山东省济南市长清第一中学2025届高考全国统考预测密卷生物试卷含解析

山东省济南市长清第一中学2025届高考全国统考预测密卷生物试卷注意事项1．考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回．2．答题前，请务必将自己的姓名、准考证号用0．5毫米黑色墨水的签字笔填写在试卷及答题卡的规定位置．3．请认真核对监考员在答题卡上所粘贴的条形码上的姓名、准考证号与本人是否相符．4．作答选择题，必须用2B铅笔将答题卡上对应选项的方框涂满、涂黑；如需改动，请用橡皮擦干净后，再选涂其他答案．作答非选择题，必须用05毫米黑色墨水的签字笔在答题卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律无效．5．如需作图，须用2B铅笔绘、写清楚，线条、符号等须加黑、加粗．一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．如图所示为某种单基因遗传病的系谱图，下列有关叙述错误的是（）A．此图中I1一定是杂合子B．II2与正常男性结婚，生出正常孩子的概率为1/3或1/4C．此图不可以表示抗维生素D佝偻病遗传的家系D．I代的这对夫妇再生一个男孩，正常的概率是1/42．取同一植物组织制成若干临时装片（设各组织细胞液浓度相同），滴加不同浓度的蔗糖溶液，显微镜下观察结果如下图所示。由图可知细胞所处的蔗糖溶液浓度最髙的是A． B． C． D．3．人类基因组计划测定人的22号染色体约由5000万个碱基单位组成，分析发现22号染色体上约有545个基因，下列有关关分析正确的是A．由22号染色体DNA转录的mRNA分子中碱基约2500万个B．神经细胞内的22号染色体DNA可转录出545种mRNAC．DNA聚合酶和RNA聚合酶的结合位点分别在DNA和RNAD．在细胞周期中，mRNA的种类和含量在不断发生变化4．S型肺炎双球菌的DNA转化R型菌的机理为：特殊生长状态的R型菌分泌细胞壁自溶素（专一性破坏细菌细胞壁的蛋白质，对细菌其他成分无破坏作用）破坏部分细胞壁，暴露出内部的细胞膜，少量S型细菌的控制荚膜合成的基因与细胞膜上相应受体结合后，可被解旋成两条单链DNA，其中一条进入R型菌并替换相应片段，一条在细菌外被分解为核苷酸。随着细菌的繁殖，后代出现S型菌和R型菌两种类型的细菌后代。根据以上信息判断，下列说法正确的是A．R型菌分泌的细胞壁自溶素可从培养液中提取，并用于分解植物细胞的细胞壁B．题干中转化过程只伴随着氢键的断裂和合成，不涉及磷酸二酯键的变化C．R型菌转变为S型菌，这种可遗传变异属于基因重组D．题干中细菌后代中的S型菌主要来源于R型菌的转化5．2019年12月开始爆发的新冠肺炎（COVID-19）是由一种新型冠状病毒引起的，该病毒为单股正链RNA病毒，用（+）RNA表示，下图表示冠状病毒的增殖和表达过程。冠状病毒的S蛋白是入侵细胞的关键，其能与肺部等细胞表面的受体血管紧张转化素Ⅱ（ACE2）结合，让病毒与细胞相连。同时，在一些蛋白酶的作用下，S蛋白的特定位点会被切开，促进病毒包膜与细胞膜的融合，从而让病毒进入细胞。下列关于该病毒的说法错误的是（）A．病毒的RNA侵入细胞后可以作为模板翻译出RNA复制酶，催化RNA的复制B．病毒包膜与细胞膜的融合表明，冠状病毒侵入细胞的过程类似于胞吞C．病毒侵入机体后，机体必须依赖细胞免疫才能彻底清除病毒D．S蛋白与细胞表面的受体结合具有特异性，体现了细胞间的信息交流6．我国西部沙漠地区生长着一种叶退化的药用植物锁阳，该植物依附在另一种植物小果白刺的根部生长，从其根部获取营养物质，下列相关叙述正确的是（）A．