞的数目，对细胞直接计数可以采用血球板计数法。

【详解】

（1）①动物细胞培养前需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分别处理正常肝组织和肝癌组织获得分散的细胞。将两种分散的细胞加入培养液中制成两种细胞悬液。动物细胞的培养液中需要加入葡萄糖；氨基酸、无机盐、维生素、动物血清；为了保证无菌的条件，一般在培养液中加入一定量的抗生素。

②在显微镜下可以采用血球计数板直接计数两种细胞悬液中细胞的数量；并进行记录。

③本实验的目的是验证生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用；根据题干所给实验材料可知，不同细胞是指正常肝细胞和癌细胞，因此该实验应该设置四组，变量为细胞的种类及是否加入生物制剂W，具体如下：

A组：培养液中加入正常肝细胞悬液；B组：培养液中加入与之等量癌细胞悬液；从A；B组中各取出一半培养瓶作为C、D组；C、D两组：培养液中加入等量的生物制剂W。放入动物细胞培养箱在适宜条件下培养。

④该实验的因变量是计数细胞悬液中细胞的数量；因此各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，每组取部分样品，加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶摇匀，将细胞分散成单个，然后在显微镜下计数。

（2）预测实验结果；若较长时间培养，因为正常细胞的增殖次数有限，故A组中细胞数量最少，由于W促进细胞增殖的作用，因此C组细胞数量多于A组；而癌细胞可以无限增殖，且由于其细胞膜上的糖蛋白减少，易于扩散和转移，同时失去接触抑制，可大量培养增殖，故B；D两组中细胞数量明显更多，且由于W的促进作用，D组多于B组；由于此实验是验证实验，所以实验结果是加入生物制剂W的实验组比对照组细胞数多，同时癌细胞分裂能力比正常细胞高，故绘制坐标曲线具体如下:

【点睛】

本题考查验证实验，要求学生明确实验的目的，正确区分实验的变量，能够根据题意判断自变量和因变量，然后根据设计实验的单一变量和等量原则，同时结合题干所给的实验材料完善实验设计，并能预测实验结果和绘制相关曲线图表示实验的结果。【解析】胰蛋白酶（胶原蛋白酶）葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清抗生素血球计数板等量肝癌细胞悬液等量生物制剂W胰蛋白酶（胶原蛋白酶）18、略

【分析】【详解】

微生物生长繁殖过程中需要氮源、碳源、水分、无机盐等营养物质，有些微生物还需要生长因子；培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌，该过程一般在高压蒸汽灭菌锅中进行；影响微生物生长繁殖的因素主要是营养和温度，因此培养微生物时除提供适宜的营养外，还要提供合适的温度；为排除无关变量的影响，该实验要设立空白对照，可以用蒸馏水代替样品来进行对照；在培养基中加入食盐可以选择耐盐菌，如金黄色葡萄球菌等，这种培养基叫做选择培养基。【解析】氮源（碳源不作要求）碳源无机盐水高压蒸汽灭菌恒温培养箱无菌水多高盐（或NaCl）选择性培养基19、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

【详解】

（1）分析题意可知；研究人员取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后可通过稀释涂布平板法接种到培养基表面以获得单菌落。

（2）PCR技术是一项通过体外控制温度扩增DNA的技术，该技术中由于温度较高，起关键作用的酶是耐高温DNA聚合酶；PCR扩增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析题意，该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是：引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的；PCR产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定：凝胶中的DNA分子通过染色；可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。

（3）分析题意，科学家将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，该过程中逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞；分析题意，实验目的是iPS细胞的产生不是由于培养基的作用，故实验的自变量是外源基因的有无，因变量是IPS细胞的产生情况，实验设计应遵循对照与单一变量原则，故可设计实验如下：将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用。【解析】(1)稀释涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高温DNA聚合酶引物能与16SrRNA基因特异性结合（引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的）琼脂糖凝胶电泳。