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文档简介
2025年河南省遂平中学高三(下)月考试卷(二)生物试题注意事项:1.答卷前,考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号和座位号填写在试题卷和答题卡上。用2B铅笔将试卷类型(B)填涂在答题卡相应位置上。将条形码粘贴在答题卡右上角"条形码粘贴处"。2.作答选择题时,选出每小题答案后,用2B铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑;如需改动,用橡皮擦干净后,再选涂其他答案。答案不能答在试题卷上。3.非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答,答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上;如需改动,先划掉原来的答案,然后再写上新答案;不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答无效。4.考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后,请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1.红海榄是一种海岸滩涂植物,研究人员分别用不同浓度的镉盐和钙盐处理红海榄一段时间后,测定其净光合速率和气孔导度(即气孔开放程度)的变化,结果如图,下列说法错误的是()A.实验证明,一定范围内随着镉浓度增大,红海榄的CO2吸收速率降低B.811mg/L的钙盐会增强镉盐对红海榄净光合速率的抑制作用C.在相同且适宜光照和温度下,镉浓度5mg/L、钙浓度411mg/L时,红海榄叶肉细胞中ATP、NADPH的产生速率大于镉浓度1.5mg/L、钙浓度1mg/L时的产生速率。D.红海榄对土壤中铜、镉、汞等重金属的吸收能力不同,根本原因是基因的选择性表达2.关于组成细胞的元素和化合物的叙述,正确的是()A.淀粉、糖原、蔗糖的基本组成单位都是葡萄糖B.细胞中的无机盐大都以离子的形式存在C.DNA、RNA的组成元素相同,且含有同种单糖分子D.脂肪由C、H、O、N四种元素组成3.下丘脑在人体部分生命活动的调节过程中发挥着重要作用,如下图所示,其中①②③代表化学物质。下列说法正确的是()A.在血糖平衡调节过程中,胰岛B细胞接受的化学物质①是葡萄糖B.下丘脑通过突触小体释放②作用于垂体可调节甲状腺的分泌活动C.甲状腺分泌的激素会反馈作用于下丘脑和垂体,抑制②③的合成和分泌D.血糖浓度下降,胰岛A细胞分泌激素作用于骨骼肌细胞,促进其糖原分解4.下列关于细胞内的代谢过程,描述错误的是()A.生物膜的存在,保证了细胞代谢高效、有序地进行B.代谢旺盛的细胞中自由水的含量更高C.细胞内的吸能反应一般与ATP的水解相联系D.细胞越大,物质运输速率越大,代谢速率越快5.图为雌性果蝇体内部分染色体的行为及细胞分裂图像,其中能体现基因重组的是()A.④ B.②③ C.①④ D.②④6.镰刀型细胞贫血症、血友病、21三体综合征都是常见的遗传病,下列与三种遗传病的特征均符合的是()A.都是父亲或母亲减数分裂异常造成的B.在男性或女性群体的发病率相同C.都是由遗传物质发生改变引起的D.都出现异常的酶影响代谢正常进行7.结构与功能相适应是生物学的基本观点之一。下列叙述能体现这一观点的是()A.叶绿体含有双层膜,有利于扩大光合作用的受光面积B.哺乳动物成熟的红细胞呈双凹的圆饼状,有利于其自身携带O2并进行有氧呼吸C.吞噬细胞的溶酶体含有多种水解酶,有利于杀死侵入机体的病毒或病菌D.根尖分生区细胞含有大液泡,有利于根吸收水分8.(10分)豌豆豆荚形状可以是饱满的(D)也可以是不饱满的(d),植株茎的高度可以是高茎(T)也可以是矮茎(t),现有基因型为DdTt的豌豆植株若干,不考虑基因突变和交叉互换,下列有关两对基因在染色体上的位置推断不合理的是()A.选取该豌豆植株进行测交,若子代出现四种表现型,则两对基因分别位于两对同源染色体上B.选取该豌豆植株进行测交,若子代性状分离比接近1∶1,则d、t基因位于同一条染色体上C.选取该豌豆植株自交,若子代性状分离比接近3∶1,则D、T基因位于同一条染色体上D.