PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座

抗PLA2R抗体在原发性肾小球肾炎诊疗作用PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第1页原发性肾小球肾炎介绍流行病学致病机制诊疗方法血清学检测指标：抗PLA2R抗体主要内容PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第2页膜性肾小球肾炎–分类原发性MN抗PLA2R抗体特发性（查无本身抗体或已知继发病因）继发性MN（可参见KDIGO列表）病原体感染（比如HBV、HCV、梅毒和疟疾）本身免疫性疾病（比如类风湿性关节炎、干燥综合征和类天疱疮）癌症其它疾病（比如镰状细胞贫血、格林-巴利综合征）药品诱导（比如非甾体类抗炎药，黄金，水银和青霉胺）PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第3页原发性膜性肾小球肾炎（primarymembranousglomerulonephritis;pMGN），也被称为特发性膜性肾病（idiopathicmembranousnephropathy;IMN）是最常见以肾病综合征（nephriticsyndrome；NS）为特点肾脏疾病。可见于几乎全部种族和性别，更易出现在40岁以上男性和白种人患者。疾病介绍PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第4页pMGN是原发性膜性肾病，与继发性膜性肾病不一样。继发性膜性肾病是一个感染、药品治疗、滥用、吸毒、胶原病或其它本身免疫病以及肿瘤继发病（并发症），并可伴随潜在疾病治疗而改进。pMGN是作为一个独立疾病治疗，尤其是对伴有肾病综合征和高渗性pMGN。疾病介绍PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第5页约80%pMGN患者含有肾病综合征；有时胳膊和眼皮出现严重水肿，体重减轻，排尿降低；约20%pMGN患者含有蛋白尿，不过无其它任何症状。尿沉渣检验常见脂肪粒、滴、管；约50%pMGN患者含有显微镜血尿，蛋白尿与糖尿；约70%pMGN患者在发病早期血压与肾功效正常。pMGN临床表现肾病综合征：由各种病因引发，以肾小球基底膜通透性增加为特征，表现为大量蛋白尿、低蛋白血症、高度水肿、高脂血症一组临床症候群。PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第6页流行病学国内pMGN发病率约占原发性肾小球疾病9.9%～13.5%，居IgA肾病、系膜增生性肾小球肾炎之后，列第三位。pMGN患者伴随蛋白尿增加肾衰竭发病率及死亡率风险也在不停升高，这种长久风险尤其与血栓和心血管并发症相关。PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第7页致病机制本身免疫反应造成肾小球免疫球蛋白和补体复合物沉积，造成这种反应抗原主要为M型磷脂酶A2受体（M-typephospholipaseA2receptor,PLA2R），是在成年特发性膜性肾病患者中发觉第一个抗原。PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第8页pMGN临床诊疗迷惑怎样区分原发还是继发？？？怎样进行判别诊疗？SLE相关肾炎乙肝相关肾炎非膜性肾小球肾炎紫癜性肾小球肾炎……诊疗方法PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第9页诊疗:

肾穿刺

组织学检验

肾脏组织电镜检测

新方法学:血清学检测

(anti-PLA2R)血清学检测特点：减轻病人痛苦节约时间和成本可定量化Anti-PLA2R阳性pMGN诊疗诊疗方法PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第10页诊疗方法肾脏穿刺活检是诊疗金标准，但也是高风险创伤性检验伎俩！活检确定为膜性肾病pMNsMN排查继发病因问询病史体格检验试验室检测：血清学、影像学肾脏活检：光镜、免疫荧光、电镜-+激素+烷化剂治疗治疗原发疾病治疗方案不一样KDIGOClinicalPracticeGuidelineforGlomerulonephritis..http://pMN诊疗主要依赖“排除法诊疗(exclusionofdiagnosis)”PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第11页PLA2R结构模式图：N-terminal

cysteinerich

domain(CysR)，fibronectin

typeIIdomain(FNII),8个

CTLDs,一个跨膜结构(TM)intracellularCterminal

tail(IC).NEnglJMed;361:11-21.PLA2R

PLA2R是在人肾小球足细胞表面表示，参加调整细胞中磷脂酶结合过程。当前PLA2R主要分为两型（M型与N型），M型PLA2R是本身抗体主要靶抗原。PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第12页抗PLA2R抗体血清学检测抗PLA2RIgG抗体检测有利于：原发性与继发性膜性肾小球肾炎判别诊疗疾病活动性评定制订治疗方案治疗监测PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第13页标准化ELISA:-试剂通用性,

