临床输血检验技术 课件 项目四 血液成分制备技术

临床输血检验技术项目四血液成分制备技术任务一红细胞制备一、浓缩红细胞学习目标知道浓缩红细胞的概念、保存方法及期限明白浓缩红细胞质量控制项目和要求。浓缩红细胞的概念浓缩红细胞redbloodcells

采用特定的方法将采集到多联塑料血袋内的全血中的大部分血浆分离出后剩余部分所制成的红细胞成分血。

制备方法1、塑料血袋要求双联袋，三联袋均可。2、离心机带温度控制、时间控制和减速装置。离心机要求不小于5000g。3、联袋全血平衡后对称装入离心机中。4、离心条件设置4400g离心5到6分钟，温度2到6摄氏度，刹车5到6挡，在离心开始前应将离心机开机半小时。5、离心机的血液应轻轻拿出，放入分浆或用虹吸方式将血浆分出，又可以使用全自动血细胞分离机将血浆分出。

浓缩红细胞质量控制项目和要求质量控制项目要求外观肉眼观察应无色泽异常、溶血、凝块、气泡等情况；血袋完好，并保留注满全血经热合的导管至少35cm。容量来源于200mL全血：120mL±12mL来源于300mL全血：180mL±18mL来源于400mL全血：240mL±24mL血细胞比容0.65～0.80血红蛋白含量来源于200mL全血：含量≥20g来源于300mL全血：含量≥30g来源于400mL全血：含量≥40g储存期末溶血率＜红细胞总量的0.8%无菌试验无细菌生长浓缩红细胞保存储存温度：2℃～6℃。保存期：含ACD-B、CPD血液保存液的全血保存期为21d；含CPDA-1（含腺嘌呤）血液保存液的全血保存期35d。使用其他血液保存液时，按其说明书规定的保存期执行。

想一想浓缩红细胞制剂的外观和血红蛋白的质量要求是什么？外观肉眼观察应无色泽异常、溶血、凝块、气泡等情况；血袋完好，并保留注满全血经热合的导管至少35cm。血红蛋白含量来源于200mL全血：含量≥20g来源于300mL全血：含量≥30g来源于400mL全血：含量≥40g二、去白细胞浓缩红细胞学习目标知道去白细胞浓缩红细胞的概念、保存方法及期限明白去白细胞浓缩红细胞质量控制项目和要求。去白细胞浓缩红细胞的概念去白细胞浓缩红细胞redbloodcellsleukocytesreduced

使用白细胞过滤器清除浓缩红细胞中几乎所有的白细胞，并使残留在浓缩红细胞中的白细胞数量低于一定数值的红细胞成分血；或使用带有白细胞过滤器的多联塑料血袋采集全血，并通过白细胞过滤器清除全血中几乎所有的白细胞，将该去白细胞全血中的大部分血浆分离出后剩余部分所制成的红细胞成分血。制备方法1、通过白细胞过滤器清除全血中几乎所有的白细胞。2、塑料血袋要求双联袋，三联袋均可。3、离心机带温度控制、时间控制和减速装置。离心机要求不小于5000g。4、联袋全血平衡后对称装入离心机中。5、离心条件设置4400g离心5到6分钟，温度2到6摄氏度，刹车5到6挡，在离心开始前应将离心机开机半小时。6、离心机的血液应轻轻拿出，放入分浆或用虹吸方式将血浆分出，又可以使用全自动血细胞分离机将血浆分出。去白细胞浓缩红细胞保存储存温度：2℃～6℃。保存期：含ACD-B、CPD血液保存液的全血保存期为21d；含CPDA-1（含腺嘌呤）血液保存液的全血保存期35d。使用其他血液保存液时，按其说明书规定的保存期执行。想一想去白浓缩红细胞制剂白细胞残留量有什么要求？白细胞残留量来源于200mL全血：残余白细胞≤2.5×106个来源于300mL全血：残余白细胞≤3.8×106个来源于400mL全血：残余白细胞≤5.0×106个三、悬浮红细胞学习目标知道悬浮红细胞的概念、保存方法及期限明白悬浮红细胞质量控制项目和要求。悬浮红细胞的概念悬浮红细胞（redbloodcellsinadditivesolution）

采用特定的方法将采集到多联塑料血袋内的全血中的大部分血浆分离出后，向剩余物加入红细胞添加液制成的红细胞成分血。制备方法1、塑料血袋要求双联袋，三联袋均可。2、离心机带温度控制、时间控制和减速装置。离心机要求不小于5000g。3、联袋全血平衡后对称装入离心机中。4、离心条件设置4400g离心5到6分钟，温度2到6摄氏度，刹车5到6挡，在离心开始前应将离心机开机半小时。5、离心机的血液应轻轻拿出，放入分浆或用虹吸方式将血浆分出，又可以使用全自动血细胞分离机将血浆分出。6、加入红细胞添加液。悬浮红细胞的保存储存温度：2℃～6℃。保存期：红细胞保存液为ACD-B、CPD的悬浮红细胞保存期为21d。红细胞保存液为CPDA-l或MAP的悬浮红细胞保存期为35d。红细胞保存液为0.9%氯化钠溶液的悬浮红细胞保存期为24h。使用其他血液保存液时，按其说明书规定的保存期执行。

