TCIRA 58-2023 白纹伊蚊规模化辐照雄性不育技术要求

白纹伊蚊规模化辐照雄性不育技术要求发布IT/CIRA58—2023 Ⅲ1范围 12规范性引用文件 1 14辐照前要求 25辐照处理要求 26辐照不育关键指标 27辐照管理 2附录A(资料性)辐照不育关键指标的计算方法 4Ⅲ1T/CIRA58—2023白纹伊蚊规模化辐照雄性不育技术要求本文件规定了X射线对白纹伊蚊(Aedesalbopictus)雄蚊进行规模化辐照不育的技术要求，包括辐本文件适用于对规模化饲养的白纹伊蚊雄蚊进行辐照不育，对规模化饲养的埃及伊蚊(Aedesae-gypti)、致倦库蚊(Culexquinquefasciatus)和斯氏按蚊(Anophelesstephensi)等雄蚊进行辐照不育，参照使用。2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.2通过整个地区饱和式释放不育昆虫来减少田间同一种昆虫种群密度的有害生物防制方法。规模化饲养mass-rearing3.7在工厂条件下按照蚊虫的生长发育过程来大规模饲养蚊虫。为达到灭活病毒目的所需要的最低吸收剂量，即工艺剂量下限值。诱导绝育强度inducedsterility正常雌蚊与绝育雄蚊交配后，抑制雌蚊产下的蚊卵成功孵化变成幼虫的效率。辐照诱导雄蚊≥99%绝育强度的最低有效剂量。经辐照处理而不能繁殖的雄性成蚊。23.8竞争交配力指数malematingcompetitivenessindex辐照绝育雄蚊与正常雄蚊竞争交配正常雌蚊的能力。4辐照前要求4.1.1取2日龄～3日龄的白纹伊蚊雄蚊置于温度(10±2)℃、相对湿度70%±10%的冷库中，待雄蚊冻麻后，收集、称重并分装到培养皿中。直径为100mm的培养皿约放4.8g～6.0g(约4000只~5000只)雄蚊。5辐照处理要求5.2设定最低有效辐照不育剂量为(60±2)Gy,辐照处理的剂量率应≥7.0Gy/min。该剂量通过两次辐照累积获得，单次辐照时间的设置以达到最低有效辐照不育剂量的50%为宜。5.3将装有雄蚊的辐照杯从冷库中取出，每2个辐照杯叠放固定，置于辐照腔体内的旋转台上。首次6辐照不育关键指标辐照雄蚊的飞行率应≥85%。计算方法见附录A的公式(A.1)。辐照雄蚊诱导绝育强度应≥99%。计算方法见公式(A.2)和公式(A.3)。辐照雄蚊的竞争交配力指数应≥0.7。计算方法见公式(A.2)和公式(A.4)。7辐照管理37.2每批次的包装应贴上含有辐照批次、辐照日期、辐照剂量等信息的标签，并保留7.3将包装好的辐照雄蚊存放在冷库中，待后续进行野外释放。7.4从事辐照人员应严格遵守工厂辐照管理制度。4T/CIRA58—2023(资料性)辐照不育关键指标的计算方法A.1飞行率随机挑选7.3辐照雄蚊，记录雄蚊总数N。将雄蚊转移至室温，立即放在直径12cm和高度60cm的测试筒底部。约30min,用盖子盖住测试筒，记录仍停留在测试筒的雄蚊数量n。辐照雄蚊飞行率Fb(%),按公式(A.1)计算。…………(A.1)A.2诱导绝育强度随机挑选7.3辐照雄蚊100只，转移至室温并置于30cm×30cm×30cm的笼子，再放入100只未经交配、未经辐照的1日龄～2日龄雌蚊。同时设定对照组100只未经辐照雄蚊与100只未经交配、未经辐照雌蚊。所有笼子中成蚊饲喂10%的葡萄糖溶液。6d~7d后，给雌蚊提供血餐。喂血结束2d后，将带有湿润滤纸的塑料杯放入笼中，收集蚊卵2d~3d。蚊卵取出后，重复1次喂血及收集蚊卵。取出的蚊卵干燥7d,然后孵化1d。分别记录两次蚊卵总数N₁,两次孵化幼虫数n₁。蚊卵的孵化率H(%),按公式(A.2)计算。将雌蚊与未辐照雄蚊交配后产下蚊卵的孵化率记为H₀,与绝育雄蚊交配后产下蚊卵的孵化率记为Hs。诱导绝育强度IS(%),按公式(A.3)计算。A.3竞争交配力指数随机挑选7.3辐照雄蚊30只，转移至室温并置于30cm×30cm×30cm的笼子，然后再按照1:1比例放入30只未经辐照雄蚊。约3h～4h后，再放入30只未经交配、未经辐照的1日龄～2日龄雌蚊，记为竞争交配组(30只辐照雄蚊：30只未经辐照雄蚊：30只未经交配、未经辐照雌蚊=1:1:1)。按照相似的方法，设定可育交配对照组(30只未经辐照雄蚊：30只未经交配、未经辐照雌蚊=1:1)、不育交配对照组(30只经辐照雄蚊：30只未经交配、未经辐照雌蚊=1:1)。所有笼子中成蚊饲喂10%的葡萄糖溶液。6d~7d后，给雌蚊提供血餐。喂血结束2d后，将带有湿润滤纸的塑料杯放入笼中，收集蚊卵2d～3d。蚊卵取出后，重复1次喂血及收集蚊卵。取出的蚊卵干燥7d,然后孵化