brca1和ki-67蛋白在新疆三阴性乳腺癌组织中的表达及临床意义

brca1和ki-67蛋白在新疆三阴性乳腺癌组织中的表达及临床意义

乳腺癌是一种高度异质性的肿瘤。根据免疫组织化学，雌花受体（er）、雌激素受体（pro）和人类表皮生长因子受体2（人类皮肤细胞细胞细胞每个二的生长因子（tnbc）被称为三阴性受体乳。其临床上的表现以复发早、进展快、生存期短、对内分泌治疗及抗HER-2靶向治疗不敏感为特征。乳腺癌易感基因1(breastcancersusceptibilitygeneone,BRCA1)结构和功能的异常,与有家族性乳腺癌病史或者卵巢癌的乳腺癌发生密切相关;在散发性乳腺癌的研究中也表明,BRCA1是一个抑癌基因,该基因是与TNBC有相关的分子特征,BRCA1相关性乳腺癌与TNBC有较大相关性。Ki-67作为细胞增殖状态的重要标志,是目前较为成熟及肯定的肿瘤增殖指标之一,Ki-67的表达与乳腺癌分子分型有关,其高表达是预后不良因素。TNBC作为特殊的分子类型可能与之关系密切。新疆不同民族由于遗传背景及生活方式的不同,乳腺癌的发生可能存在差异,本研究选择维吾尔族及汉族TNBC为研究对象,对其癌组织中BRCA1及Ki-67蛋白表达进行相关研究,探讨不同民族TNBC中BRCA1和Ki-67蛋白表达的差异及临床特点。1材料和方法1.1tnbc患者的年龄分布收集新疆医科大学附属肿瘤医院2009-01-01-2011-12-30就诊的原发性乳腺癌手术标本,根据免疫组化染色检测结果,选取ER、PR和HER-23个受体均为阴性的TNBC患者,维吾尔族115例,年龄21~72岁,中位年龄46.5岁;汉族120例,年龄24~71岁,中位年龄47.5岁;以及同院同期乳腺良性纤维腺瘤35例。乳腺癌患者均首次诊断为乳腺癌,排除妊娠期、哺乳期或有其他恶性肿瘤病史。1.2ki-97和brca1蛋白表达水平检测标本用10%甲醛固定,石蜡包埋,3μm切片,运用免疫组化二步法检测Ki-67和BRCA1蛋白表达。用已知阳性的乳腺癌组织切片做阳性对照,以PBS代替一抗做阴性对照。试剂盒和Ki-67及BRCA1抗体购自北京中衫金桥生物技术有限公司。1.3小细胞或细胞者染色Ki-67主要定位于细胞核,其阳性表达以细胞核内着色棕黄色颗粒作为判断标准。BRCA1蛋白在正常乳腺表达于细胞核,异型上皮表达定位于细胞质,乳腺癌组织仅细胞质着色为阳性,细胞核或细胞核及细胞质均染色视为阴性。免疫组化结果判定采用半定量分级法,以阳性细胞数≤10%为阴性(-),>10%~25%为弱阳性(+),>25%~50%为阳性(++),>50%为强阳性(+++)。每张切片均在2位经验丰富的病理专家独立作出判定。1.4各变量间差异及相关性分析应用SPSS16.0进行统计学分析,各组间差异采用χ2检验,相关性研究采用Spearman等级Kendall相关分析进行数据统计。检验水准α=0.05。2结果2.1tnbc中ki-97表达情况BRCA1在乳腺纤维腺瘤中表达于细胞核,34例阳性表达,表达率为97.1%(34/35);在乳腺癌中的阳性表达定位于细胞质(图1A),阳性表达率为39.6%(93/235),失表达142例。维吾尔族TNBC中的失表达73.0%(84/115),高于汉族的48.3%(58/120),维、汉两组表达差异有统计学意义,χ2=14.99,P<0.05。Ki-67阳性表达位于细胞核(图1B),在乳腺癌中阳性表达为81.3%(191/235),高于乳腺纤维腺瘤组20.0%(7/35),差异有统计学意义,χ2=11.04,P<0.05。而维、汉两组表达分别为78.3%(90/115)和84.2%(101/120),差异无统计学意义,χ2=1.35,P>0.05。