想一想悬浮红细胞制剂的外观和比容的质量要求是什么？外观肉眼观察应无色泽异常、溶血、凝块、气泡等情况；血袋完好，并保留注满全血经热合的导管至少35cm。容量标示量（mL）±10%四、去白细胞悬浮红细胞学习目标知道去白细胞悬浮红细胞的概念、保存方法及期限明白去白细胞悬浮红细胞质量控制项目和要求。去白细胞悬浮红细胞的概念去白细胞悬浮红细胞使用白细胞过滤器清除悬浮红细胞中几乎所有的白细胞，并使残留在悬浮红细胞中的白细胞数量低于一定数值的红细胞成分血；或使用带有白细胞过滤器的多联塑料血袋采集全血，并通过白细胞过滤器清除全血中几乎所有的白细胞，将该去白细胞全血中的大部分血浆分离出后，向剩余物内加入红细胞添加液制成的红细胞成分血。制备方法1．使用白细胞过滤器滤除悬浮红细胞中几乎所有的白细胞；2．使用去白细胞塑料采血多联袋采集全血，经过去白细胞滤器滤出白细胞后，制备成去白细胞悬浮红细胞，制备方法同悬浮红细胞的制备。

1．肉眼观察应无黄疸、气泡、重度乳糜。2．悬浮红细胞的容量应为标示量±10%。3．全血采集后应在两天内（采集后第二天开始计算）过滤滤除白细胞。注意事项去白细胞悬浮红细胞质量控制项目和要求

质量控制项目要求外观肉眼观察应无色泽异常、溶血、凝块、气泡等情况；血袋完好，并保留注满全血经热合的导管至少35cm。容量标示量（mL）±10%血细胞比容0.45-0.60白细胞残留量来源于200mL全血：残余白细胞为≤2.5×106个；来源于300mL全血：残余白细胞为≤3.8×106个；来源于400mL全血：残余白细胞为≤5.0×106个血红蛋白含量来源于200mL全血：含量≥18g来源于300mL全血：含量≥27g来源于400mL全血：含量≥36g储存期末溶血率＜红细胞总量的0.8%无菌试验无细菌生长去白细胞悬浮红细胞的保存储存温度：2℃～6℃。保存期：红细胞保存液为ACD-B、CPD的悬浮红细胞保存期为21d。红细胞保存液为CPDA-l或MAP的悬浮红细胞保存期为35d。红细胞保存液为0.9%氯化钠溶液的悬浮红细胞保存期为24h。使用其他血液保存液时，按其说明书规定的保存期执行。

五、洗涤红细胞学习目标知道洗涤红细胞的概念、保存方法及期限明白洗涤红细胞质量控制项目和要求。洗涤红细胞的概念洗涤红细胞（washedredbloodcells）

采用特定的方法将保存期内的全血、悬浮红细胞用大量等渗溶液洗涤，去除几乎所有血浆成分和部分非红细胞成分，并将红细胞悬浮在氯化钠注射液或红细胞添加液中所制成的红细胞成分血。制备方法1

待用洗涤溶液联袋提前放置冷藏保存，无破损渗漏，溶液外观正常，在有效期内。2

将合格的红细胞悬液用作制备洗涤红细胞悬液的起始血液，无破损渗漏，血液外观正常，在有效期内。3

使用无菌接合机将待洗涤的红细胞悬液袋导管和洗涤溶液联袋进行无菌接合连通。4

将洗涤溶液移至红细胞袋内，每单位红细胞（1个单位红细胞是指200ml全血制备的红细胞）中加入的液体量约为100ml，夹紧导管，混匀。制备方法5

按照制备红细胞的离心程序进行离心操作。6

离心后将血袋取出，避免震荡，垂直放入分浆夹中，把上清液转移至空袋内，夹紧导管。7

重复3.10.4～3.10.6步骤，洗涤3次。8

将适量（每单位红细胞中加入约50ml）保存液（生理盐水或红细胞保存液）移入已完成洗涤的红细胞，混匀。9

热合，贴签，入库。洗涤红细胞质量控制项目和要求

质量控制项目要求外观肉眼观察应无色泽异常、溶血、凝块、气泡等情况；血袋完好，并保留注满全血经热合的导管至少20cm。容量200mL全血或悬浮红细胞制备的洗涤红细胞容量为：125mL±12.5mL300mL全血或悬浮红细胞制备的洗涤红细胞容量为：188mL±18.8mL400mL全血或悬浮红细胞制备的洗涤红细胞容量：250mL±25mL上清蛋白质含量来源于200mL全血：含量＜0.5g来源于300mL全血：含量＜0.75g来源于400mL全血：含量＜1.0g血红蛋白含量来源于200mL全血：含量≥20g来源于300mL全血：含量≥30g来源于400mL全血：含量≥40g储存期末溶血率＜红细胞总量的0.8%无菌试验无细菌生长悬浮红细胞的保存

