基因诊断培训讲义

第16章基因诊断王慧莲概述几乎所有的疾病均在一定程度上与基因有某种联系，基因的改变，或是疾病发生的原因，或是疾病发生的结果，或是疾病发生时的伴随现象，而这些现象的出现是有规律的。因此，可以通过检测基因的改变来反映疾病的发生和发展，疗效和预后基因诊断：是以DNA或RNA为诊断材料，通过检查基因的存在、缺陷或表达异常，对人体状态和疾病作出诊断的方法和过程。基因诊断经历了三个基本发展阶段第一阶段：２０世纪８０年代，以DNA分子杂交为基础，通过限制性片段长度多态性性（RFLP)分析进行．第二阶段：应用PCR技术．第三阶段：应用基因芯片技术．第宴一护节挥基米因营诊镰断王的情基厦础灾技烫术一.基犯因池诊湖断甩中牧常寸用倍的寻几够种别技伞术（蹈一悄）妇核朴酸戴杂丹交（咽二沃）P谣C终R（三孕）D公N尿A序跌列顿测逢定（阿四旁）D卫N安A芯般片筑技弟术(一)核造酸垮分碰子踢杂沾交冈技粮术(烤1洲)方蒸法:以贱已找知析顺恐序垒核恒酸贝片屿段繁作练为砍探陕针,经自放拦射似性畏或巡寿非摸放罗射胳性油物驻质殊标况记粱后,再撑与截未源知银的烘目爱的匆核蹄酸眼片陡段定进龙行现杂厉交暑反练应,分英离妇已腊杂赤交闷和镰未快杂文交爸的治标曾记枣核僻酸储链,通咳过捐标中记漠信射号述的鉴检拔测通就足可久以推对黑未吼知糊的圣目销的胸核净酸发链跑进铃行瞧定黄性呈、芝定艰量便分氏析.(2敲)几能种检不芝同雷形饲式塌的浇核款酸男分送子溜杂剂交a神.街S走o岗u闹t个h秆e傲r场n印税迹(府s伶o突u舌t酷h绳e奔r批n织b辱l肌o陕t发)杂存交:用险于D可N怪A的处检搁测气，察可土用表于秋基亩因露的掀限按制棉性厕内冠切渣酶竹谱蕉分殿析见，吊基仔因印突钳变说分颜析爪等飘．b嘱.罗N驻o辽r谱t高h衬e菠r滴n印微迹(画N咱o翼r亮t喉h暗e苹r津n君b微l假o手t惑)杂前交:用房诚于R留N许A的原检镇测阳，疾能吓对幅组序织败细诞胞搬中详的咐总R向N关A或m浙R西N养A进俯行琴定浑性坟和圾定页量西分慰析逐．c煮.斑颗点划杂唇交纠（d麦o膨t见b终l因o薄t愧)秧:既抽可妹以颜检胶测D糟N汉A也幅可鲜以溪检纽奉测R祝N睛A激,用捞于川特槽定孙基检因通及铲其闸表霸达抹的躬定午性够和块定把量事分槐析酒．怀方贤法闲简让单仿、柔灵册敏害；蝇但鞠特服异那性呢低栽．原仪位射杂则交烟（i倍n奋s扒i间t炒u史h如y舍b挪r才i扣d烟i柔z碗a维t碎i切o疼n将)具:是酸细称胞维学软技漆术削与巡寿核抵酸固杂惜交辽技羞术刑结幼合薪的奏一少种说核温酸巧分痒析鞠检源测赤技依术外．稀可写分颤为D义N涌A原行位司杂梅交饮和R闪N法A原本位龟杂页交,用靠于酿检榆测都染悟色象体圣中案特百定怠的寄基打因禁位猾置粘，疲用呈于舰染仆色妹体尖疾篮病妻的驳诊指断置．分吧类:记①玻展片奴原胡位据杂娃交:如谨中溪期喝的缺染港色剩体慌和拼组织堪切炒片.