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文档简介

第2节微生物的培育技术及应用第1课时微生物的基本培育技术基础巩固1.防止杂菌入侵,获得纯净的培育物,是探讨和应用微生物的前提。下列有关叙述错误的是()A.试验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B.接种环、接种针等金属用具,干脆在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌C.在试验室中,切记不行吃东西、喝水,离开试验室时肯定要洗手,以防止被微生物感染D.运用后的培育基丢弃前肯定要进行灭菌处理,以免污染环境答案:B解析:将接种环等金属用具干脆在酒精灯火焰的充分燃烧层(外焰部位)灼烧,可以快速彻底地灭菌。2.下列关于灭菌的叙述,正确的是()A.用于培育细菌等微生物的培育基都必需用高压蒸汽灭菌锅灭菌B.锥形瓶、培育皿、移液管等器具的高压蒸汽灭菌时间一般为15min(121℃条件下)C.超净工作台或接种箱用紫外线照耀30min即可灭菌D.灭菌后的培育基、器具已达到了完全无菌答案:B解析:培育基通常可以进行高压蒸汽灭菌,若培育基中有碳酸氢钠、尿素等高温易分解的成分,就不能用此方法。超净工作台或接种箱用紫外线照耀30min,可以杀死物体表面或空气中的微生物,但达不到灭菌的效果。灭菌后的培育基、器具不肯定达到了完全无菌,而且要防止二次污染。3.下列有关培育基配制的叙述,正确的是()A.任何培育基都必需含有碳源、氮源、矿质元素、水及特别养分物质B.碳源和氮源必需具有肯定的比例,碳元素的含量最多,其次为氮元素C.微生物的生长除受养分因素影响外,还受温度、pH、O2、渗透压等的影响D.养分物质的浓度越高越好答案:C解析:各种培育基的配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等养分物质。培育基中碳源和氮源必需具有肯定的比例,但含量最多的元素不是碳元素,而应是氧元素。养分物质的浓度并不是越高越好,浓度过高会导致培育物细胞失水。4.下列关于培育基的说法,正确的是()A.培育基是为微生物的生长繁殖供应养分的基质B.培育基只有两类:液体培育基和固体培育基C.除水以外的无机物只能供应无机盐D.有机氮源不能为微生物供应能量答案:A解析:依据培育基的物理性质,可分为液体培育基和固体培育基;依据培育基的用途,可分为鉴别培育基、选择培育基等。除水以外的无机物如NH4HCO3,既可以是碳源,也可以是氮源,不仅仅供应无机盐。有机氮源在为微生物供应氮源的同时,也能供应能量。5.下列依次表示倒平板、接种的位置以及平板划线法接种的路径,其中错误的是()答案:D6.下列关于微生物培育的叙述,错误的是()A.获得纯培育物的关键是防止外来杂菌入侵B.划线分别可在培育基上获得匀称分布的单菌落C.高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子和芽孢D.培育时应把接种微生物的培育皿和未接种的培育皿一起培育,作为比照答案:B解析:获得纯培育物的关键是无菌操作,防止外来杂菌入侵。划线分别获得的菌落在培育基上的分布是不匀称的,在划线的最终区域可以得到单菌落。高温灭菌的目的是高温杀死一切微生物,包括芽孢和孢子。培育时为了检验培育基灭菌是否合格,应把接种微生物的培育皿和未接种的培育皿一块培育,作为比照。7.下列有关平板划线操作的叙述,正确的是()A.运用灭菌的接种环、培育皿,操作过程中不再灭菌B.打开含菌种的试管后须要将试管口通过火焰,蘸取菌种后须要立刻塞上棉塞C.培育皿盖打开后将蘸有菌种的接种环快速伸入平板内,划三至五条平行线即可D.待接种环冷却后再伸入菌液中蘸取一环菌液答案:D解析:平板划线过程中,接种环在每次划线之前和之后均须要灼烧灭菌,A项错误。打开含菌种的试管需通过火焰灭菌,取出菌种后还需通过火焰灭菌,再塞上棉塞,B项错误。将蘸有菌种的接种环快速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖,灼烧接种环,冷却后从第一次划线的末端起先作其次次划线,重复上述过程,作第三、四、五次划线,留意不要将第五次的划线与第一次划线相连,C项错误。接种环在每次划线之前和之后均须要灼烧灭菌,将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液,D项正确。8.平板冷凝后,要将平板倒置,其主要缘由是()A.接种时再拿起来便利B.便利在皿底上标记日期等C.正着放置平板简单破裂D.防止皿盖上的冷凝水珠落入培育基造成污染答案:D解析:平板冷凝后,皿盖上会凝聚水珠,凝固后的培育基表面湿度也比较高。将平板倒置,可以使培育基表面的水分更好地挥发,防止皿盖上的水珠落入培育基造成污染。9.微生物的分别和培育是现代生物工程应用中的重要环节。下图甲、乙、丙是酵母菌分别和培育过程中部分操作和试验结果示意图。请据图回答下列问题。(1)图甲所示是制备固体培育基时的试验操作步骤之一,它称为。