储存温度：2℃～6℃。

保存期：添加液为0.9%氯化钠溶液的洗涤红细胞保存期为24h。在密闭系统中洗涤且最后以红细胞保存液混悬，洗涤红细胞保存期与洗涤前的红细胞悬液相同。想一想洗涤红细胞制剂的外观和容量的质量要求是什么？外观肉眼观察应无色泽异常、溶血、凝块、气泡等情况；血袋完好，并保留注满全血经热合的导管至少20cm。容量200mL全血或悬浮红细胞制备的洗涤红细胞容量为：125mL±12.5mL300mL全血或悬浮红细胞制备的洗涤红细胞容量为：188mL±18.8mL400mL全血或悬浮红细胞制备的洗涤红细胞容量：250mL±25mL六、冰冻红细胞与冰冻解冻去甘油红细胞学习目标知道冰冻红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞的概念、保存方法及期限。明白冰冻解冻去甘油红细胞质量控制项目和要求。冰冻红细胞的概念冰冻红细胞（frozenredbloodcells）

采用特定的方法将自采集日期6d内的全血或悬浮红细胞中的红细胞分离出，并将一定浓度和容量的甘油与其混合后，使用速冻设备进行速冻或直接置于-65℃以下的条件下保存的红细胞成分血。制备方法红细胞甘油化1

取拟冰冻保存的全血或悬浮红细胞，离心去除上清液，用无菌接合技术将红细胞转移至容量适当的、适宜于冰冻保存的转移袋内。2

在无菌条件下，缓慢滴加复方甘油溶液至红细胞袋内，边加边振荡，使其充分混匀。3

在室温中静置平衡30分钟，置-65℃以下保存。冰冻解冻去甘油红细胞的概念冰冻解冻去甘油红细胞（deglycerolizedredbloodcells）

采用特定的方法将冰冻红细胞融解后，清除几乎所有的甘油，并将红细胞悬浮一定量的氯化钠注射液中的红细胞成分血。制备方法解冻去甘油从低温冷冻保存箱中取出冰冻红细胞，立即放入37℃～40℃恒温水浴箱中，轻轻振动使其快速融化，直至冰冻红细胞完全解冻。将专用洗涤盐液袋与解冻红细胞袋无菌接合，采取渗透压梯度递减方法洗涤。最后1次的洗涤上清液应无明显溶血迹象。冰冻解冻去甘油红细胞质量控制项目和要求

质量控制项目要求外观肉眼观察应无色泽异常、溶血、凝块、气泡等情况；血袋完好，并保留注满解冻去甘油红细胞经热合的导管至少20cm。容量来源于200mL全血：200mL±20mL来源于300mL全血：300mL±30mL来源于400mL全血：400mL±40mL游离血红蛋白含量≤1g/L血红蛋白含量来源于200mL全血：含量≥16g来源于300mL全血：含量≥24g来源于400mL全血：含量≥32g甘油残留量≤10g/L白细胞残留量来源于200mL全血：含量≤2×107来源于300mL全血：含量≤3×107来源于400mL全血：含量≤4×107无菌试验无细菌生长保存冰冻红细胞：

储存温度：含20%甘油的冰冻红细胞在-120℃以下储存，含40%甘油的冰冻红细胞在-65℃以下储存。

保存期：自采血之日起10年。冰冻解冻去甘油红细胞：

储存温度：2℃～6℃。保存期：添加液为0.9%氯化钠溶液的冰冻解冻去甘油红细胞保存期为24h。冰冻解冻去甘油红细胞在保存期内宜尽早使用。想一想冰冻红细胞解冻后去除甘油的方法？将专用洗涤盐液袋与解冻红细胞袋无菌接合，采取渗透压梯度递减方法洗涤。最后1次的洗涤上清液应无明显溶血迹象。甘油残留量应少于≤10g/L。七、年轻红细胞学习目标知道年轻红细胞的概念及适应症年轻红细胞的制备方法年轻红细胞制备的质量评价指标年轻红细胞的概念年轻红细胞主要由年龄较轻的红细胞(包括网织红细胞)组成。年轻红细胞可用新鲜全血离心分离或血细胞分离机单采所得。滤除白细胞后使用普通输血用离心机和血袋,通过2次离心并手工分离,取上层的红细胞即获得年轻红细胞。

适应症

输用年轻红细胞可明显延长输血间隔时间，其适应证为需长期反复输血的疾病，如地中海贫血、再生障碍性贫血、白血病贫血等。制备方法1、通过白细胞过滤器清除全血中几乎所有的白细胞。2、联袋全血平衡后对称装入离心机中。3、离心条件设置2900g离心10分钟，温度2到6摄氏度。4、离心机的血液应轻轻拿出，放入分浆或用虹吸方式将部分血浆分出（400ml全血分200ml浆）。5、留下的部分血浆与红细胞充分混匀，3500g离心30分钟，温度2到6摄氏度。6、将上层45-50%红细胞分出并加入适量保存液混匀即可（400ml全血制备加入50ml保存液）。评价指标六项评价指标：网织红细胞计数(Ret)天门冬氨酸氨基转移酶(AST)平均体积(MCV)平均血红蛋白浓度(MCHC)白细胞残余量、血红蛋白回收率保存储存温度：

2℃～6℃保存期：含ACD-B、CPD血液保存液的全血保存期为21d；含CPDA-1（含腺嘌呤）血液保存液的全血保存期35d。想一想年轻红细胞的概念及制备方法？年轻红细胞主要由年龄较轻的红细胞(包括网织红细胞)组成。年轻红细胞可用新鲜全血离心分离或血细胞分离机单采所得。

