CJ/T 148-2001 城市供水 粪性链球菌的测定

2001-07-17发布2001-12-01实施中华人民共和国建设部发布城市供水粪性链球菌的测定CJ/T148-2001Urbanwatersupply—Detectionandenumerationoffecal1范围本标准规定了用发酵法测定城市供水及其水源水中的粪性链球菌。本标准适用于城市供水及其水源水中粪性链球菌的测定。在此种培养液中生长的菌体可认为是粪性链球菌推测试验阳性。取推测试验为阳性的培养液移至Pfrizer培养基上做确信试验，能在Pfrizer培养基上有棕色晕轮的棕黑色菌落生成，则表示粪性链球菌的证实试验为阳性。3试剂和材料3.1叠氮化物葡萄糖液态培养基3.1.1成分(单强度)牛肉膏4.5g叠氮化钠7.5g将上述各成分于蒸馏水中加热溶解，调节pH值使其灭菌后为7.2±0.1,分装于试管内，高压灭菌器121℃灭菌15min。上述各成分取2倍量为双倍强度培养基。3.2Pfrizer选择性肠球菌琼脂培养基3.2.1成分3号胆盐中华人民共和国建设部2001-07-17批准2001-12-01实施柠檬酸钠柠檬酸铁铵叠氮化钠0.25g3.2.2制法将上述各成分于蒸馏水中加热溶解，调节pH值使其灭菌后为7.2±0.1,分4.3恒温培养箱。4.4高压蒸气灭菌器。4.5酒精灯。4.7培养皿。4.8冰箱。5.1推测试验5.1.1接种不同量的被检水样于一组叠氮化物葡萄糖液态培养基中；接种1mL或更少的水样于单倍5.1.2接种过的试管应在35C±0.5C的恒温培养箱内培养，24h±2h后检查每一支试管是否有浑经过24h或48h培养而显示浑浊的所有的叠氮化物葡萄糖液态培养基试管要进一步做确信从推测试验为阳性的试管内取一些培养液，划线转移到培养皿中，其内盛有Piriaer选择性肠球菌琼脂培养基(3.2)。培养皿在35C±0.5C倒置培养24h±2h.具有棕色晕轮的棕黑色菌落生成则显示根据确信试验的阳性管数查最可能数(MPN)表(见表1),即可得100mL,水样中的粪链球菌的最情况下100mL水样中细菌数的最可能数和95%可信限值)出现阳性份数出现阳性份数管管管水样中细菌的管管管水样中细菌的220220001122222333333344444001200200123001122300112010001010010100010101001012022424466577998<0.5<0.511145597777555555444555555555555555233400011222333344444555555101001201201201230234012345997确信试验，如过氧化氢酶反应为阴性并能在45℃脑-心浸萃琼脂培养基上生成菌落，则证3试剂和材料3.1KF链球菌琼脂培养基3号际陈或聚胨10.0g然后冷却，温度降到50C或60C时，于100mL培养基内再加1mL的1%的氧化三苯基四氮唑的无菌水溶液(用0.22μm滤膜过滤除菌，用10%的NaCO₂溶液将pH调到7.2)。培养基于45C～50C存放，到灌入平皿之前不可超过4h,有培养基的平皿应在2C~10℃保存。过30天不用，弃去。幼牛脑的浸萃NaCl际陈Na₂HPO₄将上述各成分于蒸馏水中加热溶解，调节pH值使其灭菌后为7.4。脑-心浸萃琼脂培养基除了含有与上述脑-心浸萃液态培养基相同的灭菌后的pH值应为7.4。分装到试管中做成斜面培养基。4仪器4.3抽滤设备。4.5显微镜(10～15