(2)培育酵母菌时,在接种前须要检测培育基是否被污染。对于固体培育基应采纳的检测方法是

(3)图乙是平板划线法接种操作示意图,正确的操作依次是A→B→(用字母和箭头表示);找出图乙中一处错误的操作:(用字母表示)。

(4)图丙是某同学用平板划线法接种后的培育基培育12h后的试验结果,假如培育基上,则说明无菌操作基本符合要求。

答案:(1)倒平板(2)将未接种的培育基在相宜的温度下放置相宜的时间,视察培育基上是否有菌落产生(3)G→F→E→C→D→HC(4)生长的菌落颜色、形态、大小基本一样,并符合酵母菌菌落的特点10.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染状况而进行了试验。试验包括制备培育基、灭菌、接种及培育、菌落视察等。请回答下列与试验相关的问题。(1)培育基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培育供应了和。除此之外,培育基还必需含有的基本成分是和。

(2)对培育基进行灭菌,应当采纳的方法是。

(3)为了尽快视察到细菌培育的试验结果,应将接种了湖水样品的平板置于中培育,培育的温度设定在37℃。要使该试验所得结果牢靠,还应当同时在另一平板上接种无菌水作为比照进行试验。

(4)培育20h后,视察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有多种细菌。一般说来,菌落总数越多,湖水遭遇细菌污染的程度越。