任务二

血小板的制备一、浓缩血小板学习目标知道浓缩血小板的概念、主要制备方法、保存方法及期限。明白浓缩血小板质量控制项目和要求。浓缩血小板是采集后置于室温保存和运输的全血于采集后6小时内，或采集后置于温度为20～24℃保存和运输的全血于24小时内，在室温条件下将血小板分离出，并悬浮于一定量血浆内的成分血。

浓缩血小板的概念对原料全血的要求使用三联以上的采血袋采集血液200mL全血应在5分钟内采完，400mL全血应在10分钟内采完新鲜采集的全血于4～6小时内分离制备方法富含血小板血浆（PRP）法1．一般常用三联袋采血；采血袋为母带，其它两个袋子为子1袋和子2袋；在母袋中装有抗凝剂，子2袋中装有红细胞添加液。2．轻离心：温度为20～24℃，离心力1100g离心5分钟或700g离心10分钟。3．将离心后全血的上层成分即：富含血小板血浆（PRP）分入子1袋中，尽量少携带红细胞。4．将子袋2内的红细胞添加液加入到采血母袋的红细胞内并断离母袋。5．重离心：将装有PRP的子袋1和子袋2一起离心。温度为20～24℃，离心力3750g，离心6分钟，或3000g离心20分钟，使血小板沉淀于袋子的底部。6．将上层乏血小板血浆（PPP）分入子袋2中，留下20～30mL(200mL全血制备)或50mL～70mL（400mL全血制备）血浆于血小板中，即为浓缩血小板，此种方法大约可获得全血中60%以上的血小板。7．由于第二次重离心，此时的血小板处于沉淀聚集状态，必须重新悬浮才可用于临床，需先在温度为20～24℃，环境下静置1～2小时，使其自然解聚后，轻轻摇动血袋成为均匀混悬悬液。制备方法富含血小板血浆（PRP）法（1）采血要顺利；（2）采血后原料全血应放置在20～24℃或室温条件下；（3）影响血小板数量的关键是第一次离心条件，应根据不同的离心机来设置最佳的离心条件；（4）避免混入过多的红细胞和白细胞。大量的红细胞和白细胞可以使血小板在保存期间pH值下降；（5）第二次重离心后重新悬浮血小板时应轻轻摇动，避免血小板发生不可逆聚集。制备时的注意事项制备方法挤白膜法挤白膜法制备血小板的条件血袋要求及品牌：四联袋血小板专用袋（有透气功能）离心机要求：大型低温离心机时间要求：采血2小时内开始制作，6小时内完成制作存储条件：20℃~24℃震荡保存72小时制备方法挤白膜法1．重离心：温度为20～24℃，离心力2100g，离心14分钟。2．分浆：将离心后的采血母袋上层血浆分入到子1袋中，将白膜（BC）层（含有红细胞白细胞和血小板）分入到子2袋中，在从子1袋中分出适量血浆到子2袋中；将子3袋内的红细胞添加液挤入到母袋内制成悬浮红细胞并断离母袋。3．轻离心：将子2袋和子3袋一起离心。温度为20～24℃，离心力280g，离心10分钟。4．将子2袋上层的悬液分入到子3袋中即为浓缩血小板悬液。制备方法机分法1．将全血采集于四联袋主袋内。2．将400mL全血放入离心机，20～24℃、2100g离心14分钟。3．开启血细胞分离机的电脑，启动分离血小板的程序，按仪器操作说明进行。4．分离结束后，设备自动热合，同时取下富有血小板层挤入2号转移袋进行第二次离心，20～24℃、280g离心10分钟。5．将第二次离心的血袋置于悬挂架上，进行分离，取下分离好的血小板，热合称重，一般约80～90mL。浓缩血小板质量控制项目和要求质量控制项目要求外观肉眼观察应呈黄色云雾状液体，无色泽异常、蛋白析出、气泡及重度乳糜等情况；血袋完好，并保留注满血小板经热合的导管至少15cm容量来源于200ml全血：容量为25mL～38mL；来源于300ml全血：容量为38mL～57mL；来源于400mL

全血：容量为50mL～76mL储存期末pH6.4-7.4血小板含量来源于200mL全血：含量为≥2.0×1010个；来源于300mL全血：含量为≥3.0×1010个；来源于400mL

全血：含量为≥4.0×1010个红细胞混入量来源于200mL全血：混入量为≤1.0×109个；来源于300mL全血：混入量为≤1.5×109个；来源于400mL

全血：混入量为≤2.0×109个无菌试验无细菌生长浓缩血小板的保存储存温度：

20～24℃，并持续轻缓振摇。保存期：储存于普通血袋时保存期为24小时，储存于血小板专用血袋时保存期为5天；当密闭系统变为开放系统，保存期为6小时，且不超过原保存期。当无专用血小板保存设备进行持续轻缓震摇时，保存期为24小时，且不超过其原保存期。

