多糖类化合物

化学物质多糖类化合物01分离纯化鉴定化学结构就抗肿瘤活性理化特性基本化学结构目录03050204基本信息多糖类化合物是灵芝所含化学成分之一，现已证明，灵芝多糖类具有抗肿瘤作用、免疫调节作用、降血糖作用、降血脂作用、抗氧化作用和抗衰老作用，故灵芝多糖类是灵芝的主要有效成分。临床试验也证实，灵芝多糖可作为肿瘤化学治疗和放射治疗的有效辅助治疗药。分离纯化鉴定分离纯化鉴定灵芝多糖类的分离灵芝多糖类的分离、纯化及结构确证的方法及步骤可概括如下：多采用热水提取、分部沉淀的方式分离灵芝的多糖组分；进一步经各种层析如DEAE纤维素柱色谱、SephadexG75柱色谱，凝胶过滤如SepharoseCL—4B凝胶过滤，高压电泳和聚丙酰胺凝胶电泳等处理可获纯化的多糖；后者经酸水解、纸色谱、气相色谱分析可确定其单糖组分，经酶水解可检测殊碳糖（anomeric）结构；经甲基化技术及Smith降解、气相色谱、气质联用、紫外及红外光谱分析、核磁共振等可确定多糖的连接方式和基本化学结构。平均分子量多糖的分子量可通过凝胶柱色谱如SephadeaxG—100柱色谱、超离心测沉降系数等方法测定，一般在测得分子量范围后，求出平均分子量。理化特性理化特性生物活性有差异由于灵芝的种类、产地、分离提取方法各异，所获灵芝多糖的理化特性、分子量、单糖组分和连接方式不同，生物活性亦有差异。如Hiroshi等（1985）报道，赤芝子实体热水提取物经浓缩、透析及系列色谱后获得两种多糖ganoderanA和B。ganoderanA的分子量9300，旋光度[α]D+58.8°，ganoderanB分子量3600，旋光度[α]+33.3°，二者对小鼠均具降血糖作用。两个降血糖有效成分随后，他们又从赤芝子实体中分离出两个降血糖有效成分ganoderanB和C，均为糖肽，分子量分别为7400和5800。物理化学和化学研究证明，ganoderanB含吡喃葡萄糖酰基β-1→3主链和β-1→6侧链，ganoderanC则含D-吡喃葡萄糖酰基β-1→3和β-1→6连接和D-吡喃半乳糖酰基α-1→6连接。Mizuno等（1986）报告，赤芝子实体经85%乙醇（80℃），热水（100℃），3%草酸铵（100℃）和5%氢氧化钠（30℃）提取后，残渣再用5%氢氧化钠（含0.1%硼氢化钠，80℃），20%氢氧化钠（含0.1%硼氢化钠，30℃）和5%氯化锂（溶于二甲醋酸铵中，70℃）提取，获多糖组分A、B、C。化学结构化学结构均一体化学结构分子量BN3BBN3B1β（1→6）β（1→3）葡聚糖3.50×104BN3B2β（1→6）β（1→3）阿拉伯半乳聚糖基本化学结构基本化学结构Mizuno等（1982）经热水提取，乙醇分部沉淀，并经离子交换色谱，pH依赖的Cetavlon处理、凝胶过滤以及ConA-SepharoseGL-4B亲和色谱等纯化，从人工培养的平盖灵芝菌丝体中得到一个多糖组分。进一步通过甲基化、核磁共振、过碘酸氧化、Smith降解和β-D-葡聚糖酶（β-D-glucanase）分解等技术研究多糖的化学结构。α-葡聚糖组分具有α（1→4）葡萄糖苷主链，主链上每9～12个残基连接α（1→6）支链，该组分仅有微弱抗肿瘤活性。β-葡聚糖组分具有β（1→3）葡萄糖苷主链，主链上每12个残基通过β（1→6）连接一个单糖苷支链。其中之一显示显著的抗小鼠S180活性，50%抑瘤剂量为0.74mg/kg。Mizuno和Miyasaki等分别从赤芝、平盖灵芝和紫芝加哥提取出具有抗肿瘤活性的多糖。并确证其基本化学结构。就抗肿瘤活性就抗肿瘤活性灵芝多糖并无种间差异，它们和从其他真菌中所获多糖一样，具有以下三个特性：1.初级结构的分子量在3×10^5以上。2.多聚物的连接方式均有β-1-3-D-残基的主链和β-1-6-D-葡萄糖侧链残基。但从不同真菌提取的多糖的β-1-6-D-葡萄糖的分支程度不等，灵芝多糖的主链残基与侧链残基的比例为5∶2