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文档简介
第1节DNA是主要的遗传物质第3章基因的本质一、对遗传物质的早期推测1.20世纪20年代①大多数科学家认为蛋白质是遗传物质;②依据:氨基酸多种多样的排列顺序,可能蕴含着遗传信息。2.20世纪30年代①认识到DNA由许多脱氧核苷酸聚合而成;②组成DNA的脱氧核苷酸有4种(图3-1);③局限:对DNA的结构没有清晰地了解。美·列文
“四核苷酸假说”1944年,美·艾弗里1928年,英·格里菲思二、肺炎链球菌的转化实验S型R型菌落菌体有无致病性(一)肺炎链球菌R型菌(菌落粗糙)表面光滑表面粗糙有多糖类的荚膜无多糖类的荚膜有无(二)肺炎链球菌的体内转化实验1.科学家:格里菲斯2.实验过程(图3-2)3.分析:(1)第1组实验说明:R型活细菌无致病性;(2)第2组实验说明:S型活细菌有致病性;(3)第3组实验说明:加热致死的S型细菌无致病性;1.第4组小鼠的直接死因是什么?2.从小鼠体内分离出的S型活菌来源于什么?3.从小鼠体内只分离出了S型活菌吗?思考S型活菌R型活菌转化;转化后的S型菌增殖;不是,还有R型活菌,且R型菌更多。(二)肺炎链球菌的体内转化实验1.科学家:格里菲斯2.实验过程(图3-2)3.分析:(1)第1组实验说明:R型活细菌无致病性;(2)第2组实验说明:S型活细菌有致病性;(3)第3组实验说明:加热致死的S型细菌无致病性;(4)第4组实验说明:R型活细菌与加热致死的S型细菌混合后,产生了S型活细菌,导致小鼠死亡。4.实验结论:加热致死的S型细菌,含有某种促使R型活细菌转化为S型活细菌的物质——转化因子。这种转化因子究竟是什么物质呢?(二)肺炎链球菌的体内转化实验关键思路:把S型细菌的各种物质分开,单独的、直接的观察它们各自的作用。糖类
脂质
蛋白质RNA
DNA加热杀死的S型细菌哪一个是“转化因子”呢?(三)肺炎链球菌的体外转化实验1.科学家:艾弗里及其同事2.实验过程(1)制备提取物①将加热致死的S型细菌破碎②设法除去绝大多数的糖类、蛋白质和脂质(2)设置对照实验①对照组:对S型菌的提取液不作任何处理。有R型细菌的培养基S型S型细菌的提取物R型第一组(三)肺炎链球菌的体外转化实验1.科学家:艾弗里及其同事2.实验过程(1)制备提取物①将加热致死的S型细菌破碎②设法除去绝大多数的糖类、蛋白质和脂质(2)设置对照实验①对照组:对S型菌的提取液不作任何处理。②实验组:分别用蛋白酶、RNA酶、酯酶和
DNA酶处理。(三)肺炎链球菌的体外转化实验1.科学家:艾弗里及其同事2.实验过程(1)制备提取物①将加热致死的S型细菌破碎②设法除去绝大多数的糖类、蛋白质和脂质(2)设置对照实验①对照组:对S型菌的提取液不作任何处理。②实验组:分别用蛋白酶、RNA酶、酯酶和
DNA酶处理。转化因子很可能是DNA(三)肺炎链球菌的体外转化实验3.结论:
DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质。4.局限:提取的DNA不纯,且对DNA的结构没有很清晰的了解。
艾弗里等人进一步分析了细胞提取物的理化特性,
发现这些特性都与DNA的极为相似。S型细菌的提取物三、科学方法“减法原理”艾弗里的肺炎链球菌转化实验中,每个实验组特异性地去除了一种物质,从而鉴定出DNA是遗传物质。“加法原理”与常态相比,人为增加某种影响因素的称为“减法原理”。与常态相比,人为去除某种影响因素的称为“减法原理”。eg在“比较过氧化氢在不同条件下的分解”的实验中,与对照组相比,实验组分别作加温、滴加FeCl3溶液、滴加肝脏研磨液的处理,就利用了“加法原理”。吸附合成组装释放注入遗传物质?(一)科学家:赫尔希和蔡斯(二)实验材料:T2噬菌体1.成分:DNA和蛋白质2.生活方式
是一种专门寄生在大肠杆菌体内的病毒;3.增殖特点C、H、O、N、PC、H、O、N、S四、噬菌体侵染细菌的实验噬菌体侵染大肠杆菌四、噬菌体侵染细菌的实验(三)探究T2噬菌体侵染细菌时注入细菌的成分1.提出问题:T2噬菌体侵染细菌时注入细菌的成分是什么?2.作出假说:
假说一
;
假说二
;
假说三
;只注入DNA只注入蛋白质DNA和蛋白质一起注入3.设计实验问题1:DNA和蛋白质是肉眼看不见的分子,如何观察它们是否注入细菌?(1)方法:放射性同位素标记技术注:只能检测放射性的强弱,不能区别具体是哪种元素的放射性。四、噬菌体侵染细菌的实验蛋白质:C、H、O、N、SDNA:C、H、O、N、P问题2:标记噬菌体的哪种元素才能将DNA与蛋白质区分开?(2)标记元素:35S---蛋白质
32P---DNA问题3:能用含放射性原料的培养基直接培养噬菌体吗?
怎样标记噬菌体?3.设计实验四、噬菌体侵染细菌的实验不能大肠杆菌含35S的培养基T2噬菌体裂解释放含35S的原料四、噬菌体侵染细菌的实验大肠杆菌含32P的培养基T2噬菌体含32P的原料裂解释放四、噬菌体侵染细菌的实验3.设计实验四、噬菌体侵染细菌的实验(3)实验步骤①标记噬菌体a.分别用含有35S和32P的培养基来培养大肠杆菌;b.再用上述大肠杆菌来培养T2噬菌体。35S标记的T2噬菌体32P标记的T2噬菌体四、噬菌体侵染细菌的实验有标记的噬菌体未标记的大肠杆菌②用35S或32P标记的T2噬菌体分别侵染未被标记的大肠杆菌四、噬菌体侵染细菌的实验eg
35S标记的噬菌体侵染未标记的大肠杆菌只注入DNA只注入蛋白质DNA和蛋白质一起注入上清液沉淀物四、噬菌体侵染细菌的实验③短时间保温后,用搅拌器搅拌
④离心假说一假说二假说三四、噬菌体侵染细菌的实验4.预期实验结果有无有无有无有无有无有无5.实验验证假说一假说一和三6.实验结论:噬菌体注入细菌的成分是DNA;
DNA才是T2噬菌体的遗传物质。四、噬菌体侵染细菌的实验(四)分析1.形成子代噬菌体时:(1)模板来自
;(2)原料、能量、场所等由
提供;2.误差分析(1)标记35S的一组实验中,沉淀物有放射性的原因?(2)标记32P的一组实验中,上清液有放射性的原因?
①保温时间过短,亲代噬菌体还未侵染到大肠杆菌;
②保温时间过长,部分子代噬菌体被释放出来。搅拌不充分噬菌体大肠杆菌五、烟草花叶病毒的侵染实验正常花叶病RNA蛋白质结论:RNA是烟草花叶病毒的遗传物质。病毒RNA病毒DNA病毒真核生物原核生物生物DNA是遗传物质RNA是遗传物质(生物界
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