想一想富含血小板血浆（PRP）法制备时应注意的问题是什么？二、混合浓缩血小板学习目标知道混合浓缩血小板的概念、保存方法及期限及质量控制项目和要求。混合浓缩血小板的概念浓缩血小板是指采用特定的方法将2袋或2袋以上的浓缩血小板合并在同一血袋内的成分血。一般混合5～7袋浓缩血小板可达到1个机采的治疗量。混合浓缩血小板质量控制项目和要求质量控制项目要求外观肉眼观察应呈黄色云雾状液体，无色泽异常、蛋白析出、气泡及重度乳糜等情况；血袋完好，并保留注满血小板经热合的导管至少15cm。容量标示量（ml）±10%储存期末pH6.4～7.4血小板含量≥2.0×1010个×混合单位数红细胞混入量≤1.0×109个×混合单位数无菌试验无细菌生长混合浓缩血小板的保存储存温度：

20～24℃，并持续轻缓振摇。保存期：当数个浓缩血小板汇集到同一个血袋，需保持可追溯性，汇集后保存期为6小时，且不超过原保存期。想一想混合浓缩血小板制剂血小板含量应是多少？三、单采血小板学习目标知道单采血小板对献血者的要求、注意事项及质量控制项目和要求。单采血小板是指使用血细胞分离机在全封闭的条件下自动将符合要求的献血者血液中的血小板分离并悬浮于一定量血浆内的单采成分血。由于单采血小板是从单一个体用全自动血细胞分离机采集而来，通常又称为机采血小板。

单采血小板的概念具有纯度高、质量好等优点，可以从单采献血者体内采集1个或2个成人治疗剂量的血小板（≥2.5×1011

个/袋），而且白细胞残留量低。单采血小板的优点单采血小板对献血者的要求1．外周血血小板计数应≥150×109/L且<450×109/L，预测采后血小板≥100×109/L，血细胞比容≥0.36。血小板计数≥250×109/L且体重>60Kg，可以采集2个治疗剂量的血小板（≥5.0×1011）。单采血小板后，献血者的血小板仍应≥100×109/L。2．单采血小板采集过程需要持续1～1.5小时，要求献血者静脉必须充盈良好。3．献血前一天最好多饮水，当日必须吃早餐，宜清淡饮食，如稀饭、馒头。4．要求献血者在献血前1周不得服用阿司匹林、吲哚美辛（消炎痛）、保泰松、布洛芬、维生素E、双嘧达莫（潘生丁）、氨茶碱、青霉素及抗过敏类药物。5．单采血小板献血间隔不少于2周，一年不超过24次，因特殊配型需要，经医生批准，最短时间不少于1周；单采血小板后与全血献血间隔时间不少于4周；全血献血后与单采血小板献血间隔不少于3个月。制备方法及注意事项献血者全自动细胞分离机血液按比重大小分层血小板收集袋其它红细胞等血液成分回输机采血小板一次采集约200-400ml左右的富含血小板血浆制备方法及注意事项1．采集前需进行血脂检查，血脂过高不能单采。2．在采集过程中工作人员应严密观察机器的工作状态、抗凝剂的滴数及献血者的各种反应，不能离开机器。3．保存期为24小时的单采血小板容量为125～200mL。保存期为5天的单采血小板容量为250～300mL。机采血小板质量控制项目和要求质量控制项目要求外观肉眼观察应呈黄色云雾状液体，无色泽异常、蛋白析出、气泡及重度乳糜等情况；血袋完好，并保留注满血小板经热合的导管至少15cm。容量储存期为24小时的单采血小板容量：125mL～200mL；储存期为5天的单采血小板容量：250mL～300mL储存期末pH6.4-7.4血小板含量≥2.5×1011

个/袋白细胞残留量≤5.0×106

个/袋红细胞混入量≤8.0×109

个/袋无菌试验无细菌生长混合浓缩血小板的保存储存温度：

20～24℃，并持续轻缓振摇。保存期：储存于普通血袋时保存期为24小时，储存于血小板专用血袋时保存期为5天；当密闭系统变为开放系统，保存期为6小时，且不超过原保存期。当无专用血小板保存设备进行持续轻缓震摇时，保存期为24小时，且不超过其原保存期。想一想简述机采血小板的流程？四、去白细胞单采血小板学习目标知道去白细胞单采血小板的概念、质量控制项目和要求。去白细胞单采血小板是指采用血液单采机在全封闭的条件下自动将全血中的血小板分离并过滤去除白细胞后悬浮于一定量血浆内制成的单采成分血。去白细胞单采血小板的概念制备方法去白细胞的方式可以采用滤器和单采的方式。去白细胞单采血小板质量控制项目和要求质量控制项目要求外观肉眼观察应呈黄色云雾状液体，无色泽异常、蛋白析出、气泡及重度乳糜等情况；血袋完好，并保留注满血小板经热合的导管至少15cm。容量储存期为24小时的单采血小板容量：125mL～200mL；储存期为5天的单采血小板容量：250mL～300mL储存期末pH6.4-7.4血小板含量≥2.5×1011

个/袋白细胞残留量≤5.0×106

个/袋红细胞混入量≤8.0×109

个/袋无菌试验无细菌生长去白细胞单采血小板的保存储存温度：

20～24℃，并持续轻缓振摇。保存期：储存于普通血袋时保存期为24小时，储存于血小板专用血袋时保存期为5天；当密闭系统变为开放系统，保存期为6小时，且不超过原保存期。当无专用血小板保存设备进行持续轻缓震摇时，保存期为24小时，且不超过其原保存期。任务三

