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文档简介

PHARMACEUTICAL

COLLEGE紫外分光光度法分析化学实验药物分析教研室PHARMACEUTICAL

COLLEGE紫外分光光度法维生素B12注射液鉴别、检查和含量测定P91实验十四PHARMACEUTICAL

COLLEGE1、维生素B12主要来源是动物性食物，存在于动物肝脏、牛肉、猪肉、蛋、牛奶和奶酪中;2、在吸收时需与钙结合才能有利于人体的机能活动;3、维生素B12能促进红血球的形成和再生，防止贫血；4、促进儿童发育；能使脂肪、碳水化合物、蛋白质适宜地为体内所利用。5、主要用于治疗恶性贫血，与叶酸合用治疗因抗叶酸药、脂肪泻等引起的巨幼红细胞性贫血。也用于多发性神经炎、肝炎、肝硬化、白细胞减少症等的辅助治疗，目前疗效有争议。口服维生素B12仅用于已证实维生素B12吸收正常的营养性维生素B12缺乏。紫外分光光度法PHARMACEUTICAL

COLLEGE紫外分光光度法PHARMACEUTICAL

COLLEGE一、实验目的：1、掌握Uvmini-1240型的使用方法。2、掌握维生素B12注射液的紫外分光光度法鉴别及含量测定。3、掌握吸收系数法定量测定的计算公式。4、熟悉绘制吸收曲线的一般方法。紫外分光光度法PHARMACEUTICAL

COLLEGE二、主要仪器与试药维生素B12注射液、维生素B12对照品Mini-1240型紫外-可见分光光度仪、石英比色皿、50ml容量瓶，5ml

吸量管精密仪器，小心！紫外分光光度法PHARMACEUTICAL

COLLEGE三、实验准备1.用标示量0.5mg/ml维生素B12配制贮备液（样品）：吸量管精密量取2.5ml于50ml容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液（约25

μg/ml）。2.25

μg/ml对照品溶液（实验室提供）紫外分光光度法PHARMACEUTICAL

COLLEGE四、实验内容实验原理：维生素B12分子结构中有共轭体系，具有紫外吸收，故可采用紫外分光光度法鉴别和测定含量。实验步骤：1、取B12贮备液（约25μg/ml），以蒸馏水做空白液做光谱图（粗扫描），在278nm，361nm，550nm处有吸收峰。2、精测：在以上278nm，361nm，550nm波长分别±1

范围内测定吸光度（每转换一次波长以水做空白）记录各最大吸收值。紫外分光光度法PHARMACEUTICAL

COLLEGE五、实验结果紫外分光光度法鉴别：维生素B12吸收光谱上有三个吸收峰：278

nm、361

nm、550

nm。检查：A361/A278

应为1.70-1.88，A361/A550应为3.15-3.45

。含量测定：

吸收系数法：利用上述361nm处测定得到的吸收度，按其吸收系数E1％1cm=207

计算含量及标示量百分含量。PHARMACEUTICAL

COLLEGE紫外分光光度法PHARMACEUTICAL

COLLEGE六、思考题如果取注射液水2ml稀释30倍，在361

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