该生态系统的自我调节能力强，恢复力稳定性高B．药用植物锁阳与小果白刺的种间关系是捕食关系C．种植小果白刺以固沙体现了生物多样性的间接价值D．长期高温干旱的生存环境使得锁阳产生了定向突变二、综合题：本大题共4小题7．（9分）杂交水稻具有重要的经济价值。我国科研人员对杂交稻的无融合生殖（不发生雌、雄配子的细胞核融合而产生种子的一种无性繁殖过程）进行了研究。（1）水稻的杂交种在生活力、抗逆性、适应性和产量等方面优于双亲，但由于杂种后代会发生_______，无法保持其杂种优势，因此需要每年制种用于生产。（2）有两个基因控制水稻无融合生殖过程：含基因A的植株形成雌配子时，减数第一次分裂异常，导致雌配子染色体数目加倍；含基因P的植株产生的雌配子不经过受精作用，直接发育成个体。雄配子的发育不受基因A、P的影响。人们曾用图1所示杂交方案，获得无融合生殖的个体。①若Ⅱ自交，所结种子的胚的基因型为_________。若Ⅲ自交，所结种子的胚的染色体组数为_______。②理论上，Ⅳ作为母本能使子代__________。（3）由于上述无融合生殖技术还存在不足，我国科研人员尝试利用CRISPR/Cas基因编辑技术敲除杂种水稻的4个相关基因，实现了杂种的无融合生殖（如图2所示）。①CRISPR/Cas基因编辑技术中使用的Cas核酸酶可以实现对DNA分子的定点切割，该酶切断的化学键是________。a.氢键b.肽键c.磷酸二酯键d.高能磷酸键②请在上边的框内绘制未敲除基因的杂种水稻自交繁殖所产生子代的染色体组成。_____③据图分析，科研人员利用基因编辑技术敲除的4个基因在实现无融合生殖过程中的作用是_______。（4）无融合技术应用于作物育种，可以使杂种通过无性繁殖得以保持杂种优势，但也会导致________多样性降低，应对杂草入侵或病毒侵害的能力降低，因而也藏有生态隐患。（5）有人说“科学技术是一把双刃剑，应当审慎地使用基因编辑技术。”请你谈谈基因编辑技术可能带来的影响。_____8．（10分）布偶猫又称布拉多尔猫，是猫中体形和体重较大的一种，多为三色猫或双色猫，是非常理想的家养宠物。已知布偶猫的毛色受多对基因控制，请根据控制不同颜色基因的特点回答下列相关问题：（1）布偶猫中有纯色个体，野生型为海豹色（B），后来培育出巧克力色（b）、蓝色和丁香色等类型，蓝色、丁香色分别是海豹色、巧克力色的稀释色，受d基因控制，D基因无稀释功能。从根本上，巧克力色基因来自_____________________，利用射线处理野生型海豹色个体的受精卵一定能直接获得巧克力色的个体吗?并说明原因：______________________________。若将两只基因型为BbDd的猫进行交配，理论上F1个体的表现型及比例为________。如何确定一只蓝色的布偶公猫是纯合子还是杂合子?写出实验方法并预测实验结果：_________________________________。（2）布偶猫中野生型基因（o）使白色呈现黑色，突变型基因（O）抑制棕色基因的表达，使白色呈现红色。①若两个基因同时存在则为黑红交错的双色猫，且双色猫均为母猫，不考虑从性遗传，分析产生的原因是____________________。②当白斑基因（S）存在时，对毛发颜色的分布会造成影响，使双色猫中同种颜色的毛发聚为一簇，称为三花。三花个体也是最受欢迎的类型，三花个体的基因型为__________________，同种基因型的三花猫，同颜色的毛聚集的位置不同，形成的花色多种多样，原因可能是___________________________。