血浆及冷沉淀凝血因子的制备想一想什么是去白细胞单采血小板？一、血浆学习目标掌握血浆制备的方法，新鲜冰冻血浆和冰冻血浆的区别，及其保存期限。血浆的概念血浆是指抗凝全血经过离心去除细胞有形成分后的淡黄色液体，含水、电解质、激素、蛋白质、凝血因子等。制备方法塑料血袋要求双联袋，三联袋均可。联袋全血平衡后对称装入离心机中，4400g离心5到6分钟，温度2到6摄氏度，刹车5到6挡，在离心开始前应将离心机开机半小时。离心机的血液应轻轻拿出，放入分浆或用虹吸方式将血浆分出，又可以使用全自动血细胞分离机将血浆分出。

血浆的分类新鲜冰冻血浆freshfrozenplasma

采集后储存于冷藏环境中的全血，最好在6小时（保养液为ACD）或8小时（保养液为CPD或CPDA-1）内，但不超过18h将血浆分离出并速冻呈固态的成分血。注：要求全血采集顺畅，200ml采集不超过7分钟，400ml不超过13分钟

新鲜冰冻血浆质量控制项目和要求

质量控制项目要求外观肉眼观察融化后的新鲜冰冻血浆，应呈黄色澄清液体，无色泽异常、蛋白析出、气泡及重度乳糜等情况；血袋完好，并保血袋完好，并保留注满新鲜冰冻血浆经热合的导管至少10cm。容量标示量（mL）±10%血浆蛋白含量≥50g/LⅧ因子含量≥0.7IU/mL

无菌试验无细菌生长血浆的分类单采新鲜冰冻血浆apheresisfreshfrozenplasma使用血细胞分离机在全封闭的条件下自动将符合要求的献血者血液中的血浆分离出并在6h内速冻呈固态的单采成分血。血浆的分类冰冻血浆frozenplasma&frozenplasmacryoprecipitatereduced采用特定的方法在全血的有效期内，将血浆分离出并冰冻呈固态的成分血，或从新鲜冰冻血浆中分离出冷沉淀凝血因子后将剩余部分冰冻呈固态的成分血。

冰冻血浆质量控制项目和要求

质量控制项目要求外观肉眼观察应呈黄色澄清液体，无色泽异常、蛋白析出、气泡及重度乳糜等情况；血袋完好，并保留注满冰冻血浆经热合的导管至少10cm。

容量标示量（mL）±10%血浆蛋白含量≥50g/L无菌试验无细菌生长血浆保存新鲜冰冻血浆-18℃以下保存时间一年普通冰冻血浆-18℃以下保存时间四年想一想新鲜冰冻血浆和冰冻血浆的有何区别？二、冷沉淀凝血因子学习目标掌握冷沉淀凝血因子的概念、质量控制项目和要求、保存期限。冷沉淀凝血因子的概念冷沉淀凝血因子cryoprecipitated

antihemophilicfactor采用特定的方法将保存期内的新鲜冰冻血浆在1℃～6℃融化后，分离出大部分的血浆，并将剩余的冷不溶解物质在1h内速冻呈固态的成分血。制备方法

取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆，置4±2℃冰箱中过夜融化或在4±2℃水浴装置中融化。当血浆基本融化时，取出血浆，在4±2℃的环境下重离心。将大部分上层血浆移至空袋，制成冰冻血浆。将留下的20～30ml血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子。

离心法制备方法

虹吸法将新鲜冰冻血浆袋（A袋）置于4±2℃水浴装置中，另一空袋（B袋）悬于水浴箱外，位置低于血浆袋，两袋之间形成一定的高度落差。血浆融化后，随时被虹吸至B袋中，当融化至剩下40～50ml血浆与沉淀物时，闭合导管，阻断虹吸。将血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子（A袋）。将A袋和B袋（冰冻血浆）热合断离。冷沉淀凝血因子保存-18℃以下保存时间一年想一想来源于200ml全血的冷凝血因子制剂中，纤维蛋白原和Ⅷ因子的含量应为多少？任务四

粒细胞的制备一、手工制备粒细胞学习目标掌握手工制备粒细胞概念、制备方法及保存期限。手工制备粒细胞的概念手工制备粒细胞采用离心取白膜法及沉降法手工制备粒细胞，输注后提高机体抗感染能力。适用：中性粒细胞低于0.5×109/L，并发细菌感染，抗生素治疗48小时无效者。（从严掌握适用症）必须做交叉配合试验ABO血型相同（《临床输血技术规范》）。制备方法1、重离心20-24℃,2475g,15分钟。2、分离出白膜层并加入适量血浆混匀。

注：400ml全血仅能够分离出粒细胞1×109个（正常值：4.0～10.0×109/L），为达到临床治疗剂量，需多人份混合，造成不必要感染机会增多、同种免疫增多并可能导致输血相关性移植物抗宿主病（淋巴细胞多）。大多数血站已不提供该成分血。粒细胞保存白细胞中对临床有治疗价值的主要是中性粒细胞，中性粒细胞是一种短命细胞，离体后的功能很快丧失，至今尚无有效的保存方法。粒细胞保存

