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文档简介

ICS65.020.30

B43

备案号:58397-2018DB21

辽宁省地方标准

DB21/T2739—2017

绒山羊鲜精稀释与保存技术操作规程

Thetechnologyoperatingproceduresofdilutingandsavingforfreshsemenof

cashmeregoats

DB21/T2739—2017

绒山羊鲜精稀释与保存技术操作规程

1范围

本标准规定了绒山羊鲜精稀释与保存过程中的基本要求、品质检查、稀释、分装、标记、保存和

使用等技术内容。

本标准适用于绒山羊人工授精技术中的鲜精稀释、保存及精液处理。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

NY/T2893-2016绒山羊饲养管理技术规范

DB21/T2434-2015辽宁绒山羊人工授精技术操作规程

3术语与定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

鲜精Freshsemen

原精及其稀释后未经冷冻的精液。

3.2

原精Theoriginalsemen

采自公羊未经处理的精液。

3.3

精子活力spermvitality

在显微镜下,精液中直线运动的精子数量占精子总数的比例。

3.4

精子密度spermdensity

每毫升精液中含有的精子数量。

3.5

1

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稀释比例Dilutionrate

原精与稀释液的体积比例。

4基本要求

4.1鲜精处理环境

室内,室温不低于25℃,不高于35℃,无阳光直射、无烟尘、无强烈辐射。

4.2器材处理

根据材质特点,做好清洗、消毒、烘干处理,使用前保持干燥、洁净并与精液等温。

4.3采精季节

以8月中旬~11月下旬和4月中旬~5月下旬为宜。

4.4供精公羊

选择一级以上种公羊作为供精公羊,日常饲养管理参照NY/T2893-2016的规定。

4.5精液品质

严格按照DB21/T2434-2015相关要求进行采精,原精活力和稀释后的活力要求达到60%以上。

4.6保存期标定

合格原精在稀释与保存前,要进行活力、存活时间和稀释倍数的测定,根据上述测定指标,确定供

精公羊用于输精的精液最长保存时间,具体内容详见附录A。

5品质检查

原精的检查方法参照DB21/T2434-2015进行操作,稀释后的精液检查活力和密度,操作方法同原

精检查法。鲜精检查后做好相关记录,详见附录B。

6稀释

6.1稀释液

6.1.1自配稀释液

所用试剂均为化学分析纯试剂,用双重蒸馏水或超纯水溶解,调整稀释液PH值至6.8~7.0,推荐稀

释液配方及配制方法参照附录C。

6.1.2商品稀释液

按产品说明书使用和保存,过期或变色的稀释液禁止使用。

6.1.3稀释液标记

配制的精液稀释液在使用前要标记稀释液配方代号、配制时间。

2

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6.1.4稀释液保存

商品稀释液按照产品说明书保存;自配稀释液低温冷藏,冷藏温度控制在0℃~5℃,保存期不超

过7天。

6.2鲜精稀释

将稀释液放入水浴锅内加热至35℃,同时将集精杯的水温调整并保持35℃,原精采集后应在20

分钟内等温稀释。先将装有原精的集精杯放水浴锅内,然后将稀释液沿集精杯内壁缓缓加入,随后将原

精和稀释液轻轻混匀;将原精先进行2~4倍稀释,混匀后再稀释到规定比例,稀释比例的确定参照附录

D。

7鲜精分装与标记

7.1鲜精分装

鲜精稀释后采用瓶、管等容器分装并密封,容器材质应对精子无害并经清洗、干燥和灭菌处理。容

器分装精液时应与精液等温,根据精液体积选择不同容量的容器,尽量充满。

7.2鲜精标记

分装后的鲜精应标明生产单位、品种、公羊号、生产日期、保存期、稀释液配方代号、精液量、输

配剂量。

8鲜精保存

8.1保存方法

稀释后的鲜精用8~12层纱布包裹或直接放入等温水中,再置于0℃~5℃恒温箱中存放,每间隔8

小时,将精液重新轻轻混匀。

8.2鲜精抽检

使用前对鲜精进行品质检查,镜检温度为37℃~38℃,检查合格后可用于输精。

8.3鲜精运输

运输过程中,将精液放置到0℃~5℃的恒温箱中,避免剧烈震荡。

8.4鲜精保存时间

以生理盐水、5%的葡萄糖溶液、2.9%的柠檬酸钠溶液稀释精液时,稀释倍数不超过3倍,稀释后

立即使用,最长不超过2小时。

使用商品稀释液或自配稀释液进行鲜精稀释,使用前要测定不同供精公羊个体稀释鲜精后的精子参

数,主要包括活力变化、在38℃的存活时间等技术参数,根据技术参数值确定鲜精保存的最长时间,

原则上不宜超过5天。

9鲜精使用

3

DB21/T2739—2017

取用鲜精时应快速操作,根据输精用量取出相应的精液,取出精液后迅速将精液保存容器盖严,取

出的精液不再放回保存容器内,一次性使用完毕。在取用过程中,防止未取用精液温度回升。

4

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AA

附录A

(规范性附录)

鲜精保存期检测标定表

检12243648607284

存存存存存存存

与畸畸畸畸畸畸畸

活活活活活活活活活活活活活活

指形形形形形形形

力时力时力时力时力时力时力时

标率率率率率率率

倍间间间间间间间

2

4

10

20

备注:活力是指37℃~38℃下镜检活力,存活时间是指将精液置于38℃下精子全部死亡的时间,畸形率

为畸形精子占精子总数的百分率。

5

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BB

附录B

(资料性附录)

公羊鲜精保存登记表

保存第1保存第2保存第3保存第1

供生预每每份天天天天

公畸保

精产品配份有效摇摇摇摇备

羊形质

单日种数剂精子活动活动活动活动注

号率期

位期量量数力时力时力时力时

间间间间

6

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CC

附录C

(资料性附录)

推荐稀释液配方及配制方法

取三羟甲基氨基甲烷2.42g,柠檬酸1.34g,葡萄糖1g,EDTA-2Na0.15g,加入超纯水80ml,

煮沸即冷却至38℃,加入青霉素1×105IU,链霉素1×105IU,新鲜鸡蛋卵黄20ml,混匀备用。

7

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DD

附录D

(资料性附录)

稀释比例确定方法

稀释后的鲜精,每一次输精剂量输入的有效精子数应保证发情母羊正常受孕,每剂的输精剂量为

0.25ml~0.5ml,具体可参照如下公式确定最终稀释比例。

plV

X=1:(01)。

k

在公式中,

p—原精精子密度,单位为1×108/ml;

V0—每次输入稀释后的精液体积,单位为ml,为设定值;

k—每次输精输入的有效精子数量,单位为1×108,为设定值;

l—稀释后的精子活力,单位为%;

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