WST 463-2015 血清低密度脂蛋白胆固醇检测

S中华人民共和国卫生行业标准T—血清低密度脂蛋白胆固醇检测Mm06发布12实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布T—前言本标准按照给出的规则起草。本标准主要起草单位武汉大学中南医院北京医院老年医学研究所北京医院。本标准起草人周新郑芳陈永梅陈文祥王抒董军。ⅠT—血清低密度脂蛋白胆固醇检测1范围本标准规定了血清低密度脂蛋白胆固醇测定及其质量保证的基本原则。本标准适用于实验室的血清低密度脂蛋白胆固醇测定也供有关体外诊断厂商参照使用。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。1分析系统m适合对某检验项目在规定浓度范围内给出分析结果的一组按规定条件使用的仪器和装置包括试剂和物品。注对于临床生物化学检验分析系统主要由按规定条件使用的仪器试剂和校准物组成。注其他标准如—中的类似概念为检验程序但检验程序包括更广泛内容对于本文件分

析系统相当于检验程序的分析部分。注改写导则,定义2验证n提供客观证据考虑任何测定不确定度说明给定事物满足规定要求。导则,定义注本标准主要是指分析系统的验证即某分析系统在本实验室的性能是否与规定性能指标或厂商提供的性能指标一致。注有关概念是确认即规定要求满足指定用途的验证本标准的验证包含确认的含义。3低密度脂蛋白胆固醇应用经典的分离和定义脂蛋白的超速离心法按密度从低到高将脂蛋白分为乳糜微粒度脂蛋白中间密度脂蛋白低密度脂蛋白)和高密度脂蛋白)等。血清指密度的脂蛋白以中的胆固醇)物质的量浓度)表示。血

清浓度的传统单位是换算为的换算系数为1极低密是3的生物学特性和临床意义我国人群血清第5百分位数和百分位数分别约和个体内生物学变异约,个体间生物学变异约。主要用于动脉粥样硬化性心血管病危险分析升高是心血管病危险因素。国内外

成人血脂异常防治指南都以降作为心血管病患者降脂治疗的第一目标。划分采用固定切点为合适水平为边缘升高,为升高。1T—4分析原理1概述分析原理有多种包括超速离心法电泳法色谱法匀相法直接法沉淀法间接法公式计算法等常规检验目前主要采用匀相法和间接法。注我国常规检验目前推荐采用匀相法。注本文件针对匀相法等实验方法间接法适用范围见2匀相法匀相法又称直接法有多种方法常见的有选择性遮蔽法清除法等。选择性遮蔽法采用硫酸糊精和镁离子等遮蔽和,用聚氧乙烯聚氧丙烯多聚醚遮蔽环胆固醇酶试剂只作用于产生显色物质。清除法先用一种表面活性剂使胆固醇酶试剂只作用于的胆固醇但不显色随后用另一种表面活性剂使胆固醇酶试剂作用于产生显色物质而被检测。

3间接法间接法又称为公式计算法公式以组成恒定的胆固醇)除以甘油三酯的假设为前提计算公式为总胆固醇)-高密度脂蛋白胆固醇)为按计以计则为式计算法的条件是:应用公空腹血清不含乳糜微粒;

浓度在以下;

无Ⅲ型高脂血症。公式计算法在低于m的情况下有一定的可靠性但高于m时可靠性下降高于)时失去可靠性。此外

由于含的比例较高所以的存在也会造成的测定偏差。

是低成本简便但不能用于或某些异常脂蛋白血症的标本。显然用

此公式计算的可靠性受三项指标测定质量的影响。此法最大的优点5样品采集与处理1采用血清进行分析。2患者准备和血液样品采集应满足以下要求:

患者在采集样品前应处于稳定代谢状态;患者在采集样品前至少2周内保持通常饮食习惯保持体重稳定;

患者在采集样品前内不进行剧烈体育运动;

患者在采集样品前禁食约患者在采集样品前坐位休息至少5静脉穿刺过程中止血带使用不超过13样品处理与存放应满足以下要求:血液样品保持密封样品管处垂直状态封口朝上;血液样品管轻取轻放避免剧烈震荡防止引起溶血;血液样品在采血后内离心分离血清含促凝剂采血管可在更短时间内离心参照采2T—血管说明书分离的血清样品在分析前保持密封;血清在室温下的存放时间不大于4若需贮存4应存于4℃环境,存应置于以下环境血清不可反复冻融。若需更长时间贮6分析系统1分析系统选择1根据实验室实际情况选择适宜类型分析系统主要包括仪器试剂和校准物若采用半自动仪

器还包括适宜的移液设备和温育设备等。注仪器主要分自动和半自动仪器目前多数实验室采用自动生化分析仪小型实验室可能采用半自动分析仪。

注可见下列类型分析系统:封闭系统仪器试剂和校准物来自同一厂商供配套使用见于部分使用自动分析仪的情况;

