组培关键技术-外植体选择及外植体灭菌消毒（植物组织培养技术）

外植体选取外植体外植体是选取活体植物的一部分作为组织培养的植物材料海棠外植体海棠外植体海棠是选取成熟的2-4cm叶片做外植体进行植物组织培养杂交兰外植体选取杂交兰外植体选取杂交兰选取幼嫩的根尖进行组培快繁蝴蝶兰外植体选择蝴蝶兰外植体选择蝴蝶兰选取花梗上的叶芽为外植体进行诱导蓝莓外植体选择蓝莓外植体选择蓝莓选择半木质化的当年生枝条为外植体进行诱导快繁粗肋草外植体选择粗肋草外植体选择粗勒草选择带节的茎段为外植体进行诱导培养外植体选取原则首先选择的母本要品种优良、无病虫害的健壮植株为外植体，母本健壮，培育的后代才会健壮。外植体选取原则第二，选择的部位要合适，选择幼嫩的，生长旺盛的部位，而避免病残弱的部位。外植体选取原则第三，选取的季节要合适，要在植物生长旺盛的季节，而避免在植物休眠的季节。大部分植物生长在春季和秋季生长旺盛。外植体选取原则第四，选择的天气要合适，尽可能在晴朗的天气，避免在下雨时取外植体。另外在选取的前1至2天不要浇水，利于外植体诱导成功率的提高。在炎热的夏季，避免在中午取材防止植物失水丧失活力。外植体选取原则第五，工具要选择锋利的无锈的钢刀或钢剪，避免取材时对母本感染。外植体选取原则-蝴蝶兰外植体的选取蝴蝶兰是一种高档的室内花卉，其种子细小，自然条件下播种困难,而且种子繁殖后代会产生变异，生产过程中采用植物组织培养为主要育苗方式蝴蝶兰外植体的选择选择的品种要选择目前市场上受欢迎的优良品种，这样组培的组培苗才有市场竞争力。目前市场上比较受欢迎的蝴蝶兰品种有：大辣椒、火凤凰等。蝴蝶兰外植体的选择要选择优良的个体作为外植体，主要从叶片、基部、根系、花色和花序以及花梗的粗壮度等几个方面评价。蝴蝶兰外植体的选择一、叶片，叶片要厚实，有光泽，能很好的进行光合作用。蝴蝶兰外植体的选择二、基部、基部要肥大，能为蝴蝶兰生长储存足够养分蝴蝶兰外植体的选择三、根系发达，能更好的吸收养分，能使花期维持更久蝴蝶兰外植体的选择四、花色漂亮、花瓣厚实、花序整齐蝴蝶兰外植体的选择五、花梗粗壮，诱导的丛芽也会粗壮、健康外植体选取原则选择的部位是蝴蝶兰的花梗，蝴蝶兰的花梗是其生长旺盛的部位，其花梗上的叶芽容易诱导出蝴蝶兰小苗。外植体选取原则季节要适合，要在蝴蝶兰生长旺盛的季节，自然状态下，蝴蝶兰在春季生长旺盛，但是为了满足市场的需求，会利用温室对其生长期进行调整，在温室条件下20-30℃蝴蝶兰生长旺盛。外植体选取原则天气要合适，尽可能在晴朗的天气，避免在下雨时取外植体。外植体选取原则工具要选择这种无锈的钢刀或钢剪，避免母本感染，工具要锋利，避免对母本材料进行挤压式的伤害。外植体选取原则选好后我们就用消毒过的工具将花梗从母本上切除取下来，切的时候要注意要从基部留取部分以对母本进行保护，这样我们就选取了一株优良的母本做外植体。外植体消毒一、外植体预处理常用方法用75%的酒精对植物体表进行擦拭一、外植体预处理常用方法对材料进行流水处理一、外植体预处理常用方法对植物材料进行洗手液或洗洁剂浸泡处理，特别是对于植物体表有绒毛的植物外植体。一、外植体预处理常用方法对植物材料进行低温处理，减少后期褐化一、外植体预处理常用方法对植物材料进行清水催芽处理，选取催出的新芽进行外植体消毒利于后期消毒，特别是一些常规不易消毒的植物可以用此方法二、外植体消毒处理前期处理完成后我们就要对植物材料进行消毒处理，消毒处理的目的就是为了去除植物体表和体内的菌类物质，使其得到我们需要的无菌材料。二、常见消毒剂浓度、消毒时间及灭菌效果药物种类浓度/(%)灭菌时间/min效果酒精70-750.1-2（+）好升汞（氯化汞）0.1-0.22-25（+++）最好漂白粉饱和上清液5-30（++）很好次氯酸钠25-30（++）很好二、常见消毒剂浓度、消毒时间及灭菌效果药物种类浓度/(%)灭菌时间/min效果酒精70-750.1-2（+）好升汞（氯化汞）0.1-0.2-25（+++）最好漂白粉饱和上清液5-30（++）很好次氯酸钠25-30（++）很好不同的消毒剂有各自的优缺点，如升汞消毒效果较好，可是对人体有毒，操作需要小心，而且在植物体内不易清除；次氯酸钠、漂白粉等毒性低且易清除，只是消毒效果相对较差。二、常见消毒剂浓度、消毒时间及灭菌效果药物种类浓度/(%)灭菌时间/min效果酒精70-750.1-2（+）好升汞（氯化汞）0.1-0.23-25（+++）最好漂白粉饱和上清液5-30（++）很好次氯酸钠25-30（++）很好有些植物材料我们会同时选取两种或两种以上的消毒剂配合使用对植物进行消毒处理三、蝴蝶兰外植体消毒1、蝴蝶兰花梗的前期处理Ⅰ蘸有75%酒精的脱脂棉从基部往顶端擦拭1、蝴蝶兰花梗的前期处理Ⅱ要求：刀片锋利，快、准切段芽上1.5-1.8CM,芽下1.8-2.2CM1、蝴蝶兰花梗的前期处理Ⅲ将花梗切分为4种不同的级别，方便消毒2、蝴蝶兰花梗的消毒处理Ⅰ75%酒精消毒30秒2、蝴蝶兰花梗的消毒处理Ⅱ无菌水冲洗2次2、蝴蝶兰花梗的消毒处理Ⅲ0.1%升汞消毒8-25分钟不同级别花梗对应消毒时间花梗级别消毒时间（分钟）顶芽8嫩芽12-15中芽15-18老芽18-252、蝴蝶兰花梗的消毒处理Ⅳ无菌水冲洗3次3、蝴蝶兰花梗消毒后处理切段（芽上0.5-0.7CM,芽下1-1.2CM）4、无菌接种5、