多环芳烃对裂纹盘鲍早期发育的毒性效应

多环芳烃对裂纹盘鲍早期发育的毒性效应

多环芳烃（pahs）作为化工溶剂广泛应用于化学工业中。这是石油及其副产品的重要组成部分。近年来，随着工业活动的日益频繁，水生生态系统中的多环芳烃含量显著增加。皱纹盘鲍(Haliotisdiscushannai)，属于原始腹足目，腹足纲。在我国鲍类养殖的总产量中占有主导地位，是我国北方海域一种重要的海洋养殖经济种类。作为海洋中的珍品，皱纹盘鲍肉质鲜美，营养丰富，有多种医用功效和抗癌作用，食用和药用价值极高1材料和方法表面活性剂1.1实验方法和试剂实验皱纹盘鲍购自大连海宝渔业有限公司，挑选健康的个体，壳长8～9cm，实验海水为大连黑石礁海域的砂滤海水，每24h定时换水，投喂鲍鱼体重30%的海带，24h持续微充气。实验过程中水体控制在水温(20±1)℃，盐度30～31,pH8.1～8.2，溶解氧保持在6mg·L苯并[a]芘和9,10-二甲基蒽，纯度大于96%，购自Sigma公司;丙酮(纯度99.5%)、过氧化氢(体积分数为30%)和三羟甲基氨基甲烷购自国药集团化学试剂有限公司。苯并[a]芘和9,10-二甲基蒽用丙酮作助溶剂配制成高浓度的储备液，实验时根据需要，向实验海水中添加不同体积的储备液稀释至实验所需的不同多环芳烃浓度。1.2实验方法1.2.1预实验结果讨论受精率毒性实验在1L玻璃烧杯中进行，根据预实验的结果，分别确定苯并[a]芘和9,10-二甲基蒽的实验浓度范围，设置为0.1、0.5、1、5、10和20μg·L1.2.2[a]和9,10-二甲基实验实验过程中水体控制在与培养条件相同的条件下，在胚胎生长发育阶段进行避光培养，不曝气，不投饵。经预实验，分别确定苯并[a]芘和9,10-二甲基蒽的实验浓度范围，按等对数间距法设置4个质量浓度梯度组，并设一个空白对照组和一个助溶剂对照组(丙酮)，每个处理组设立3个平行实验。苯并[a]芘和9,10-二甲基蒽浓度设置为0.1、0.5、1和5μg·L根据预实验结果，遵循相关的养殖以及毒性试验方法标准，苯并[a]芘实验组浓度设置为1、5、10和20μg·L1.3数据统计与分析采用Excel2010软件对实验数据进行处理，求出死亡率和2种多环芳烃浓度对数的回归方程，分别计算每组的LC实验结果采用SPSS19.0分析软件进行单因素方差分析，分析处理组和对照组之间的差异，在数据处理中，采用T-test检验，P<0.05、P<0.01时表示差异显著，以“*”、“**”表示。2结果结果2.1多环芳烃对鲍精的影响苯并[a]芘和9,10-二甲基蒽对皱纹盘鲍卵子受精率的影响结果如图1和图2所示，浓度为0.5、1、5、10和20μg·L2.2胚胎发育的影响多环芳烃对皱纹盘鲍胚胎的毒性作用主要表现为，胚胎发育时间延迟，胚胎的生长受到抑制作用。如图3和图4所示，经0.1、0.5、1和5μg·L2.32各组小鼠口服苯并[a]和9,10-二甲基处理时聚合酶链反应由图5和图6可知，不同浓度的苯并[a]芘和9,10-二甲基蒽对皱纹盘鲍作用3～12d后的死亡率。随着苯并[a]芘和9,10-二甲基蒽处理浓度的升高，皱纹盘鲍幼体死亡率升高，呈剂量-效应关系。10、20μg·L丙酮对照组和空白对照组的T-test检验参数P=0.3>0.05，可知丙酮对照组和空白对照组死亡率没有显著差异。与空白对照做T-test分析，1、5、10和20μg·L2.42以各种化合物为多环芳烃的幼基不同剂量的苯并[a]芘和9,10-二甲基蒽对皱纹盘鲍幼体LC3误差生物学机制海洋环境中多环芳烃有机污染物主要来源于海洋溢油事故和沿海石油化工业的废水排放，对海洋生物生存和自然资源造成了严重破坏，已被列为我国环境优先控制污染物名单我国有关多环芳烃对海洋鲍类的生殖毒性作用的研究表明，胚胎和幼体是海洋生物对环境污染物最为敏感的时期，关于胚胎和幼体的研究将更直观地反映海洋受污染的现状本实验皱纹盘鲍胚胎和幼体在暴露于苯并[a]芘和9,10-二甲基蒽后，随暴露时间的延长和暴露浓度的升高受精率显著降低，胚胎发