答案:(1)氮源(碳源不作要求)碳源无机盐水(2)高压蒸汽灭菌(3)恒温培育箱(4)大实力提升1.下表所示为某微生物培育基的配方。下列说法错误的是()成分含量NaNO33gK2HPO41gKCl0.5gMgSO4·7H2O0.5gFeSO40.01g(CH2O)30gH2O定容至1000mL青霉素0.1万单位A.此培育基属于液体培育基,其中的碳源是(CH2O)B.配制培育基时,溶化后分装前,必须要进行的是调整pH和灭菌C.接种时应在酒精灯火焰旁边操作D.若用该培育液培育细菌,不用除去青霉素答案:D解析:若用该培育基培育细菌,应除去的物质是青霉素,因为青霉素对细菌有杀伤作用。2.细菌培育过程中分别采纳了高压蒸汽灭菌、酒精、火焰灼烧、干热灭菌等几种不同的处理,这些方法依次用于杀死哪些部位的杂菌?()A.接种环、手、培育基、涂布器B.高压锅、手、接种环、培育基C.培育基、手、接种环、吸管D.接种环、手、高压锅、培育皿答案:C解析:通常采纳高压蒸汽灭菌法对培育基进行灭菌,用酒精对操作者的手进行消毒,对接种针、瓶口采纳火焰灼烧的方法进行灼烧灭菌,吸管、培育皿可用干热灭菌法灭菌。3.在进行“酵母菌的纯培育”试验时,下列有关叙述正确的是()A.高压蒸汽灭菌加热结束时,马上开启锅盖,拿出培育基和工具待用B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培育基溅到皿盖上C.为了防止污染,接种环经灼烧灭菌后应趁热快速挑取菌落D.用记号笔标记培育皿时,为了查看便利,应标记在皿底上答案:D解析:灭菌结束后,切断热源,让灭菌锅内温度自然下降(不需打开放气阀),当压力表的压力降到零时,打开排气阀,旋松螺栓,打开盖子,拿出培育基和工具待用。倒平板时,用左手的拇指和食指将培育皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培育基(10~20mL)倒入培育皿,左手马上盖上培育皿的皿盖。接种环经灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后再挑取菌落。由于培育时培育皿是倒置的,因此做标记时应用记号笔标记在皿底上。4.某同学在以下三种条件下培育大肠杆菌:①以葡萄糖为碳源的培育基,不断补充培育基,刚好去除代谢物;②以葡萄糖为碳源的培育基,不补充培育基,不去除代谢物;③以葡萄糖和乳糖为碳源的培育基,不补充培育基,不去除代谢物。依据培育结果绘制的一段时间内菌体数的对数随时间改变的趋势如下图所示。假设三种培育基中初始总糖量和大肠杆菌数量分别相等,则①②③三种条件依次对应的趋势图是()A.甲、乙、丙 B.乙、丙、甲C.丙、甲、乙 D.丙、乙、甲答案:C解析:在总糖量和大肠杆菌数量分别相等的状况下,用葡萄糖培育大肠杆菌后,①不断补充培育基,刚好去除代谢物,微生物的数量将不断增加;②不补充培育基,不去除代谢物,微生物数量达到肯定程度后不再增加,甚至削减;③用以葡萄糖和乳糖为碳源的培育基培育微生物,不补充培育基,不去除代谢物,当葡萄糖耗尽后,经过调整期,大肠杆菌可利用乳糖,其数量会再有所增加。所以三者对应曲线应依次为丙、甲、乙。5.(不定项选择题)在“酵母菌的纯培育”试验中,划线接种、培育结果分别如图甲、图乙所示。下列有关叙述错误的是()A.接种前应对培育基进行高压蒸汽灭菌,然后调pHB.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落C.接种过程中至少须要对接种环灼烧两次D.甲中a区域为划线的起始位置答案:ACD解析:培育基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌,灭菌前调pH。连续划线使菌液中的菌体不断被稀释,最终可得到由单个微生物繁殖形成的单菌落。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,因此依据图中划线依次(d→c→b→a),整个划线过程中至少须要对接种环灼烧5次。从其次次划线起先,每次划线的菌种来自上一区域的末端,因此划线的起始区域酵母菌数量多,由图乙可知,甲中d区域菌落多,为划线的起始位置。6.大肠杆菌是人和动物肠道寄生菌,在肯定条件下会引起胃肠道等局部组织感染。检验水样中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准,常用滤膜法测定,其操作流程如下图所示。大肠杆菌的代谢物能与伊红美蓝(EMB培育基的指示剂)反应,使菌落呈黑色。下列对试验操作的分析,错误的是()A.测定前,滤杯、滤膜和滤瓶均需灭菌处理B.配制好的培育基一般倒置,防止冷凝水滴至培育基造成污染C.配制EMB培育基时,需考虑大肠杆菌所须要的养分物质及pH等条件D.EMB培育基属于选择培育基,只有大肠杆菌能正常生长并形成黑色菌落答案:D解析:EMB培育基属于鉴别培育基,没有选择作用。7.炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平,呈竹节状排列,菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者,可依据噬菌体的宿主专一性,通过试验确诊。(1)细菌培育:采集疑似患者的样本,分别培育,获得可疑菌落。(2)细菌鉴定:试验流程如下图所示。①对配制的液体培育基等需采纳法灭菌;试验所用液体培育基的碳源为(填“无机碳”或“有机碳”)。

②选择可疑菌落制片后,用视察,可看到呈竹节状排列的杆菌。

③接种可疑菌后,在温度为35℃的环境中培育24h,液体培育基变浑浊,缘由是。比照组试管中应加入,与试验组同时培育6h后,若试验组液体培育基的浑浊度比比照组(填“高”或“低”),则可确定疑似患者被炭疽杆菌感染;反之,则解除。

④对解除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有

答案:(2)高压蒸汽灭菌有机碳显微镜细菌大量繁殖等量的生理盐水低吞噬细胞、浆细胞解析:(2)①培育微生物的培育基常用高压蒸汽灭菌法灭菌;由于炭疽杆菌是异养型微生物,培育基中应加有机碳作碳源。②炭疽杆菌呈竹节状排列,需借助显微镜视察。③接种培育后,液体培育基由澄清变浑浊,应是细菌大量繁殖所致。试验应遵循单一变量原则和等量原则,试验组加入了生理盐水配制的澄清噬菌体液,比照组应加入等量的生理盐水;若疑似患者被炭疽杆菌感染,则培育6h后,试验组中的炭疽杆菌由于噬菌体侵染而大量裂解死亡,浑浊度会明显低于比照组。④接种疫苗后,机体通过体液免疫产生抗体,与此相关的细胞有吞噬细胞、T细胞、B细胞和浆细胞。8.某中学生物爱好小组在进行A细菌的培育过程中,发觉了另一种B细菌,在B细菌四周A细菌的生长繁殖受到抑制,这有可能是B细菌产生了不利于(抑制)A细

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