-温育时间短-30/30/15min

-半定量检测（ratioorindex）或

-定量检测（5个标准品,2–1500RU/ml）Anti-PLA2RRC-IIFT（FA1254-xxxx-50）Anti-PLA2RELISA（EA1254-9601G）HEK

PLA2R

-transfectedHEKcontrol-transfectedintracellulartailtransmembranedomainextracellulartail抗PLA2R抗体检测产品PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第14页使用间接免疫荧光法检测抗PLA2R抗体

PLA2R转染细胞当前，间接免疫荧光（IIFT）是血清学诊疗唯一方法(金标准），该方法适于抗PLA2R抗体定性与定量分析。PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第15页转染细胞质粒转染细胞DNA合成编码PLA2RDNA片段抗原转染细胞表示抗原间接免疫荧光法检测抗体将目标片段插入质粒插入目标DNA质粒基于重组细胞间接免疫荧光法（RC-IFT）PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第16页含两个基质生物薄片马赛克:生物薄片:PLA2R转染HEK细胞对照质粒转染HEK细胞抗PLA2R抗体RC-IFTPLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第17页基于抗原特异转染细胞间接免疫荧光法HEK293cellsPLA2R-transfectedAnti-PLA2RRecombinantCellIFT

-BIOCHIPTechnology-PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第18页敏感度:52% 特异性:100%Cohort

(n=360)nAnti-PLA2R阳性组织学证实pMGN10052继发MGN170非膜性肾小球肾炎900正常人1530Hoxha,Fechner,Stahletal.,NephrologyDialysisTransplantation:26(8);2526-32,

Anti-PLA2RAb

-敏感性和特异性-

PLA2R-AbPLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第19页JAmSocNephrol22:1137–1143,检测anti-PLA2R抗体对IMN判别诊疗有很主要意义（国内数据）敏感度：81.7%；特异性：89.1%PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第20页灵敏度和特异性nAnti-PLA2RpositiveIgG

RC-IFTAnti-PLA2RpositiveIgG

ELISAPrimaryMN,beforetreatment,

within8weeksafterbiopsy,

anti-PLA2RRC-IFTpositive200200(100%)193(96.6%)SecondaryMN,beforetreatment,

within8weeksafterbiopsy,

otherunderlyingdiseaseknown,anti-PLA2RRC-IFTnegative2700Otherglomerulonephritides23000Otherautoimmunediseases31500Healthyblooddonors29101Specificity836100%99.9%Dähnrich,Stahl,Schlumbergeretal.,ClinChimActa421,213-218()PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第21页Dähnrich,Stahl,Schlumbergeretal.,ClinChimActa421,213-218（）抗PLA2R抗体疾病特异性PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第22页Hoxha,Fechner,Stahletal.,NephrologyDialysisTransplantation:26(8);2526-32,IIFT检测性能Hoxha,Stahletal;KidneyInt对88例膜性肾病患者进行检测采取欧蒙RC-IFT产品结果:灵敏度：82% 82%MN患者确认为原发性MN

全部继发性MN患者均未检出抗PLA2R抗体特异性：100%PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第23页几乎全部阳性检出率数据均来自于回顾性研究!抗体滴度会伴随疾病活动性而发生波动，甚至可能因取样时发生以下事件而检测不出：

自发性缓解

免疫抑制治疗原发性/特发性膜性肾病并非单一疾病，可能存在各种靶抗原一些患者可能被误判为原发性膜性肾病（实际为继发性）为何并非全部pMN患者均能检出抗PLA2R抗体?PLAR在特发性膜性肾病诊断中的作用医学知识讲解专家讲座第24页Hoxha,Fechner,Stahletal.,NEnglJMed363,496-498()

Anti-PLA2RAb-预测疾病预后-

患者肾脏移植前后血清Anti-PLA