选取该豌豆植株自交,若子代性状分离比接近1∶2∶1,则D、t基因位于同一条染色体上二、非选择题9.(10分)图甲表示高等植物光合作用过程的示意图,图中数字表示反应过程,字母表示有关物质。图乙表示研究环境因素对光合速率影响的实验处理。请回答:(1)从能量变化看,F到E的反应称为_______________________反应。在光反应时,图甲中物质C的作用是_____________。(2)提取绿叶中光合色素时,除绿叶等,还需向研钵中加入_____________,作为溶解光合色素的溶剂。光合色素吸收的光能转变为化学能储存在_____________(填图甲中字母)中,这些物质在④过程中起的作用是_____________。(3)利用图乙的实验处理可用于研究_____________________等环境随对光合速率的影响。该实验可通过观察_____________即可比较各组实验光合速率的大小。10.(14分)某动物黑色毛和棕色毛这一对相对性状分别由常染色体上的基因B、b决定,同时X染色体上基因I会抑制黑色与棕色色素的形成,从而使毛色变白,基因i无此作用。请回答下列相关问题。(1)种群中黑色雌性个体的基因型为________________,白色个体的基因型共有______________种。(2)群体中,理论上棕色雄性个体数_______________(填“多于”“等于”或“少于”)棕色雌性个体,理由是_____________________________。(3)现有基因型为BBX1Y的个体与纯合棕色雌性杂交,F1出现了黑色雌性个体。推测变异的原因可能是:①发生了基因突变;②发生了X染色体上I基因片段的缺失。某学生采用F1黑色雌雄个体相互交配的方式对变异原因进行研究,判断其能否依据交配后代的表现型及比例确定变异原因,并阐述你的理由:___________________________________________________________________。11.(14分)以广东科学家领衔的国际研究团队历时四年,利用基因编辑技术(CRISPR/Cas9)和体细胞核移植技术,成功地将亨廷顿舞蹈病基因(HTT基因)导入猪的受精卵中,从而培育出首例患亨廷顿舞蹈病转基因的猪,精准地模拟出人类神经退行性疾病,标志我国大动物模型研究走在了世界前列。具体操作过程如图。(1)利用基因编辑技术,将人突变的HTT基因插入到猪的内源性HTT基因的表达框中,可能用到的基因工程工具酶有___________。目的基因能否在成纤维细胞中稳定遗传的关键是_______________________。(2)欲获取单个的成纤维细胞,需用________酶处理猪的相应组织,放置于混合气体培养箱中培养,其中CO2的主要作用是___________________。过程①得到去核卵细胞普遍采用__________的方法。(3)为获得更多的患亨廷顿舞蹈病猪,可在胚胎移植前对胚胎进行__________,若操作对象是囊胚阶段的胚胎,要注意______________________。(4)比起果蝇、线虫、小鼠,猪作为人类疾病模型的优势有______________。12.萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用,而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药,做了相关研究。(1)研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒,得到重组质粒,再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中,获得转基因大肠杆菌。(2)检测发现,转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低,研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好,因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物(引物B和C中都替换了一个碱基),并按图2方式依次进行4次PCR扩增,以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物?请填写以下表格(若选用该引物划“√”,若不选用该引物则划“×”)。