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文档简介
ICS65.020.30
B43
备案号:58397-2018DB21
辽宁省地方标准
DB21/T2739—2017
绒山羊鲜精稀释与保存技术操作规程
Thetechnologyoperatingproceduresofdilutingandsavingforfreshsemenof
cashmeregoats
DB21/T2739—2017
绒山羊鲜精稀释与保存技术操作规程
1范围
本标准规定了绒山羊鲜精稀释与保存过程中的基本要求、品质检查、稀释、分装、标记、保存和
使用等技术内容。
本标准适用于绒山羊人工授精技术中的鲜精稀释、保存及精液处理。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
NY/T2893-2016绒山羊饲养管理技术规范
DB21/T2434-2015辽宁绒山羊人工授精技术操作规程
3术语与定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
鲜精Freshsemen
原精及其稀释后未经冷冻的精液。
3.2
原精Theoriginalsemen
采自公羊未经处理的精液。
3.3
精子活力spermvitality
在显微镜下,精液中直线运动的精子数量占精子总数的比例。
3.4
精子密度spermdensity
每毫升精液中含有的精子数量。
3.5
1
DB21/T2739—2017
稀释比例Dilutionrate
原精与稀释液的体积比例。
4基本要求
4.1鲜精处理环境
室内,室温不低于25℃,不高于35℃,无阳光直射、无烟尘、无强烈辐射。
4.2器材处理
根据材质特点,做好清洗、消毒、烘干处理,使用前保持干燥、洁净并与精液等温。
4.3采精季节
以8月中旬~11月下旬和4月中旬~5月下旬为宜。
4.4供精公羊
选择一级以上种公羊作为供精公羊,日常饲养管理参照NY/T2893-2016的规定。
4.5精液品质
严格按照DB21/T2434-2015相关要求进行采精,原精活力和稀释后的活力要求达到60%以上。
4.6保存期标定
合格原精在稀释与保存前,要进行活力、存活时间和稀释倍数的测定,根据上述测定指标,确定供
精公羊用于输精的精液最长保存时间,具体内容详见附录A。
5品质检查
原精的检查方法参照DB21/T2434-2015进行操作,稀释后的精液检查活力和密度,操作方法同原
精检查法。鲜精检查后做好相关记录,详见附录B。
6稀释
6.1稀释液
6.1.1自配稀释液
所用试剂均为化学分析纯试剂,用双重蒸馏水或超纯水溶解,调整稀释液PH值至6.8~7.0,推荐稀
释液配方及配制方法参照附录C。
6.1.2商品稀释液
按产品说明书使用和保存,过期或变色的稀释液禁止使用。
6.1.3稀释液标记
配制的精液稀释液在使用前要标记稀释液配方代号、配制时间。
2
DB21/T2739—2017
6.1.4稀释液保存
商品稀释液按照产品说明书保存;自配稀释液低温冷藏,冷藏温度控制在0℃~5℃,保存期不超
过7天。
6.2鲜精稀释
将稀释液放入水浴锅内加热至35℃,同时将集精杯的水温调整并保持35℃,原精采集后应在20
分钟内等温稀释。先将装有原精的集精杯放水浴锅内,然后将稀释液沿集精杯内壁缓缓加入,随后将原
精和稀释液轻轻混匀;将原精先进行2~4倍稀释,混匀后再稀释到规定比例,稀释比例的确定参照附录
D。
7鲜精分装与标记
7.1鲜精分装
鲜精稀释后采用瓶、管等容器分装并密封,容器材质应对精子无害并经清洗、干燥和灭菌处理。容
器分装精液时应与精液等温,根据精液体积选择不同容量的容器,尽量充满。
7.2鲜精标记
分装后的鲜精应标明生产单位、品种、公羊号、生产日期、保存期、稀释液配方代号、精液量、输
配剂量。
8鲜精保存
8.1保存方法
稀释后的鲜精用8~12层纱布包裹或直接放入等温水中,再置于0℃~5℃恒温箱中存放,每间隔8
小时,将精液重新轻轻混匀。
8.2鲜精抽检
使用前对鲜精进行品质检查,镜检温度为37℃~38℃,检查合格后可用于输精。
8.3鲜精运输
运输过程中,将精液放置到0℃~5℃的恒温箱中,避免剧烈震荡。
8.4鲜精保存时间
以生理盐水、5%的葡萄糖溶液、2.9%的柠檬酸钠溶液稀释精液时,稀释倍数不超过3倍,稀释后
立即使用,最长不超过2小时。
使用商品稀释液或自配稀释液进行鲜精稀释,使用前要测定不同供精公羊个体稀释鲜精后的精子参
数,主要包括活力变化、在38℃的存活时间等技术参数,根据技术参数值确定鲜精保存的最长时间,
原则上不宜超过5天。
9鲜精使用
3
DB21/T2739—2017
取用鲜精时应快速操作,根据输精用量取出相应的精液,取出精液后迅速将精液保存容器盖严,取
出的精液不再放回保存容器内,一次性使用完毕。在取用过程中,防止未取用精液温度回升。
4
DB21/T2739—2017
AA
附录A
(规范性附录)
鲜精保存期检测标定表
检12243648607284
测
时
间
存存存存存存存
与畸畸畸畸畸畸畸
活活活活活活活活活活活活活活
指形形形形形形形
力时力时力时力时力时力时力时
标率率率率率率率
倍间间间间间间间
数
2
4
10
20
备注:活力是指37℃~38℃下镜检活力,存活时间是指将精液置于38℃下精子全部死亡的时间,畸形率
为畸形精子占精子总数的百分率。
5
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BB
附录B
(资料性附录)
公羊鲜精保存登记表
保存第1保存第2保存第3保存第1
供生预每每份天天天天
公畸保
精产品配份有效摇摇摇摇备
羊形质
单日种数剂精子活动活动活动活动注
号率期
位期量量数力时力时力时力时
间间间间
6
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CC
附录C
(资料性附录)
推荐稀释液配方及配制方法
取三羟甲基氨基甲烷2.42g,柠檬酸1.34g,葡萄糖1g,EDTA-2Na0.15g,加入超纯水80ml,
煮沸即冷却至38℃,加入青霉素1×105IU,链霉素1×105IU,新鲜鸡蛋卵黄20ml,混匀备用。
7
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DD
附录D
(资料性附录)
稀释比例确定方法
稀释后的鲜精,每一次输精剂量输入的有效精子数应保证发情母羊正常受孕,每剂的输精剂量为
0.25ml~0.5ml,具体可参照如下公式确定最终稀释比例。
plV
X=1:(01)。
k
在公式中,
p—原精精子密度,单位为1×108/ml;
V0—每次输入稀释后的精液体积,单位为ml,为设定值;
k—每次输精输入的有效精子数量,单位为1×108,为设定值;
l—稀释后的精子活力,单位为%;
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