微生物的基本培养技术 无菌技术 教学课件

微生物的基本培养技术无菌技术无菌技术思考：如何获得纯净的微生物培养物?避免杂菌污染——无菌技术（前提，基本保障）目的：（1）防止培养物被污染（2）防止感染实验操作者主要包括消毒和灭菌。方式：（1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。（2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。阅读教材，完成以下表格：

无菌技术

对比项目

消毒灭菌技术方法特点程度常见对象常用方法较温和强烈杀死物体表面或内部一部分微生物杀死物体内外所有微生物（包括芽孢和孢子）操作空间、操作者衣着和手微生物培养的器皿、接种用具和培养基煮沸消毒、巴氏消毒、化学物质消毒、紫外线消毒湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌

有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。

细菌、真菌等产生的一种有繁殖作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。青霉菌孢子芽孢孢子常见消毒方法1、煮沸消毒法方法：100℃煮沸5-6min对象：一般外科器械、胶管

注射器、饮水和食具。原理：高温使蛋白变性常见消毒方法2、巴氏消毒法方法：62-65℃下处理30min

或80-90℃下处理30s-1min对象：不耐高温的液体，如牛奶原理：高温使蛋白变性常见消毒方法3、化学药物消毒法方法：75%酒精、氯气对象：擦拭双手或实验

器具、水源等。原理：药品使蛋白变性常见消毒方法4、紫外线消毒法方法：紫外灯照射对象：接种室、接种箱、

超净工作台原理：破坏及改变微生物细胞中核酸等分子结构。常见灭菌方法1、湿热灭菌法方法：利用沸水、流通蒸汽

或高压蒸汽进行灭菌对象：培养基、玻璃仪器等原理：高温蒸汽破坏蛋白质等结构使其变性高压蒸汽灭菌法（最常用）：培养基、玻璃器皿、工作服等操作步骤操作要领加水将内层灭菌桶取出，向外层锅内加水，水面与三角形搁架平齐装锅将灭菌物品放在灭菌桶中(不要装得太满)，加盖，对称固定螺栓加热排气加热灭菌锅，打开排气阀，等冷空气完全排尽后，关闭排气阀保温保压100kPa、121℃下，保温保压15～30min出锅1.关闭电源

2.压力表降至“0”点，打开排气阀3.旋开固定螺栓，取出灭菌物品高压蒸汽灭菌法操作常见灭菌方法2、干热灭菌法方法：干热灭菌箱；160-170℃

下加热2-3h对象：耐高温，需保持干燥的物

品，适用于金属用具和玻

璃器皿等原理：使微生物细胞膜破坏、蛋

白质变性和原生质干燥等常见灭菌方法3、灼烧灭菌法方法：直接在酒精灯火焰的充分

燃烧层灼烧。对象：涂布器、接种环、接种针、

试管口等或其他金属用具。原理：使微生物燃烧死亡超净工作台原理：

在特定的空间内，室内空气经过滤器初滤，再经空气高效过滤器二级过滤。从高效过滤器吹出的气流具有一定的、均匀的断面风速，可以排除工作区原来的空气，将尘埃颗粒和生物颗粒带走，以形成无菌的高洁净的工作环境。A.煮沸消毒法B.巴氏消毒法C.化学药剂（75%酒精等）D.紫外线针对不耐高温的液体接种室、超净工作台能耐高温的，需要保持干