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4(3)研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌,提取培养液中的蛋白质,用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物,判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性,研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上,培养一段时间后,比较_________的大小,以确定表达产物的生物活性大小。(4)作为微生物农药,使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌,其优点是_________。
参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、B【解析】
呼吸作用和光合作用是植物体内两大重要的代谢活动。光合作用固定的二氧化碳,可来自于呼吸放出的二氧化碳和从外界吸收的二氧化碳,光合作用与呼吸作用的差值可用净光合作用来表示。气孔导度表示的是气孔张开的程度,它是影响植物光合作用,呼吸作用及蒸腾作用的主要因素。【详解】A、由图可知,在实验范围内,随着镉浓度增大净光合速率下降,故CO2吸收速率下降,A正确;B、811mg/L的钙盐处理组相对于没有钙盐处理的组,净光合速率明显增大,所以811mg/L的钙盐会减弱镉盐对红海榄净光合速率的抑制作用,B错误;C、在相同且适宜光照和温度下,镉浓度5mg/L、钙浓度411mg/L时,气孔导度和净光合速率都比镉浓度1.5mg/L、钙浓度1mg/L时大,所以ATP和NADPH的产生速率也大,C正确;D、红海榄对土壤中铜、镉、汞等重金属的吸收能力不同,其直接原因是根毛细胞膜上不同载体蛋白的数量不同,根本原因是基因的选择性表达,D正确。故选B。2、B【解析】
1.糖类物质的分类列表如下:种类动物特有植物特有单糖六碳糖--半乳糖六碳糖--果糖动植物共有:六碳糖--葡萄糖;五碳糖--核糖、脱氧核糖二糖乳糖(每分子乳糖由1分子葡萄糖和1分子半乳糖脱水缩合而成)麦芽糖(每分子麦芽糖由2分子葡萄糖脱水缩合而成);蔗糖(每分子蔗糖由1分子葡萄糖和1分子果糖脱水缩合而成)多糖糖原(肝糖原、肌糖原)淀粉、纤维素等2.脂肪是生物体内良好的储能物质,其组成元素是C、H、O;核酸是一切生物的遗传物质,包括DNA和RNA,组成元素包括C、H、O、N、P,核酸的组成单位为核苷酸,核苷酸由一分子五碳糖、一分子的磷酸和一分子的含氮碱基组成。【详解】A、淀粉、糖原的基本组成单位都是葡萄糖,蔗糖由一分子的葡萄糖和一分子的果糖组成,A错误;B、细胞中的无机盐大都以离子的形式存在,少数以化合物的形式存在,B正确;C、DNA、RNA的组成元素相同,都是由C、H、O、N、P组成,DNA中含有脱氧核糖,RNA中含有核糖,C错误;D、脂肪由C.、H、O三种元素组成,D错误。故选B。3、C【解析】
1、下丘脑地位和功能:
①感受:渗透压感受器感受渗透压升降,维持水代谢平衡。
②传导:可将渗透压感受器产生的兴奋传导至大脑皮层,使之产生渴觉。
③分泌:分泌促激素释放激素,作用于垂体,使之分泌相应的激素或促激素。在外界环境温度低时分泌促甲状腺激素释放激素,在细胞外液渗透压升高时促使垂体释放抗利尿激素。
④调节:体温调节中枢、血糖调节中枢、渗透压调节中枢。
2、题图分析:①表示神经递质,②表示促甲状腺激素释放激素,③表示促甲状腺激素。【详解】A、图中在血糖平衡调节过程中,胰岛B细胞接受的化学物质①是神经递质,A错误;
B、下丘脑通过神经分泌细胞释放②促甲状腺激素释放激素作用于垂体,使垂体通过分泌③促甲状腺激素,促甲状腺激素才能调节甲状腺的分泌活动,B错误;
C、甲状腺分泌的甲状腺激素会反馈作用于下丘脑和垂体,抑制②③的合成和分泌,以维持内环境中激素水平的稳定性,C正确;
D、血糖浓度下降,胰岛A细胞分泌胰高血糖素作用于肝细胞,促进肝糖元分解,D错误。
故选C。本题考查神经调节和激素调节的相关知识,要求考生理解人体血糖调节的具体过程,理解甲状腺激素的分级调节的过程,对相关生理过程的掌握是解题的关键,解析时要把几个调节过程以下丘脑的作用为纽带进行归纳整合形成知识网络,便于掌握和应用。4、D【解析】