2.2两组brca1和ki-97表达情况比较BRCA1蛋白表达与肿瘤大小无关,而维、汉两族之间BRCA1表达差异有统计学意义,P<0.05。随着组织学分级的增高,BRCA1蛋白阳性表达率降低;淋巴结转移组BRCA1蛋白阳性表达率低于淋巴结无转移组;年龄≤40岁组BRCA1蛋白阳性表达率低于年龄>40岁组,差异均有统计学意义。Ki-67蛋白表达与肿瘤大小无关,两民族间差异无统计学意义;但随着组织学分级的增高阳性表达率增高;淋巴结转移组阳性表达率高于淋巴结无转移组;年龄≤40岁组阳性表达率高于年龄>40岁组,差异均有统计学意义,P<0.05(表1)。2.3表达阳性表达在93例BRCA1表达阳性的维族、汉族TNBC中,有63例Ki-67表达阳性,阳性率为67.7%;而142例表达阴性者,Ki-67呈阳性表达者128例,阳性率为90.1%。经统计学分析,BRCA1和Ki-67在维族、汉族TNBC组织中表达存在负相关,r=-0.281,P<0.05。3保乳手术后brca1蛋白的表达乳腺癌是一种生物学特征高度异质性的恶性肿瘤,在临床和病理学中的表现具有多样化的特点,其主要的预后指标有肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、激素受体情况以及组织学分级等,而TNBC是乳腺癌中的研究热点。国内外学者研究发现,BRCA1表达异常与乳腺癌的发生和发展有关,且与年龄呈负相关。有研究表明,不同人种之间BRCA1蛋白表达情况存在较大差异,尤其是在高级别、TNBC中BRCA1基因突变频率较高。新疆维吾尔族乳腺癌患者在临床病理特征上较汉族患者表现为原发肿块较大、腋窝淋巴结转移数目较多、雌孕激素受体阳性表达率低、年轻及TNBC比例较高等特点,这可能与BRCA1关系密切。BRCA1蛋白是DNA结合蛋白,突变后定位在细胞质内。本研究中,其表达蛋白以细胞质为主,属于一种错位现象,应与乳腺癌的发生和转移有关。本研究结果显示,BRCA1表达在维吾尔族和汉族TNBC之间有差异,维吾尔族失表达率高于汉族,失表达在年龄≤40岁的乳腺癌患者高于年龄>40岁患者,同时BRCA1表达随着肿瘤组织学分级的增高及伴随淋巴结的转移,阳性表达率降低,与文献报道结果相似。在BRCA1失表达的142例患者中,组织学Ⅱ级39例,Ⅲ级88例,这种表达的降低或缺失可能与维吾尔族早发性乳腺癌有关,提示TNBC恶性程度高,BRCA1蛋白表达下降和丧失可能与乳腺癌的恶性程度及其发生和发展相关。民族间的差异也提示,对维吾尔族TNBC组织BRCA1蛋白表达检测,可能为其发病特点的研究及预后判断提供一些依据。Ki-67是增殖细胞核抗原及核增殖细胞表达的蛋白质,该指数高说明细胞增殖速度增快,是反映肿瘤增殖活性最可靠的指标之一。研究显示,Ki-67的表达与肿瘤病理学分级及临床分期有一定相关性;同时也与乳腺癌的组织学分级和淋巴结转移情况密切相关。TNBC临床特点与Ki-67表达关系更为密切,近年来研究表明,TNBC组织中Ki-67的表达显著增强与乳腺癌分子分型有关。本研究结果显示,Ki-67在年龄≤40岁的乳腺癌者中表达高于年龄>40岁者及乳腺纤维腺瘤,表明青年乳腺癌的肿瘤细胞增殖速度较快;同时随组织学分级增高Ki-67阳性表达率增高,在有淋巴结转移组Ki-67的阳性表达率明显高于淋巴结无转移组,表明Ki-67在TNBC中的表达与临床分期晚、病理分级高和淋巴结转移多等特征相一致,提示TNBC恶性程度较高。国外有研究结果显示,在西班牙后裔人群中BRCA1、ERβ阴性的乳腺癌患者中,Ki-67呈阳性表达。本研究TNBC中BRCA1与Ki-67表达负相关,表明TNBC细胞增殖速度快,可能BRCA1相关性乳腺癌与