20-24℃，保存期24小时，应辐照后使用（分离的粒细胞中都含有一定量的淋巴细胞—免疫活性细胞在体内植活后增殖，导致移植物抗宿主病），且宜尽早使用。二、单采粒细胞学习目标掌握单采粒细胞概念、质量控制项目和要求、保存期限。单采粒细胞的概念单采粒细胞（apheresisgranulocytes）使用血液单采机在全封闭的条件下自动将符合要求的献血者血液中的粒细胞分离出并悬浮于一定量的血浆内的单采成分血。

制备方法采集前献血者口服一定剂量的粒细胞动员剂（皮质类固醇类药物或使用粒细胞集落刺激因子）主要作用于中性粒细胞的增殖、分化和活化，促进成熟细胞向外周血释放。单采粒细胞质量控制项目和要求质量控制项目要求外观肉眼观察应无色泽异常，无凝块、溶血、气泡及重度乳糜出现等情况；血袋完好，并保留注满单采粒细胞经热合的导管至少20cm。容量150mL～500mL

中性粒细胞含量≥1.0×1010个/袋红细胞混入量血细胞比容≤0.15无菌试验无细菌生长粒细胞保存白细胞中对临床有治疗价值的主要是中性粒细胞，中性粒细胞是一种短命细胞，离体后的功能很快丧失，至今尚无有效的保存方法。粒细胞保存

20-24℃，保存期24小时，应辐照后使用（分离的粒细胞中都含有一定量的淋巴细胞—免疫活性细胞在体内植活后增殖，导致移植物抗宿主病），且宜尽早使用。想一想单采粒细胞中，中性粒细胞的含量必须达到多大浓度？任务五辐照血液一、辐照血液的制备学习目标掌握辐照血液的概念、预防TA-GVHD的机制及其保存期限。辐照血液的概念辐照血液使用照射强度为25Gy～30Gy的γ射线对血液制剂进行照射,使血液制剂中的T淋巴细胞失去活性所制成的成分血。冰冻解冻去甘油红细胞和血浆成分不需辐照处理，红细胞成分应在全血采集后14d内完成辐照，经辐照后的血液制剂，其质量控制要求与原血液制剂的要求相同。

辐照原理

利用放射性同位素137Cs衰变中产生的射线穿透有核细胞，直接使细胞核DNA产生不可逆的损伤并干预其正常的修复过程，造成淋巴细胞丧失有丝分裂的活性和停止增殖。经辐照的血液及成分本身不具有放射性，不会对操作者和输血者造成任何放射伤害，是相当安全的。

预防TA-GVHD的机制免疫缺损或免疫抑制的患者不能清除输入血液中的具有免疫活性的淋巴细胞，使其在体内殖活、增殖，将患者的组织器官识别为非己物质，作为靶标进行免疫攻击、破坏，产生一系列的病理综合征，引起TA-GVHD。供者的血液经γ射线照射后，淋巴细胞丧失活性，对受血者组织抗原的刺激不引起反应，不会把受血者组织细胞当靶细胞来攻击，就不会引起TA-GVHD。制备方法辐照剂量的设定：血液制剂的辐照剂量以既能灭活淋巴细胞又能维持其他成分血功能与活力且引起损伤最小为原则，并以被辐照物质的吸收量来计算。吸收量以戈瑞（Gy）为单位，其大小取决于照射量。辐照血液保存1、辐照全血或辐照红细胞2-6℃辐照应在血液采集14天内完成，辐照后保存期为14天，最好尽快输注。2、辐照血小板辐照对血小板功能影响较小，可在其保存期内进行辐照，保存同原制剂，宜尽快输注。3、辐照粒细胞制备后立即辐照并输注，不得保存。想一想血液经γ-射线照射后，哪些细胞会失去活性？对红细胞、血小板有影响吗？二、辐照血液的质量控制学习目标知道辐照血液的质量控制方法。血液辐照质量保证（1）照射剂量：中心剂量定位25Gy，其他部位不低于15Gy。（2）剂量分布：核对中心剂量率，并测定照射物表面的相对剂量分布。137Cs每年1次剂量分布图检测，60Co每半年一次。（3）放射性物质衰变的校正：137Cs每年1次，60Co每季度一次。三、辐照血液的临床应用学习目标知道辐照血液的临床应用。辐照血液的临床应用1、免疫功能严重损害者免疫缺乏或免疫缺陷类疾病、大剂量化疗、急性白血病贫血患者等。2、免疫功能低下者老年人、低体重的新生儿、早产儿等。3、供血者与受血者有亲缘关系者（Ⅰ、Ⅱ级亲属）。4、输血量较大者以及6个月以下的婴儿输血、新生儿溶血病换血等。任务六