代谢旺盛的细胞中,自由水与结合水的比值变大,结合水的含量多有利于生物体度过不良环境,因此自由水与结合水的比值小,利于提高抗逆性;ATP是细胞中的直接能源物质,细胞内的吸能反应一般与ATP的水解相联系。【详解】A、细胞内的生物膜把各种细胞器分隔开,使得细胞内能够同时进行多种化学反应,而不会互相干扰,保证了细胞生命活动高效、有序地进行,A正确;B、自由水是细胞内的良好溶剂,许多化学反应需要水的参与,所以,代谢旺盛的细胞中自由水的含量更多,B正确;C、细胞内的吸能反应需要消耗能量,能量由ATP水解提供,所以细胞内的吸能反应一般与ATP的水解相联系,C正确;D、细胞越大,物质运输的效率越低,代谢速率越慢,D错误。故选D。熟记细胞的结构,并明确相关物质及反应过程是解答本题的关键。5、C【解析】
基因重组1、概念:在生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的非等位基因重新组合。2、类型:(1)自由组合型:减数第一次分裂后期,随着非同源染色体自由组合,非同源染色体上的非等位基因也自由组合;(2)交叉互换型:减数第一次分裂前期(四分体),基因随着同源染色体的非等位基因的交叉互换而发生重组。3、意义:(1)形成生物多样性的重要原因之一;(2)是生物变异的来源之一,对生物的进化也具有重要的意义。【详解】基因重组有两种类型:(1)减数第一次分裂前期(四分体),同源染色体的非姐妹染色单体交叉互换而导致基因重组,即图中①;(2)减数第一次分裂后期,非同源染色体上的非等位基因自由组合而导致基因重组,即图中④。故选C。6、C【解析】
遗传病分为三大类:其一是染色体病或染色体综合征,遗传物质的改变在染色体水平上可见,表现为数目或结构上的改变。其二是单基因病,主要是指一对等位基因的突变导致的疾病,分别由显性基因和隐性基因突变所致。第三是多基因病,这类疾病涉及多个基因起作用,与单基因病不同的是这些基因没有显性和隐性的关系,每个基因只有微效累加的作用。【详解】A、镰刀型细胞贫血症、血友病是单基因疾病,有可能是受精卵进行有丝分裂过程中基因发生了突变,A错误;B、血友病是X染色体隐性病,男性发病率大于女性,B错误;C、镰刀型细胞贫血症、血友病、21三体综合征都是常见的遗传病,都是由于遗传物质改变引起的疾病,C正确;D、镰刀型细胞贫血症是由于基因发生突变导致蛋白质的结构发生改变,没有引起酶的改变,D错误。故选C。本题考生需要识记遗传病的概念及种类,进行分析。7、C【解析】
细胞的结构总是与功能相适应的,哺乳动物成熟的红细胞内没有细胞核和众多的细胞器,细胞内充分容纳血红蛋白,与红细胞运输氧气的功能相适应;叶绿体是光合作用的场所,叶绿体内有很多基粒,基粒由类囊体薄膜堆砌而成,扩大了膜面积;溶酶体含有多种水解酶,能分解衰老、损伤的细胞器,吞噬并杀死侵入细胞的病毒或病菌;液泡是单层膜形成的泡状结构,内含细胞液(有机酸、糖类、无机盐、色素和蛋白质等),能调节植物细胞内的环境,充盈的液泡使植物细胞保持坚挺。【详解】A、叶绿体含有双层膜,但是其接收、传递、转化光能的结构却是其类囊体薄膜,A错误;B、哺乳动物成熟的红细胞没有线粒体不能进行有氧呼吸,B错误;C、吞噬细胞在免疫过程中扮演着很重要的角色,其主要任务之一就是吞噬侵入机体的病毒或细菌,然后被其中的溶酶体消化分解,C正确;D、根尖分生区细胞不含大液泡,D错误。故选C。本题的知识点是细胞结构与功能相适应的生物学观点,对于生物体结构与功能相适应观点的理解是解题的关键。8、B【解析】
1、基因分离定律的实质:在杂合子的细胞中,位于一对同源染色体上的等位基因,具有一定的独立性;生物体在进行减数分裂形成配子时,等位基因会随着同源染色体的分开而分离,分别进入到两个配子中,独立地随配子遗传给后代。
2、基因自由组合定律的实质是:位于非同源染色体上的非等位基因的分离或自由组合是互不干扰的;在减数分裂过程中,同源染色体上的等位基因彼此分离的同时,非同源染色体上的非等位基因自由组合。【详解】AB、对基因型为DdTt的豌豆进行测交,若两对等位基因位于两对同源染色体上,则后代会出现四种表现型,且比例为1∶1∶1∶1,若后代出现两种表现型,且比例为1∶1,则只能说明其产生两种配子,不能说明染色体上的基因如何连锁,可能是D、T基因位于同一条染色体上或D、t基因位于同一条染色体上,A正确,B错误;C、基因型为DdTt的豌豆进行自交,若两对等位基因位于两对同源染色体上,则后代会出现四种表现型,且比例为9∶3∶3∶1,若D、T基因在同一条染色体上,则后代会出现两种表现型,且比例为3∶1,C正确;D、若D、t基因在同一条染色体上,则后代会出现三种表现型,且比例为1∶2∶1,D正确。故选B。二、非选择题9、放能作为氢(或H+、e-)受体95%乙醇D、F提供磷酸基团、氢和能量光强度、光波长、CO2浓度试管中单位时间产生气泡的数量【解析】