③极少数的双色猫和三花猫为公猫，且天生没有生育能力，产生的原因很可能是__________________。9．（10分）图甲表示高等植物光合作用过程的示意图，图中数字表示反应过程，字母表示有关物质。图乙表示研究环境因素对光合速率影响的实验处理。请回答：（1）从能量变化看，F到E的反应称为_______________________反应。在光反应时，图甲中物质C的作用是_____________。（2）提取绿叶中光合色素时，除绿叶等，还需向研钵中加入_____________，作为溶解光合色素的溶剂。光合色素吸收的光能转变为化学能储存在_____________（填图甲中字母）中，这些物质在④过程中起的作用是_____________。（3）利用图乙的实验处理可用于研究_____________________等环境随对光合速率的影响。该实验可通过观察_____________即可比较各组实验光合速率的大小。10．（10分）为增加油葵种子中的含油量，科学家尝试将花生中的酶A基因导入油葵细胞，获得转基因油葵新品种。（1）为获取目的基因，可从花生细胞中提取_________，经逆转录形成cDNA。以此cDNA为模板通过PCR技术扩增目的基因。（2）构建重组DNA分子（如图所示）最好选用_________限制酶，目的是可避免_________。（3）普通大肠杆菌细胞中没有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，将构建的重组DNA分子导入农杆菌中,将获得的农杆菌接种在含_________的固体平板上培养得到含重组质粒的单菌落，再利用培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液。（4）剪取油葵的叶片放入浸染液中一段时间后，经过筛选获得转基因油菜细胞。最后经过__________________培育成转基因油葵植株。此种技术的原理是_________。（5）研究发现，如果将该酶A的20位和24位氨基酸变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍。通过蛋白质工程对酶A进行改造，所需步骤有_________。a．蛋白质的结构设计b．蛋白质的结构和功能分析c．蛋白质结构的定向改造d．酶A基因的定向改造e．将改造后的酶A基因导入受体细胞f．将定向改造的酶A导入受体细胞（6）经过种植转基因油葵发现，虽然转基因油葵种子中含油量上升，但是抗灰霉菌的能力丢失，其原因是_________。11．（15分）环境污染物多聚联苯（C12H10-xClx）难以降解，受其污染的土壤中常有重金属污染同时存在。研究发现联苯降解菌内的联苯水解酶是催化多聚联苯降解的关键酶。回答下列问题：（1）为了从富含多聚联苯的环境中分离联苯降解菌，培养基中加入多聚联苯作为__________，该培养基属于__________（填“选择”或“鉴定”）培养基。（2）若要对所分离的菌种进行计数，除显微镜直接计数法以外还常用_______________法接种来进行活菌计数，其原理是__________________________。（3）若从联苯降解菌中分离并得到纯度较高的联苯水解酶（蛋白质），分离该酶常用的方法是_______法，采用该方法先分离出的是相对分子质量______（填“较大”或“较小”）的蛋白质。（4）联苯降解酶在实验室里的降解率很高，但是实际污染环境的治理中降解率很低，这可能是因为________________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、C【解析】