②膜晌上孩原叙位债杂择交:将企菌则落石或厕噬愚菌竖斑番影伙印撇在慎尼龙慌膜(如伪硝兽酸蒜纤确维常膜)原沉位年杂饥交反的贫镜智像流图(二)虚P筛C浓R技监术茶在原基叔因得诊天断息中训的夜应枕用（白１嘱）园等写位广基载因矮特品异烫性庙寡垮聚休核盐苷他酸掠（a示l金l土e贪l趋e孙s酿p前e采c豪i念f宾i异c浙o白l盯i编g挤o惠n糖n竟u捧c桂l谨e分o帅t屋i即d效e具,悔A嘴S倾O栏)探呼针罚斑碧点棋杂塌交仙：P优C桨R擦-款A葵S暖O该嫩方乞法致是诊名断棕已衡知暗点扁的块突壶变特：需耽分站别坝合爹成昏野肆生才型要和摔突寸变盾型换探禁针昏．雾在雕基饲因动诊共断威时跟，己只培需窃用P号C序R扩社增咳受高检炸者沙目臭的D坑N顺A片稻段切，讲再令分播别锣与抄上吓述携探损针状杂佳交御．耀杂贝交笔的引结孔果肃有处如阳下除几峰种问情区况史：①锻P蜜C南R扩献增刺产贺物标与球正抗常排探惯针推杂况交药，校不班与甲突四变爸探劝针针杂枪交总-心-茂不存框在接这央种端突除变蛾；②只皇与阀突再变买探剪针吗杂因交吓-赵-洁突舒变枝基够因艘为只纯途合鞠子扎；③与铜正甘常牙探希针打和唐突燥变土探肤针柴都为可帅杂掠交雷-嚼-组突耗变而基妖因叔为流杂允合董子闻；④与挥正艰常窑探紧针岩和消突障变责探昂针瓶都蛇不聚能清杂吹交鼠-偶-碍突衡变搅基安因弓不代属薪于倘已小发现忠的柏类列型（老２耕）斧单布链催构燃象宾多劣态胆性街（s检i良n销g虽l斧e那s宿t套r昂a尚n哪dc工o乌n都f姐o跪r督m银a访t著i鼓o容n亚p爱l黎o帖y常m充o抵r撇p完h硬i罚s导m愈,半S义S感C摆P倍)分柿析是酸一乱种笼基决于罩单自链D腥N尽A构订象穗差哲别针来港检孝测星点垃突荣变爹的被方垦法偿．D蹄N胡A变累性狐形喷成盘单方链耗，负在惊中敢性桶条极件缠下谣长誉度沾相猛同置的宣单室链他指D淹N协A退,如她果后碱惭基鸣组临成森和(或)排磨列慎顺贺序凯不衰同,形讲成战的蜡构垫象老就亲不量同,这顶样贪就叙形而成裂了农单森链株构惭象酒多翼态贸性.这场些族分卫子案在有非权变绣性P村A耻G谱E中廊电洋泳这中故表螺现须出饥不向同拿的卖迁披移茎率.S若S蜡C塞P特辅别矿适搁于欧分库析待小销于夺4雀0裳0b外p的P毅C涝R产铺物脏。倘据校认塌为S侮S奶C签P可裳以姨区夕分绢1b邀p的愈差尝异P赤C比R惰-纵S犯S弦C滨P分金析县不伙能想确挑定膀基碗因荡变券异拖的就内话容逮，磨因喷此占电父泳骗后臣结酬果姻有舅差旦异太后敲还所需蝇进采行荷测艰序锤分亦析灰，喝确帖定洒变斗异合性府质(业3麻)限饥制洪性缓片颗段汁长男度腊多挥态辉性幅（r违e壳s情t满r讨i资c场t征i数o炭n鼓f慢r烂a拼g裹m悔e声n薪t凳l承e滋n润g听t绩h镰p更o摸l按y絮m蝇o鞭r鸡p画h粱i痰s支m北s诵,掘R伪F往L话P美）分禾析基狮因眯突普变烂导朋致凶的闲基遭因肆碱修基斤组维成录或(和)顺需序招发贿生识改艺变,会求在割基糠因绣结债构旷中奋产盗生窗新极的皱限臂制当性趟内沈切洪酶遥位望点拾或谨使粪原污有剧的楚位俱点吧消赚失.用悬限子制昼酶胳对块不进同阵个箭体予基案因深组方进掉行颤消躬化妹时摧，听其厘电晌泳艺条金带娱的何数兼目预和截大扶小雷就环会研产杀生陆改挨变薯，花根旅据距这枯些推改面变疑可生以序判型断筐出制突争变须是饿否南存左在.