造血干细胞的造备技术一、外周血干细胞的采集学习目标掌握造血干细胞的概念，外周血干细胞动员的方式以及外周血干细胞采集的方法。干细胞具有极强的长期自我更新及多项分化潜能。干细胞可以来源于胚胎和胎儿组织，即胚胎干细胞，又称ES细胞，也可来自于出生后的器官和成年个体组织，即成体干细胞。造血干细胞的概念造血干细胞（Hematopoieticstemcells,HSCs）是血液系统中的成体干细胞，是一个异质性的群体，具有长期自我更新的能力和分化成各类成熟血细胞的潜能。它是研究历史最长且最为深入的一类成体干细胞，对研究各类干细胞，包括肿瘤干细胞，具有重要指导意义。造血干细胞的概念造血干细胞移植造血干细胞移植，是患者先接受超大剂量放疗或化疗（通常是致死剂量的放化疗），有时联合其他免疫抑制药物，以清除体内的肿瘤细胞、异常克隆细胞，然后再回输采自自身或他人的造血干细胞，重建正常造血和免疫功能的一种治疗手段。造血干细胞移植干细胞移植异体干细胞移植有血缘关系无血缘关系自体干体细胞移植按移植物种类分类外周血型干细胞移植骨髓移植脐带血型干细胞移植造血干细胞移植自体造血干细胞移植时造血干细胞来源于自身，所以不会发生移植物排斥和移植物抗宿主病，移植并发症少，且无供者来源限制，移植相关死亡率低，移植后生活质量好，但因为缺乏移植物抗肿瘤作用以及移植物中可能混有残留的肿瘤细胞，故复发率高造血干细胞移植异基因造血干细胞移植时造血干细胞来源于正常供者，无肿瘤细胞污染，且移植物有免疫抗肿瘤效应，故复发率低，长期无病生存率（也可以理解为治愈率）高，适应证广泛，甚至是某些疾患惟一的治愈方法，但供者来源受限，易发生移植物抗宿主病，移植并发症多，导致移植相关死亡率高，患者需长期使用免疫抑制剂，长期生存者生活质量可能较差。外周血干细胞采集外周血干细胞动员骨髓抑制性化疗注射造血生长因子诱导法化疗与生长因子联合诱导外周血干细胞采集（《非血缘造血干细胞移植技术管理规范》、《非血缘造血干细胞采集技术管理规范》卫医发〔2006〕253号）注射粒细胞集落刺激因子(G-CSF)5μg/kg/日，5-6天采集外周血干细胞采集采集方式:细胞分离机采集。采集量:造血干细胞悬液50-200ml/人/次，采集次数不超过2次，每次循环处理血量不多于15000ml。当CD34+达到2×106/kg或有核细胞数达到5×108/kg时，不再采集。CD34+细胞中几乎含有所有集落形成细胞、具有多分化潜能的干细胞和未分化的前驱细胞，通过多种方法，可以获得较高纯度的CD34+细胞。想一想什么是造血干细胞？外周血造血干细胞在注射动员剂后几天进行采集？二、脐带血干细胞学习目标知道脐带血干细胞的概念以及脐带血干细胞的优势。脐带血干细胞脐血为产后经过脐带收集胎盘的血液，经研究发现脐血含有较丰富的造血干细胞，细胞更原始、增殖力更强，因此成为继骨髓、外周血后的第三种造血干细胞来源。目前主要开展非血缘的脐血移植。

脐带血干细胞的概念脐带血移植优势①来源丰富。②采集方便，且对产妇及胎儿均无任何损害。③与非血缘骨髓库不同，脐血是以实物的形式保存，应用时不会被供者拒绝。而前者仅以志愿者的血样保存，应用时需进一步行HLA配型，如配型一致，还要征得志愿者的二次同意，从骨髓或外周血，或二者同时进行造血干细胞的抽取或分离。④寻找HLA相合脐血所需时间短，通常为2个月，而寻找HLA相合的非血缘骨髓或外周血造血干细胞需时长，从查询供者至完成移植平均需12个月。⑤脐血中以T淋巴细胞为主的免疫细胞并不成熟，移植后发生急性和慢性移植物抗宿主病(GVHD)的几率低、程度轻。因此对HLA配型的要求可适当放宽，HLA中4个位点相合即可选用。同理，脐血库的规模可远远小于骨髓库，大大降低了建库成本。⑥脐血被各种病毒污染的机会小，移植后患者发生病毒感染的几率低。脐带血移植总量较少，只能用于儿童的干细胞移植。分离、制备、保存的方法与外周血干细胞相近。想一想归纳总结一下：脐带血干细胞的概念及优势。任务七

血液制剂的病毒灭活一、血液制剂病毒灭活的基本要求学习目标掌握血液制剂病毒灭活的基本要求。血液制剂的病毒灭活随着检测技术的进步和血液管理措施的完善，因输血导致病毒感染的几率已经大大降低了，但目前的病毒检测技术也存在以下局限：

1、感染早期，病毒血清标志物出现以前，现行的检测方法不能将病毒检出；

2、由于技术、时间与费用的限制，病毒检测的种类是有限的；

3、病毒变异以及不断发现的新病毒。

有些不常见的病毒如人类T淋巴细胞白血病病毒（HTLV）、西尼罗病毒（WNV）、EB病毒等在大多数国家均未被列入血液常规检测，仅仅依靠献血者筛选和血液检测不可能完全杜绝输血相关的病毒感染。

由于我国人群中肝炎病毒携带者所占比例明显高于发达国家，输血传播肝炎病毒的风险亦会相应增高，个别地区输血传播HBV的风险甚至高达1:9000血液制剂的病毒灭活各省、自治区、直辖市药品监督管理局：

为防止肝炎、艾滋病等血源性传播疾病随血液制品的应用而传播，保证临床使用安全，我局组织有关单位和专家制定了《血液制品去除／灭活病毒技术方法及验证指导原则》，现予印发，请遵照执行并转发至辖区内各有关单位。