本题结合图形考查光合作用及其影响因素,要求考生理解光合作用过程,能利用所学知识解读图形,判断出甲图中①是水的光解,②是光合磷酸化,③是细胞呼吸第一阶段,④是三碳酸的还原,⑤是二氧化碳的固定;A是[H],B是水,C是NADP+,D是NADPH,E是ADP和Pi,F是ATP,G是C5,H是(CH2O)等有机物。对比乙图可知,自变量为光强度、光波长、CO2浓度,因变量为光合速率,即研究光照强度、光波长及二氧化碳浓度对光合速率的影响,可根据上述分析解题。【详解】(1)从能量变化看,F(ATP)到E(ADP和Pi)是ATP水解反应,此反应称为放能反应。在光反应时,图甲中物质C(NADP+)的作用是作为氢(或H+、e-)受体。(2)叶绿体中的色素乙溶于有机溶剂乙醇中,提取绿叶中光合色素时,除绿叶等,还需向研钵中加入95%乙醇,作为溶解光合色素的溶剂。光合色素吸收的光能转变为化学能储存在NADPH和ATP中,这些物质在④三碳酸的还原过程中起的作用是提供磷酸基团、氢和能量。(3)分析乙图可知,实验的自变量为光强度、光波长、CO2浓度,因变量为光合速率,因此利用图乙的实验处理可用于研究光强度、光波长、CO2浓度等环境随对光合速率的影响。该实验可通过观察试管中单位时间产生气泡(O2)的数量即可比较各组实验光合速率的大小。本题结合图形考查光合作用及其影响因素,要求考生理解光合作用过程,能利用所学知识解读图形。10、BBXiXi、BbXiXi9多于在B基因不存在的情况下,雌性的两条X染色体上同时具有i基因时才会出现棕色,而雄性的一条X染色体上有基因时就会出现棕色不能因为无论是基因突变还是染色体发生X染色体含片段缺失,交配后代中黑色:棕色的比例均为3∶1【解析】
题意分析:根据题干信息黑色毛和棕色毛这一对相对性状分别由常染色体上的基因B、b决定,同时X染色体上基因I会抑制黑色与棕色色素的形成,从而使毛色变白,基因i无此作用,可知群体中白色个体的基因型有B—XIX-、B—XIY、bbXIX-、bbXIY;黑色个体基因型为、B—XiXi、B—XiY;棕色个体的基因型为bbXiXi、bbXiY。【详解】(1)由分析可知,种群中黑色雌性个体的基因型为BBXiXi、BbXiXi,白色个体的基因型共有9种,分别为BBXIXI、BbXIXI、BBXIXi、BbXIXi、BBXIY、BbXIY、bbXIXI、bbXIXi、bbXIY。(2)群体中,在B基因不存在的情况下,雌性的两条X染色体上同时具有i基因时才会出现棕色,而雄性的一条X染色体上有基因时就会出现棕色,据此可知,理论上棕色雄性个体数多于棕色雌性个体。(3)现有基因型为BBXIY的个体与纯合棕色雌性bbXiXi,杂交,F1的基因型为BbXIXi(白色)、BbXiY(黑色),然而却出现了黑色雌性个体,该个体出现的原因如果是基因突变,则黑色雌性个体的基因型为BbXiXi;如果为X染色体上I基因片段的缺失导致,则黑色雌性个体的基因型为BbXXi;若让该黑色雌性个体与F1黑色雄性个体相互交配,则无论是基因突变还是染色体发生X染色体含片段缺失,导致的黑色雌性个体的杂交结果都是黑色∶棕色=3∶1,所以根据上述方式无法判断变异发生的原因。认真分析题干信息是解答本题的重点,关注基因决定性状过程中的相互作用的信息是突破本题的关键!11、限制酶和DNA连接酶目的基因是否插入成纤维细胞的染色体DNA(或细胞核DNA)胰蛋白(胶原蛋白)维持培养液的pH显微操作胚胎分割将内细胞团均等分割猪的内脏构造、大小、血管分布与人类极为相似(或猪的身体结构与人类更为相似)或:猪的内部生理结构与人的相似度更高,研究结果更有说服力或:猪与人类的亲缘关系更近,相似程度更大【解析】