限艰制爬性蚀片组段骂长矮度昏多宵态利性R温F迅L辩P茶s谷(墙r旋e尊s煮t殊r居i超c享t凯i目o怒n旧f脂r剑a征g灯m熟e掠n冒t疗l票e予n病g骆t绸h捡p既o滩l坛y姨m战o饭r须p凤h计i少s抗m筝s与)样品一样品二1咳9级8馒7年,前H袋.猴D耀o章n翅i武s厉-无K椅e寄l聋l价e轻r等编人设以R箩F木L极P为验遗挡传狡标迫记协绘恐制床了吃第钥一仁张赌人类类坟遗故传纵图饭谱(夏4与)导P坦C深R炕+变驼性拆梯躲度刷凝巴胶读电诵泳桨分搜析吧技旺术双他链D皆N员A在舌一省定乡丰浓须度营变订性钻剂(尿扁素,甲撕酰拢胺)作诊用亚下,会至变抱性奶而促解泰链,导商致D让N明A分桃子鞭电坦泳咸迁宋移佩率谊变揭化.当素在恨不蛙同冤梯纵度忽浓诱度汉变返性版胶挂中绘电里泳败时,D属N让A泳古动栗到肾变宵性顶剂市浓谦度捡能划使D惑N卸A发冬生闻变地性体，D磁N饶A开甜始覆解阁链珠，各从愿而搭不幼同再的D俯N窃A片早段单会锅形有成痕不魄同凤的匪迁役移亿率遍条柿带岸．优笔点：鸭可穷靠叨，信检飘出慨单锡碱市基伶突锹变简率江可恨达雅９喝５淋％上．缺个点：储富李含等高醒熔颜点G涂C区白时斧，杆则郊难钳以扁检唱测帜出安突变歇．（妙５陷）帖用报甲光基绍化淹特捎异凝性P默C锡R（m献e造t燃h艺y编l匪a答t牛i疏o味n砌-僵s忠p判e丹c攻i肢f抱i办c汤P胀C矿R擦)进印行某分碰析在P郊C州R扩纯增羊前进，亏先询用恢化川学产试品剂节（N士a新H棕S另O州3佳)处舅理地模搅板D纯N垃A效,将票所姥有准未济甲制基孤化绣的际胞趟嘧抹啶渗（C颜)转陕变护成咽尿游嘧呈啶(说U确)，秆在P急C翠R扩莫增售时爆，U与只引微物临中A配妖对穷；专而C弓p卧G岛拦上鸭甲扣基欣化叛的C不厦受练影版响飘，荡在羊扩芒增宴时粉仍微与G配叨对,基暑于诱这箭种嗓差画异胡可盖以沿进烦行迎甲恐基蚂化呜特朴异馋性P心C右R．设愈计约一董对甲法基稼化鲜特旅异姥性杂引磁物头（住引揪物妥中G结帮合斩模畜板芽中C齿)晓;和长非呈甲帐基垄化窝特秤异姐性赶引漂物耳（柱引码物该中A结醒合杯模拼板料中U注)毙,通乳过P腿C玻R扩姿增蹦就茶可介检热测掩出帝甲捡基谊化深等倘位赏基除因俭化确学牌修眼饰成的D梢N反A序遣列桑和节非轰甲崇基光化著等申位权基脑因湾序针列范．用嫁于底一恰些恶疾榜病胜和土肿走瘤淘的泛基黎因逆诊脏断楼．(胳6丽)采邮用P棚C微R技关术漂对更靶屿核首酸啊进精行绩定捏量买分序析定吉量P耀C剖R带(锁q液u改a窗n桑t像i翅a扣t黑i促v革e骄P伸C吩R削,浆Q阿-津P纽奉C背R夏)吴:就授是壮对鹊靶蚕核固酸赠分捷子嚼进虑行疫定桂量捞分忆析贞的拳技况术.根够据P纺C腹R扩片增浴指叶数田增谨长宽期坏原枪理拘，粗理亭论群上乔扩围增廉产恩物锈累课积何分腹子偿数N烘=岭N丑o懂(墓1赴+凯E期)宵,其浩中E是基指洁每侮次锹循贴环巩中缘瑞参疤与例复蚂制疑的谨模南板害数骄与薯总瘦模闯板校数胶的桥比届率.通筐过N值浅可丽求军出N杆o竭.但P态C择R扩抬增信时劫平狮台摩期(踪蝶1薄5舅-筋2蒸5晕)的慈出唤现血会刃影烟响小测绑量稀的沫准锄确是度.定碗量P颜C茂R的下策砍略乏和纲方眉法家较眨多.na推.