开放系统试剂和校准物来自同一厂商供配套使用仪器另选见于部分使用自动分析仪的情况和使用

半自动分析仪的情况;组合系统仪器试剂和校准物来自不同厂商或机构由实验室自己组合见于部分使用自动和半自动分

析仪的情况。2宜尽量选用封闭系统或开放系统必要时可使用组合系统。注使用组合系统的理由可能是有证据表明配套校准物缺乏可靠性也可能是其他合理原因。3宜尽量选用分析结果可溯源至公认参考系统参见附录A)的分析系统。注美国疾病控制预防中心)胆固醇参考方法实验室网络)运行分析系统溯源认证计划,该计划用多份)患者血清将常规方法直接与参考测定程序或指定比对方法对比。期内的通过认证的分析系统列表。在其网站保持有效注还可以有其他溯源方式对临床检验量值溯源原理及要求做出说明。2分析系统使用封闭系统和开放系统应按厂商说明使用使用组合系统或对分析系统做其他改变如各种分析参

数条件或方式等需有充足理由并需对分析系统性能进行充分验证见3分析系统性能指标分析系统应达到下列性能指标:所测的分析物与定义见一致一般情况下不受其他血清成分的明显干扰特异

性分析结果的总变异系数小于(精密度分析结果的偏倚在范围内正确度测定范围4分析系统性能验证任何新选用的分析系统在用于患者样品检验前应进行性能验证。可采用的验证程序参见附录下列情况应验证所列全部性能:采用封闭系统或开放系统厂商未给出所列之性能指标;

采用封闭系统或开放系统厂商给出的性能指标不满足之要求;

采用组合系统或做过改变的分析系统;采用封闭系统或开放系统厂商给出所列之性能指标且符合要求时可仅验证正确度。3T—7质量控制和保证1应根据工作经验行业交流科学文献等选用性能可靠的分析系统主要是试剂和校准物品牌应尽量保持使用同种分析系统不宜随意经常更换分析系统。2应进行内部质量控制。质控品应适宜用于脂蛋白分析足够均匀稳定浓度在医学决定水平附

近至少两个水平应尽量长期保持使用同种质控品不宜经常更换质控品每批检验至少分析一次质控品。注有些商品生化质控品由于来源组成性质等原因可能不适宜用作质控品。自制足量度保存的新鲜冰冻血清是的良好质控品。以下温3应参加经卫生行政管理部门认定的室间质量评价机构组织的临床检验室间质量评价。8结果报告应以我国法定计量单位报告测定结果需要时另外给出传统单位结果。

以为单位的结果保留小数点后2位有效数字。检验报告应注明医学决定水平需要时另外注

明参考区间升高的判断需考虑分析变异个体内生物学变异及检验次数等因素。4T—附录A资料性附录)参考体系1参考方法尚无国际公认的参考方法。国际影响较大的参考方法是美国疾病控制与预防中心)的超速离心肝素锰沉淀胆固醇测定法定量法此法用血清在的密度下超速离心离心条件离心力g℃切割中部离心管去除血清中

密度小于的组分顶部组分主要为极低密度脂蛋白和乳糜微粒将底部组分主要为和,简称完全转移到容量瓶中定容。准确吸取底部组分到试管中用肝素氯化锰选择性沉淀中的,

离上清中的用的胆固醇参考方法法测定和中的胆固醇H和离心分和H自中减去得。2参考物质没有国际公认的参考物质。美国国家标准与技术研究所)

的参考物质有的参考定值,定量法。我国有国家质量监督检验检疫总局批准的

定值方法为美国的3种冰冻人血清国家一级标准物质3参考系统的应用方式及应用范围参考系统的应用方式包括应用参考物质或应用参考测定程序。方面:参考系统主要应用于以下分析系统的溯源和质量评价;

试剂的制备及质量评价;校准物质的制备定值及质量评价;

新常规方法的发展及评价;室间质评计划中的靶值确定;协作研究中血脂分析的质量保证。5T—附录B资料性附录)分析系统性能验证1特异性、精密度和测量范围评价1概述采用分割样品对比评价特异性精密度和测量范围收集合适样品用待验证分析系统和另一分析

方法对比方法同时分析样品比较分析结果。2样品收集至少份病人血清样品浓度在测量范围内基本均匀分布每份血清分装3份形成3

品密封保存。套样3对比方法首选参考方法或指定比对方法不可行时可选用另种常规方法最好是不同原理的方法且有证据

证明是性能可靠的方法如经认证的方法。4实验过程上述3套样品分3次独立实验用待验证方法和对比方法分析。

5计算1计算每份病人样品待验证方法3次分析结果的变异系数计算所有病人血清结果的平均。2计算每份病人样品两种方法3次分析结果的平均值,计算每份病人血清待验证方法结果的偏倚和绝对偏倚计算所有病人血清结果的平均偏倚和平均绝对偏倚。6性能判断若平均小于,平均偏倚在内则分析系统精密度特异性和测量范围符合要求。2正确度评价1若实验中的对比方法为参考方法或指定比对方法结果同时说明正确度符合要求。2若实验中的对比方法是常规方法,用待验证方法分析有证参考物质或其他符合要求的参考物质至少3次计算分析结果平均值与参考物质定值的差值偏倚若在内正确度符合要求。6T—参考文献]临床化学检验血液标本的收集与处理医学实验室质量和能力的专用要求体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性],

ⅢMA]中华医学会检验分会血脂专家委员会关于临床血脂测定的建议中华检验医学杂志,]中国成人血脂异常防治指南制订联合委员会中国成人血脂异常防