基因编辑技术指能够让人类对目标基因进行“编辑”,实现对特定DNA片段的敲除、加入等。而CRISPR/Cas9技术自问世以来,就有着其它基因编辑技术无可比拟的优势,技术不断改进后,更被认为能够在活细胞中最有效、最便捷地“编辑”任何基因。基因编辑是人对身体的遗传密码做出的修改,对此,人类早就有多种伦理原则进行规范,其中的一个原则是,目前必须要有国家级的政府伦理机构批准,并且尚不能允许经过基因修改的婴儿出生,即便要用人的胚胎进行研究,也一般限于14天的胚胎,即胚胎发育到14天后必须销毁,不能发育成长为人。【详解】(1)基因工程工具酶是限制酶和DNA连接酶,其中限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定脱氧核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,而DNA连接酶能将两个具有相同末端的DNA片段连接。所以利用基因编辑技术,将人突变的HTT基因插入到猪的内源性HTT基因的表达框中,可能用到的基因工程工具酶有限制酶和DNA连接酶;目的基因能否在成纤维细胞中稳定遗传的关键是目的基因是否插入成纤维细胞的染色体DNA(或细胞核DNA)。(2)欲获取单个的成纤维细胞,需用胰蛋白(胶原蛋白)酶处理猪的相应组织;放置于混合气体培养箱中培养,其中CO2的主要作用是维持培养液的pH;过程①得到去核卵细胞普遍采用显微操作的方法。(3)为获得更多的患亨廷顿舞蹈病猪,可在胚胎移植前对胚胎进行胚胎分割;若操作对象是囊胚阶段的胚胎,要注意将内细胞团均等分割。(4)比起果蝇、线虫、小鼠,猪作为人类疾病模型的优势有猪的内脏构造、大小、血管分布与人类极为相似(或猪的身体结构与人类更为相似)。本题考查基因工程、细胞工程、胚胎工程的相关知识,意在考查考生能运用所学知识与观点,通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理的判断或的能力。12、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒(pET质粒)抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全;不会造成基因污染;有效成分纯度较高【解析】
(一)基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较:①相同点:都缝合磷酸二酯键。②区别:E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率较低。(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键.DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。(3)其它载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒。(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的获取1、目的基因是指:编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成.人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因(1)原理:DNA双链复制(2)过程:第一步:加热至90~95℃DNA解链;第二步:冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链;第三步:加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步:基因表达载体的构建1、目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因(1)启动子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。(2)终止子:也是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。(3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来.常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步:将目的基因导入受体细胞1、转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,
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