通肾过韵测块定P戒C刻R产欲物照量方娇法:对朝已水知残量叔的钞靶D姿N掀A进材行亡系酒列咱稀喉释,比嫩较映待炮测伟样狸品棉和奔已朱知乘系摄列奴稀牛释舌样曾品扛的P屠C炭R产概量,还乒可惰对胜未嚷知庆量絮的恒靶D太N酬A进辜行灭绝狭对绵定雾量.b抗.采储用之极提限方稀拳释妹法而对要靶亿核纸酸础进香行条定隐量轰分斑析:方案法:将经待凤测D果N邀A标突本今进抖行棵倍馒数绪稀纽奉释,直拣至纷扩餐增任不类到糊靶庙基记因炮的牌稀遍释讲度,用点稀射释厨程舌度贤表仔示醒启和始额靶瓣基姻因运分角子做数区的覆相腹对治量,是座一通种说半济定炼量阔方贩法.c蝴.采满用迎非公竞真争深性铃对咐照朱法丸对部靶博核旬酸既进怠行析定溜量宅分朽析方误法:该棒方爪法绩是体在卧一面个公试继管舰内泼同仔步己扩兽增轿来最自演同栋一D筋N般A的椒一歉段众靶值序丢列旅和故另胳一浙段岁内再标著序桥列,用蜜内妻标啦序简列涉控舟制D绣N谢A的涝用庙量薪、暖可国扩非增哥性蚀和埋管汉间姜扩监增鞠效桨率太的征变卖化,通堵过辈比菊较扰两陵段胃序镰列P篇C笔R扩著增衡产卫物贤电杆泳擦带灾的灭荧躺光充强膛度,对湿靶免序执列志进调行肃定宁量寒分距析d牙.采铺用锣竞仪争浴抑樱制妻法盈对芹靶偷核羊酸旦进嚷行匹定陷量赚分因析:方跨法:参概照云标宅准耍不巴是溜同扰一目核负酸智分冠子灭上柱的塌另蝇一揉段烛序兆列,通巷常筑是失人眉工析模聪板,与饰待经测黎序凑列开具买有翁相胞同截的霜引惩物瞎结税合板位盟点,能歉与贞待探测缴序烟列帝竞懒争话聚佩合灶酶,底洞物,引镰物印分阶子.方易法:将具竞货争蜘模侦板迟作鸟系邻列牛稀梢释鲁后雄加狠入馒恒王量哗的绘样烈品D孝N泻A进屑行P醒C导R扩典增,通这过烟分远离改和界分味析企竞先争增模匆板踢和床样稀品D违N副A的P赌C倍R产袭量,对莫样让品D望N址A进歉行香定暴量劫分千析e妇.荧大光我定蹲量P脆C剩R抹(贷F右Q剧-井P例C近R嫩)技流术是筐一雀种域目快前图国那内恰外抓应原用阴较营为乘广竭泛碑的牛定锤量P敢C轮R技榜术,是除通如过在始论点早定桌量卷和吗荧闲光秀检拣测燃系斥统词实做时液监嚷测班累片计四荧标光怪强吩度倡而战实四现,具尿有鸭灵符敏副度型高,特扬异煎性切强稻等彩优老点.F从Q朵-堪P图C马R技木术佳的源两勺种跪定急量星形芒式:①绝恰对炭定露量:一捧般欧采坚用忍外得标洋准帐品洁定貌量脂的足制广备丑来巷实缺现靠绝径对离定绢量.如欧合丘成胳目合的椅基勤因;将P娃C臂R产纵物缠直擦接物梯幅度煌稀锄释;或劝将P烈C弄R产黄物跪克滑隆挎到包载扩体闯上,抽卷取避质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淋巴瘤人类乳头瘤病毒(HPV)宫颈癌通过检测这些病毒的基因就可以帮助诊断相应的肿瘤.EB病毒四恐.昂通呢过稍检梳测攀肿塘瘤进标搭记塑物王基发因矿或m楼R锹N状A诊占断废肿机瘤肿争瘤摆标收志欢物（t训u棵m走o芝r死m妨a隆r史k盏e真r瓜)是孟由薄肿育瘤湿组浴织言细痕胞乳产禁生隶的氏，偶与腥肿拴瘤术形斥成皱和竿发兄展察相残关梅的蜘物毒质拳，尖包矩括熄：镇肿涉瘤技抗按原丙，晕激板素民，企酶深和封同雅工走酶美。宗仅短存睁在辅肿胸瘤