遗传系谱图中两个亲本都患病但生育了正常的儿子，因此判定该病为显性遗传病，但不能区分是常染色体遗传还是伴性遗传。【详解】A、无论是常染色体遗传还是伴性遗传，Ⅱ1中的正常基因一定有一个来自于Ⅰ1，因此Ⅰ1一定是杂合子，A正确；B、若该病为常染色体显性，推断亲本的基因型均为Aa，因此Ⅱ2的基因型应该为1/3AA，2/3Aa，与正常男子aa婚配，生出正常孩子的概率为；若该病为伴X染色体显性遗传，推断亲本的基因型分别为XAXa，XAY，因此II2的基因型应该为1/2XAXA、1/2XAXa，与正常的男子XaY婚配，生育正常孩子的概率为，B正确；C、抗维生素D佝偻病是伴X显性遗传病，该图可以表示其遗传的家系，C错误；D、若该病为常染色体显性，推断亲本的基因型均为Aa，再生育一个男孩，正常的概率为1/4，若该病为伴X染色体显性遗传，推断亲本的基因型分别为XAXa、XAY，生一个男孩，正常的概率为1/4，D正确。故选C。【点睛】根据遗传系谱图分析该遗传病的遗传方式是解题的突破点。2、A【解析】

当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过原生质层进入到外界溶液中，由于原生质层比细胞壁的伸缩性大，当细胞不断失水时，液泡逐渐缩小，原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来，即发生了质壁分离；当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，外界溶液中的水分就透过原生质层进入到细胞液中，液泡逐渐变大，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，即发生了质壁分离复原。【详解】外界溶液浓度＞细胞液浓度，细胞失水，发生质壁分离，液泡体积变小，分析选项可知，A选项的液泡体积最小，失水最多，说明外界蔗糖溶液浓度最髙，故A正确，BCD错误。3、D【解析】

A、22号染色休约由5000万个碱基单位组成，545个基因共含碱基小于5000万个碱基，每个基因转录时上下游的非编码区均不转录到RNA上，因此就是22号染色体上基因全部转录，mRNA分子中碱基之和也小于2500万个，A错误；B、22号染色体上基因并不一定全部转录，B错误；C、DNA聚合酶是DNA复制时起催化作用的，RNA聚合酶是转录时起催化作用的，结合位点都在DNA上，C错误；D、由于基因有选择性表达，在细胞周期中不同时期，mRNA的种类和含量在不断犮生变化，D正确。故选D。【点睛】结合题目中22号染色休约由5000万个碱基单位组成，分析发现22号染色体上约有545个基因的信息逐项分析，易因对染色体和基因的关系及基因的表达过程理解不准确而误选。4、C【解析】

1、加热杀死的S型菌的DNA能将R型细菌转化为S型细菌，随着R型细菌转化为S型细菌，S型细菌的数量呈现S型曲线的变化。R型细菌在小鼠体内开始时大部分会被免疫系统消灭，随着小鼠免疫系统的破坏，R型细菌数量又开始增加。

2、在艾弗里证明遗传物质是DNA的实验中，艾弗里将S型细菌的DNA、蛋白质、糖类等物质分离开，单独的、直接的观察它们各自的作用。另外还增加了一组对照实验，即DNA酶和S型活菌中提取的DNA与R型菌混合培养。【详解】A、R型菌是原核生物，细胞壁成分与植物细胞壁成分不同，故R型菌分泌的细胞壁自溶素可从培养液中提取，不可用于分解植物细胞的细胞壁，A错误；B、题干中的转化过程中，S型细菌的控制荚膜合成的基因与细胞膜上相应受体结合后，可被解旋成两条单链DNA，伴随着氢键的断裂和合成，其中一条进入R型菌并替换相应片段，一条在细菌外被分解为核苷酸，涉及磷酸二酯键的变化，B错误；C、R型菌转变为S型菌的过程中，S型菌的DNA进入R型活菌，这种可遗传变异属于基因重组，C正确；D、由于转化过程中R型菌转化为S型菌的概率低，故题干中细菌后代中的S型菌主要来源于S型菌的增殖，D错误。故选C。5、D【解析】

病毒是一类没有细胞结构的特殊生物，只有蛋白质外壳和内部的遗传物质构成，不能独立的生活和繁殖，只有寄生在其他生物的活细胞内才能生活和繁殖，一旦离开了活细胞，病毒就无法进行生命活动。【详解】A、由图中信息可知，病毒的RNA可以直接作为翻译的模板，翻译出的酶催化RNA的复制，A正确；B、病毒侵入细胞的过程有“病毒包膜与细胞膜的融合”，这和胞吞过程膜的融合类似，B正确；C、病毒侵入细胞后，必须由细胞免疫裂解靶细胞释放出病毒后，机体才能彻底清除病毒，C正确；D、S蛋白与细胞表面的受体结合具有特异性，但是病毒不是细胞结构的生物，没有体现细胞间的信息交流，D错误。故选D。【点睛】本题需要考生结合图中病毒的基因表达的过程，进行解答，易错点是D选项中，细胞间的信息交流一定是发生在细胞与细胞之间的。6、C【解析】

