涤纶薄膜表面固定磷酸胆碱聚合物

涤纶薄膜表面固定磷酸胆碱聚合物

1磷酸行业的合成由于其良好的抗渗透性和中等生物兼容性，公交车（pe）能够制造出一个设计血管和一个人工心脏瓣膜的缝合环。磷脂分子是细胞膜骨架结构的主要组成,其中磷脂胆碱是组成细胞膜的基本单元(如卵磷脂)的亲水端基,是细胞外层膜中的最外层基团,已有的研究表明磷酸胆碱聚合物能够降低蛋白质在材料表面的吸附,提高材料表面的血液相容性。其中,2-甲基丙烯酰氧乙基-2-(三甲氨基)乙基磷酸盐(MPC)的聚合物作为最具代表性的磷酸胆碱聚合物成为近年来研究的热点。Ishihara等人辉光等离子体表面改性可使聚合物表面产生自由基,而后将烯类单体接枝于表面22.1处理将已清洗干燥好的PET试片放置于HD-1等离子体处理仪的真空室样品台上。将基础真空抽至1Pa,通入流量为50mL/min的氧气,放电功率见表1,处理时间为30min。取出后迅速转移至体积浓度为10%的丙烯酸溶液中,在400W下紫外辐照30min(氧等离子体处理样品标记为:O2.2x-射线衍射分析采用漫反射红外光谱(Nicolet5700)表征样品的表面特征官能团。选用PerkinElmer16PCX射线光电子能谱仪对聚合薄膜表面化学组成进行检测,所用阳极靶为Mg靶,能量为1253.6eV。利用液滴形状分析系统DSA100(德国,GmbhHambur)测量接触角,测试液体为二次蒸馏水。2.3tbo溶液的配制采用甲苯胺蓝(TBO)法测定Aac-PET表面羧基浓度。首先将10mm×10mm的Aac-PET试样浸入pH值为10的0.5mmol/L的TBO水溶液中,室温下反应12h后用0.1mmol/L的NaOH溶液(pH=10)清洗了样品表面3次,再浸入2mL50%的CH2.4固定方法:制备适应证样品放入24孔培养板中,将离心后所得的新鲜健康的人富血小板血浆(PRP)注入到放有样品的孔中,在37℃的恒温水浴中培养120min,再用生理盐水漂洗1~2min后,用0.5%戊二醛固定液固定8h。将固定后的样品分别脱水脱醇后进行CO2.5血小板粘附数量检测采用乳酸脱氢酶(LDH)法定量检测样品表面血小板粘附数量2.6样品处理和分组健康人新鲜全血在3000r/min离心15min分离上层血浆得到贫血小板血浆(PPP),待检样品分置于24孔培养板中,每孔注入500μLPPP,于37℃恒温水浴箱中培养15min后取出样品。取培养后的血浆100μL以及100μL的部分凝血活酶试剂于专用的测量管中在37℃下培养3min,接着加入0.03mol/LCaCl2.7免疫n,b多克隆抗体的制备待检试样分置于24孔培养板中,每孔加入500μLPPP,在37℃摇床中培养120min,吸附纤维蛋白原,作用完毕后用封闭液清洗所有样品(5min×3次)。取出试样吸干表面后移入新培养板,加入20μL鼠抗人纤维蛋白原γ链单克隆抗体(ProductNo:NYB4-2xl-f,ACCURATECHEMICAL&SCIENTIFICCORP)(一抗)溶液完全覆盖材料表面,37℃作用60min后,使它与吸附的纤维蛋白原γ链C端392-406肽段特异性结合,用封闭液洗去未能结合的一抗(5min×3次)。试样表面吸干后移入新孔,加入20μL标记有辣根过氧化物酶(HRP)(CatalogNo:074-1806,KPL公司)的羊抗鼠多克隆抗体(二抗)溶液完全覆盖材料表面,于37℃培养60min使之与一抗结合,洗去未能结合的二抗(5min×5次)。表面吸干后移入新孔,加入显底物(TMB)试剂70μL,与材料作用时间为5~10min,HRP使显色剂显色,加入50μL的1mol/L硫酸溶液终止显色,将等量的显色溶液移入酶标板中,置于酶标仪中读出溶液的光密度值(OD),在HRP标准曲线上找到对应的参与显色反应的HRP量,即间接反映了可与一抗结合的γ链C端392-406肽段的表达程度。33.1放电功率对接枝聚合的影响涤纶表面羧基是引入磷酸胆碱聚合物系列反应的起始反应官能团。因此,丙烯酸接枝聚合表面改性的PET表面羧基浓度对MPC聚合物的接枝量有着重要关联。如表1所示,随放电功率升高,PET表面的化学键断裂程度增大,产生的活性中心越多,表面接枝聚合的丙烯酸浓度随之增大。当功率增大到100W时,表面羧基浓度开始出现下降趋势,这可能是由于功率增大,氧等离子体对PET表面产生的刻蚀作用过强,导致表面交联度的增加,从而使得表面活性中心有所下降,从而导致丙烯酸的接枝量减少,故羧基浓度出现下降。其中,功率为80W时,表面羧基浓度达到最大值为5.29×103.2表面化学组成分析图1为空白PET及MPC-PET的漫反射FT-IR图谱。可以看出,由于磷脂胆碱聚合物与PET的红外特征峰有很大程度的重叠,但在962cm为了准确分析磷脂胆碱聚合物接枝改性后的涤纶表面的化学组成,进一步对MPC聚合物改性前后的PET进行了XPS检测。从图2的XPS全谱图中可以明显地看出在133.1和400eV左右出现了两个新峰,分别对应为P2p和N1s峰。这说明在涤纶表面成功接枝上了MPC聚合物分子。进一步检测元素的高分辨谱,解析得到表2中各元素的百分比和相对比率,可以发现MPC聚合物改性的PET表面O/C增加,P、N元素浓度分别为1.01%和1.58%。3.3pet的水接触角图3为各个步骤改性后的PET和未改性PET的水接触角。PET经氧等离子体处理后(O3.4mpc-pet等抗凝血药剂的应用APTT反映了内源性凝血系统的激活程度。如图4所示,PET表面共价接枝磷脂胆碱后(MPC-PET),APTT增加到41.3s,比原血浆、PET分别提高7.9、6.7s,这说明PET材料表面固定MPC后,在一定程度上延缓了内源性凝血系统的激活程度,提高了材料的抗凝血性。3.5pet表面的激活程度图5为空白PET及MPC-PET表面体外血小板粘附的SEM照片。可以发现未经改性的PET表面有大量的血小板粘附,变形和团聚比较严重,这表明未改性的PET表面对血小板激活程度较大。而表面固定MPC的PET样品粘附的血小板数量很少,且粘附的血小板变形程度较小,无明显团聚。该结果与王芬等3.6mpc对纤维素原的影响血液中常态下的纤维蛋白原不会与静息的血小板结合从图7中可以看出与空白PET相比,MPC-PET的样品表面纤维蛋白原变性量得到了极大的削弱,这说明MPC的引入有助于抑制纤维蛋白原的变性。MPC具有的两性离子结构,不仅在热力学上不可能进入蛋白质等生物大分子天然构象的内部,而且与蛋白质表面离子结构的作用力很小,从而有利于维持其天然构象上述研究表明,80W等离子体处理后成功接枝MPC聚合物的改性PET,能显著降低纤维蛋白原的激活,并有效抑制血小