DB22-T 1678-2012 豆芽中4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定 液相色谱-质谱质谱法

ICS67.060DB22DB22/T1678—2012豆芽中4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法Determinationof4-Chlorophenoxyaceticacidinbeansprout——LC-MS/MSmethod吉林省质量技术监督局发布DB22/T1678—2012本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草。本标准由吉林出入境检验检疫局提出并归口。本标准起草单位：吉林出入境检验检疫局技术中心。本标准主要起草人：杨帆、张勋、杨璐、宋清莲、顾婷婷、张代辉。DB22/T1678—2012本标准规定了豆芽中4-氯苯氧乙酸钠残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于豆芽中4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。试料中的4-氯苯氧乙酸钠用稀碱提取后，在酸性条件下用固相萃取柱将其吸附，甲醇洗脱，液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。4试剂材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1氢氧化钠(NaOH)：优级纯。4.2磷酸二氢钠（NaH2PO4·2H2O）：优级纯。4.3磷酸（H3PO4）。4.4甲醇（CH3OH色谱纯。4.5氢氧化钠溶液(0.01mol/L)：准确称取0.40g氢氧化钠（4.1），溶于水并稀释至1000mL。4.650%的磷酸溶液：取100mL磷酸，加水稀释至200mL。4.7磷酸盐缓冲液(0.01mol/L)：称取1.56g的磷酸二氢钠（4.2）加水溶解，并定容至1000mL，用50%的磷酸溶液(4.6)调节pH值至4.0。4.84-氯苯氧乙酸钠（C8H7ClO3Na，4-Chlorophenoxyaceticacid，CAS号：13730-98-8纯度≥99%。4.94-氯苯氧乙酸钠标准溶液储备液（100mg/L）：准确称取适量4-氯苯氧乙酸钠标准物质（4.8）用甲醇溶解并全部转移至100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混匀，0℃~4℃可避光保存6个月。4.104-氯苯氧乙酸钠标准工作液的配制：准确吸取1.0mL标准溶液储备液（4.9）置于100mL容量瓶中用甲醇稀释成1.0mg/L的稀释液，准确吸取该稀释液适量于容量瓶中，用甲醇依次配制成浓度为0.01mg/L、0.02mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L的系列标准溶液。4.11HLB固相萃取柱：6mL/500mg。使用前依次用5mL甲醇、5mL水活化，保持柱体湿润。4.12滤膜：0.22μm，有机系。DB22/T1678—20125仪器5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配备电喷雾离子源（ESI）。5.2高速匀浆机。5.3高速离心机：10000r/min。5.4旋转蒸发仪。5.5天平：感量0.0001g和0.01g。5.6涡旋混合器6试样的制备取有代表样品采用四分法分样后，经粉碎机粉碎，混匀，密封，作为试料，标明标记。7分析步骤7.1提取称取样品10.0g（精确至0.01g）于50mL离心管中，加入20mL0.01mol/L氢氧化钠溶液（4.5用高速匀浆机混匀3min，10000r/min离心3min，上清液转入50mL容量瓶，残渣再分别用15mL、定容至刻度，摇匀，备用。7.2净化将7.1中的提取液加入2mL50%磷酸溶液（4.6），慢速通过已活化的HLB小柱，用2mL0.01mol/L磷酸盐缓冲液（4.7）去杂质,弃去全部流出液，用5mL甲醇洗脱，收集洗脱液在40℃下用氮气吹至近干，用甲醇溶解并定容至2mL，经0.22μm滤膜，供液相色谱-质谱/质谱分析。7.3空白试验除不称取试料外，均按7.1、7.2进行。7.4测定7.4.1色谱参考条件色谱参考条件如下：a)色谱柱：C18色谱柱，150mm×2.1mm（i.d.粒径3.5μm；b)柱温:30℃;;c)流速：0.2mL/min；d)进样量：10μL；e)进样方式：无分流；f)流动相：0.1%甲酸水-乙腈；g)流动相、流速及梯度洗脱条件见表1。DB22/T1678—2012表1流动相、流速及梯度洗脱条件7.4.2质谱参考条件质谱参考条件如下：a)电离方式：电喷雾电离（ESI）；b)扫描方式：正离子扫描，多反应监测（MRMc)去簇电压：-50V；d)离子源温度：550℃;e)雾化气：1.5MPa；f)辅助气：1.5MPa；g)监测离子：见表2。表2目标化合物的监测离子对、去簇电压和碰撞能量νν7.4.3定性分析在同一色谱/质谱条件下进行标准溶液和样品溶液的测定，如果样品溶液中检出的色谱峰的保留时间与标准物质色谱峰的保留时间一致，所选择的两对子离子的质荷比也一致，而且样品定性离子的相对丰度与浓度相当标准工作溶液的定性离子的相对丰度相比较，相对标准偏差不超过表3规定的范围，则可判定样品中存在该物质。标准溶液的多反应监测色谱图参见附录A。表3定性确定时相对离子丰度的最大允许偏差>50%>20%至50%>10%至20%7.4.4定量测定根据试料中被测样液中被测组分的含量情况，选取响应值相近的标准工作液进行分析，对于高浓度样品须适当进行系列稀释。标准工作液和样液中被测组分的响应值均应在仪器线性响应范围内。在上述色谱条件下，4-氯苯氧乙酸钠的参考保留时间为6.68min，外标法定量。8结果的计算和表述DB22/T1678—2012用色谱数据处理机或按公式（1）计算试样中4-氯苯氧乙酸钠残留含量，计算结果需扣除空白值。X=c×V.......................................mX——试料中被测组分残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；c——从标准曲线读出的被测组分溶液浓度，单位为微克每毫升(μg/mLV——样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；m——样液所代表的最终试料的质量，单位为克（g）。计算结果保留两位有效数字。9定量限、回收率、重复性和再现性9.1定量限本方法定量限为0.01mg/kg。9.2回收率样品中4-氯苯氧乙酸钠的添加浓度及其回收率参见附录B。10精密度在重复性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定结果的算术平均值的15%。10.2再现性在再现性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定结果的算术平均值的20%。DB22/T1678—2012（资料性附