一般情况下，生态系统的动植物种类越多，营养结构越复杂，抵抗力稳定性越高，而恢复力稳定性越低；种间关系包括：捕食、竞争、寄生、互利共生等；生物多样性的价值包括直接价值、间接价值、潜在价值。【详解】A、我国西部沙漠地区的动植物种类较少，营养结构较简单，因此其自我调节能力较弱，由于环境恶劣，恢复力稳定性也较低，A错误；B、锁阳叶退化，不能进行光合作用合成有机物，而是从小果白刺的根部获取营养物质，故二者为寄生关系，B错误；C、小果白刺可以防风固沙，维持生态平衡，属于生态功能，体现了生物多样性的间接价值，C正确；D、生物的变异是不定向的，D错误。故选C。二、综合题：本大题共4小题7、性状分离aP或ap3保持母本基因型c使减数分裂变成有丝分裂（或“不出现基因重组、配子染色体数目加倍”）；受精后，父本来源的染色体消失基因（或“遗传”）有利方面：疾病治疗、作物改良、酶的结构改造提高工业生产效率潜在风险：技术上存在隐患，例如脱靶（误切割）带来的新的未知基因突变；使原有基因组改变，导致基因间相互作用关系的改变。【解析】

根据题意分析可知，CRISPR/Cas9系统基因编辑技术是利用该基因表达系统中的引导RNA能识别并结合特定的DNA序列，从而引导Cas9蛋白结合到相应位置并剪切DNA，最终实现对靶基因序列的编辑。【详解】（1）表现出优良性状的杂交后代不一定就有杂种优势，如显性杂合子，其自交后代会发生性状分离，无法保持其杂种优势，因此需要每年制种用于生产。（2）由题意知，若Ⅱ自交，含基因P的植株产生的雌配子不经过受精作用，直接发育成个体，aaPp作母本产生的雌配子基因型为aP或ap，直接发育成个体所结种子的胚的基因型为aP或ap。若Ⅲ自交，Aapp作父本，产生雄配子的基因型为Ap、ap，Aapp作母本，由题意知，含基因A的植株形成雌配子时，减数第一次分裂异常，导致雌配子染色体数目加倍，产生雌配子的基因型为Aapp。受精作用后所结种子的胚的染色体组数为3组。Ⅳ作为母本，A保证产生雌配子的基因型为AaPp，P保证雌配子AaPp不经过受精作用，直接发育成个体，使子代保持母本基因型AaPp。（3）Cas核酸酶切断的化学键磷酸二酯键。未敲除基因的杂种水稻自交繁殖所产生子代的染色体组成图示如下：据图分析，科研人员利用基因编辑技术敲除的4个基因在实现无融合生殖过程中的作用是使减数分裂变成有丝分裂（或“不出现基因重组、配子染色体数目加倍”）；受精后，父本来源的染色体消失。（4）无融合技术应用于作物育种，可以使杂种通过无性繁殖得以保持杂种优势，但也会导致基因多样性降低，藏有生态隐患。（5）基因编辑技术的有利方面：疾病治疗、作物改良、酶的结构改造提高工业生产效率。基因编辑技术的潜在风险：技术上存在隐患，例如脱靶（误切割）带来的新的未知基因突变；使原有基因组改变，导致基因间相互作用关系的改变等。【点睛】本题以科技前沿技术无融合繁殖技术和基因编辑技术，考查杂交优势、异常减数分裂和基因工程等相关知识，意在考查考生的理解所学知识要点和获取题目信息的能力，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题和探究问题的能力。8、基因突变不一定，基因突变具有低频性和不定向性海豹色∶巧克力色∶蓝色∶丁香色=9∶3∶3∶1选择多只丁香色的母猫与之杂交，观察后代的表现型；若后代中均为蓝色个体，则为纯合子，若后代中出现丁香色个体，则为杂合子（合理即可）O、o基因存在于X染色体上，母猫有两条X染色体，可使两个基因同时出现SSXOXo、SsXOXo基因的表达受到影响（基因的选择性表达）染色体变异（染色体数目变异或染色体结构变异）【解析】

