检验科尿素测定标准操作规程

玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-019版本/修订号：C/0主题内容生化室作业指导书生效日期：20110701第4页共4页编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林华2011-07-01尿素测定标准操作规程1检验申请单独检验项目申请：血清尿素测定(缩写UREA)；组合项目申请：肾功能测定。临床医生根据需要提出检验申请。标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定1天，普通冰箱中（2～8已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。2.3.2不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。3方法原理酶连续监测法。标本中的尿素经过如下两步反应，尿素＋H2O2NH3＋CO2NH3＋α-酮戊二酸＋NADH＋H+谷氨酸＋NAD+＋H2O最后使在340nm波长有吸收峰的NADH，转化为无光吸收的NAD+，其吸光度下降的速率（A/min）与待测样品中尿素的含量成正比。4试剂及其他用品4.1试剂：尿素测定试剂盒（货号BU6121），由北京利德曼生化股份有限公司出品。试剂盒保存：未启封试剂盒在2～8℃保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定7天。4.3试剂盒准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备。4.4试剂盒主要成分：α-酮戊二酸15mmol/L，NADH0.18mmol/L，脲酶>1kU/L，GLDH>5.4kU/L。校准品与校准模式5.1校准液：Beckman-CoulterSYNCHRONLXMULTI校准液（P/N442600），其浓度可溯源至美国国家标准技术研究所（NIST）标准参考材料。5.2校准类型和校准点数目：线性模式，1个校准点。5.3校准周期：校准间隔时间不限。但在：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后，进行一次校准。5.4校准液重建方法：Beckman-CoulterSYNCHRONLXMULTI校准液即开即用，无需特殊准备。6质控品与室内质控规则6.1质控品采用由Beckman-Coulter公司提供的两个不同水平未定值质控血清。6.2质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。6.3质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。6.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。6.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7适用仪器适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器。8标本检测步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。9主要分析参数参见说明书。10结果计算尿素浓度（mmol/L）=×校准液尿素浓度(mmol/L)仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。11检验结果的报告及范围11.1结果的报告11.1.1结果经审核后，确认准确无误后发出报告。11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2报告范围0～33.7mmol/L，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12操作性能12.1精密度：批内CV<4.0%；批间CV<5%左右。12.2线性范围：0～33.7mmol/L。12.3方法的有限性及干扰因素：血氨升高可使本法检测结果偏高，溶血样品对测定亦有干扰。13参考范围及医学决定水平血清：2.9-7.1mmol/L；14临床意义14.1尿素是人体蛋白质代谢的终末产物，分子量小，血浆中的尿素可全部从肾小球滤过，但约有1/3又被肾小管重吸收入血。14.2常将血尿素浓度作为反映肾功能的指标。但尿素只在一定程度上反映肾小球的滤过率（GFR），对早期较轻微的肾功能受损不灵敏。14.3评价血液尿素浓度时应注意血尿素浓度在一定程度上受饮食中的蛋白质含量的影响，如果饮食中的蛋白质含量较高，且组织分解时蛋白代谢率增加，血尿素也有一定程度的增高。14.4除婴儿、孕妇以及低蛋白高糖饮食者外，血尿素浓度降低常见于肝功能衰竭患者。15结果审核以及分析与相关项目的联系15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3相关项目：审核与血肌酐、其他反映肾功能的指标如CysC等的关系。如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16威胁生命的“紧急值”及报告规定暂无规定。17有关引用程序与文件17.1Abbott自动生化分析仪仪器标准操作规程。17.2生化检验室内质控标准操作程序。17.3检验结果审核程序。17.4标本送检和接收程