根据题干的信息海豹色基因型是B_D_，巧克力色的基因型是bbD_，蓝色基因型B_dd，丁香色基因型bbdd。【详解】（1）巧克力色是由海豹色经过基因突变形成；由于基因突变具有低频性和不定向性，所以利用射线处理野生型海豹色个体的受精卵不一定能直接获得巧克力色的个体；BbDd的猫进行交配，子代表现型、基因型及比例海豹色（B_D_）∶蓝色（B_dd）∶巧克力色（bbD_）∶丁香色（bbdd）=9∶3∶3∶1。蓝色猫的纯合子基因型是BBdd，杂合子是Bbdd，判断动物的基因型通常选择测交，所以选择多只丁香色（bbdd）的母猫与之杂交，观察后代的表现型；若后代中均为蓝色个体（Bbdd），则为纯合子，若后代中出现丁香色个体（bbdd），则为杂合子。（2）①若两个基因同时存在则为黑红交错的双色猫，且双色猫均为母猫，可以推测雄性猫只含有一个基因型，所以O、o基因存在于X染色体上，母猫有两条X染色体，可使两个基因同时出现，而公猫只有1条X染色体，所以只含有一个基因。②三花个体需要在黑红交错的双色猫基础上出现白斑，所以其基因型是SSXOXo、SsXOXo；同种基因型的三花猫，同颜色的毛聚集的位置不同，形成的花色多种多样，原因可能是基因的表达受到影响或基因的选择性表达。③正常公猫只含有1条X染色体，所以不可能是双色毛，极少数的的双色猫和三花猫为公猫，且天生没有生育能力，可能的原因是发生了染色体变异（染色体数目变异或染色体结构变异）。【点睛】本题需要考生分析题干中的信息得出各种表现型的基因型，在分析（2）时需要根据“雄性猫只含有一个基因型”推测出改基因位于X染色体上。9、放能作为氢（或H+、e－）受体95%乙醇D、F提供磷酸基团、氢和能量光强度、光波长、CO2浓度试管中单位时间产生气泡的数量【解析】

本题结合图形考查光合作用及其影响因素，要求考生理解光合作用过程，能利用所学知识解读图形，判断出甲图中①是水的光解，②是光合磷酸化，③是细胞呼吸第一阶段，④是三碳酸的还原，⑤是二氧化碳的固定；A是[H]，B是水，C是NADP+，D是NADPH，E是ADP和Pi，F是ATP，G是C5，H是（CH2O）等有机物。对比乙图可知，自变量为光强度、光波长、CO2浓度，因变量为光合速率，即研究光照强度、光波长及二氧化碳浓度对光合速率的影响，可根据上述分析解题。【详解】（1）从能量变化看，F（ATP）到E（ADP和Pi）是ATP水解反应，此反应称为放能反应。在光反应时，图甲中物质C（NADP+）的作用是作为氢（或H+、e－）受体。（2）叶绿体中的色素乙溶于有机溶剂乙醇中，提取绿叶中光合色素时，除绿叶等，还需向研钵中加入95%乙醇，作为溶解光合色素的溶剂。光合色素吸收的光能转变为化学能储存在NADPH和ATP中，这些物质在④三碳酸的还原过程中起的作用是提供磷酸基团、氢和能量。（3）分析乙图可知，实验的自变量为光强度、光波长、CO2浓度，因变量为光合速率，因此利用图乙的实验处理可用于研究光强度、光波长、CO2浓度等环境随对光合速率的影响。该实验可通过观察试管中单位时间产生气泡（O2）的数量即可比较各组实验光合速率的大小。【点睛】本题结合图形考查光合作用及其影响因素，要求考生理解光合作用过程，能利用所学知识解读图形。10、mRNABamHⅠ和PstⅠ质粒自身的黏性末端连接或目的基因与质粒反向连接氨苄青霉素植物组织培养技术植物细胞的全能性b、a、d、e抗灰霉菌基因没有表达（或丢失等）【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）逆转录过程需要从供体细胞内提取出的mRNA为模板，以脱氧核苷酸为原料合成cDNA。（2）构建重组DNA分子时选用的限制酶要不破坏目的基因，所以不能用EcoRI，同时尽量防止质粒自身的黏性末端连接或目的基因与质粒反向连接，所以最好选用两种限制酶，即BamHⅠ和PstⅠ。（3）根据限制酶的切割位点，由于使用BamHⅠ和PstⅠ会破坏抗四环素标记基因，但抗氨苄青霉素的标记基因是完整的所以只能用含氨苄青霉素的培养基筛选含重组质粒的单菌落。（4）得到转基因细胞后，要培养转基因植株，需要用植物的组织培养技术