液相色谱仪基础知识

新员工培训（液相色谱基础知识）上海仪先仪器有限公司仪先国际贸易有限公司上海力晶科学仪器有限公司陆加金2013年9月专业诚信优质高效内容提要一、色谱基础知识二、液相色谱概述三、液相色谱基本构造四、液相色谱基本工作原理五、液相色谱的用途及应用领域专业诚信优质高效一、色谱基础知识

色谱法最早是由俄国植物学家茨维特在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，色谱法(Chromatography)因之得名。

专业诚信优质高效一、色谱基础知识色谱法是利用混合物中各组份在不同的两相中溶解,分配,吸附等化学作用性能的差异,当两相作相对运动时,使各组分在两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离。两相中有一相是固定的,叫作固定相,有一相是流动的,称为流动相流动相又叫洗脱剂，溶剂。专业诚信优质高效一、色谱基础知识色谱法：利用组分在两相间分配系数不同而进行分离的技术。流动相：携带样品流过整个系统的流体。固定相：静止不动的一相，色谱柱。

色谱是一种分离技术。色谱的主要目的是对混合物中的目标物分离和定量。专业诚信优质高效一、色谱基础知识按流动相的物态分:气相色谱(GasChromatography,GC)用气体作为流动相(又叫载气)液相色谱(LiquidChromatography,LC)用液体作为流动相(又叫洗脱剂)专业诚信优质高效二、液相色谱概述

液相色谱：以液体作为流动相的色谱分离方法。适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物的分析。流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用。气相色谱：以气体作为流动相的色谱分离方法。适用于沸点较低、热稳定性好的中小分子化合物的分析。流动相只起运载样品分子的能力。专业诚信优质高效二、液相色谱概述高效液相色谱-HPLC(HighPerformanceLiquidChromatography)-是一种区别于经典液相色谱,基于仪器方法的高效能分离手段:高性能色谱柱,高精度输液泵,高灵敏度检测器…-广泛应用于各个领域:医药,环保,石化,生命科学,食品工业,农业…-无论在技术上,理论上,还是在应用上仍有较大的发展空间专业诚信优质高效二、液相色谱概述超高效液相色谱–UPLC(UltraPerformanceLiquidChromatography)–是区别于HPLC的液相色谱新领域–基于小颗粒填料和LC原理的一种创新技术–实现超高分离度、灵敏度、分析速度专业诚信优质高效三、嘴液相还色谱颈基本习构造主要仿组成链部分奴如下嫁：进样普系统输液喝系统分离脉系统检测文系统数据泰处理鸣系统专阴业活诚盼信俩优迅质竿高矮效三、循液相朵色谱杆基本威构造1.备进样菠系统速：身自昨动进句样系电统（险是否聪带温宗控）手动番进样横系统核心弄部件避：描六通怖阀专芝业面诚仿信句优启质关高腾效三、沈液相待色谱佳基本戏构造六通值阀原饺理示亲意图取样蜻时，激流动楚相直村接进源柱，伙进样寻口与烤定量爪管连垫接，姓样品洪充满她定量用管后初，多薄余样聚品从燃6流抬出。进样获时，颂泵将居流动哗相压旁入定吗量管荒，将织样品龙全部酸进入烦色谱峡柱分傅析。专寻业证诚挑信塑优写质景高喘效三、袭液相除色谱艇基本尸构造进样绒前，友进样成，进粉样后岗3个诸过程御示意申图专蹄业养诚疯信桶优靠质雾高埋效三、辟液相羽色谱塌基本兔构造专椒业引诚奋信黑优完质管高个效三、膛液相透色谱岗基本适构造2.谦输液印系统流路兵—单浊泵、挤双泵赏、三爬元泵军、四升元泵型、多仁泵压力系—低沉压、语中压叮、高虾压、川超高读压控制惩方式虏—恒里流、梅恒压流动桨相—厕等度隐、梯重度混合盘方式象—低两压、玩高压流量返—分破析泵平、半吼制备望泵、验制备睡泵材质疤—金泥属泵席、非抢金属赞泵（鸭pe戚ek当)专圾业竿诚兄信觉优秘质馋高圾效三、纺液相惑色谱近基本症构造泵系荣统为输液住系统下中最为安核心腹部分悉，也是喷整个货液相色娱谱系危统中跨最为婚核心桂的部悼分。关于简泵系回统中砍等度闹、梯老度、沿高压境、低疏压、通二元习、四子元将膝做主木要介暂绍。专洗业咽诚迁信膜优寸质谢高凉效三、诱液相佳色谱豆基本饿构造等度姥分析亡：针烦对单酱一样征品、读或者盏简单经样品维采用苦等度胆分析冰。示道意图虑如下专苍业伞诚眼信祥优妈质胞高辱效三、展液相鼠色谱表基本率构造梯度善分析才：对分于复砖杂样眯品，电一般掘采用弦梯度悦分析吹，且牺必须把是二孝元以盆上的幻玉泵系拥统。到示意中图如葡下：专自业色诚剩信们优惩质拆高亚效三、砖液相赢色谱去基本颠构造高压宾梯度苍：用汉两台之高压牧输液米泵将果两种润溶剂存输入岩。低压畏梯度灵：在地常压音下将朝两种握溶剂谅（或唐多元忧溶剂乐）混铺合，铲然后拣用高亚压输他液泵修将流融动相炮输入昼到色屯谱柱转中。吸（混驱合前躬高压妈与混法合后赏高压核）专包业墓诚仓信览优尤质晚高翅效三、村液相苦色谱龙基本完构造二元忍梯度共--惊-需缘瑞2个削泵-绿--熄--负高压华梯度四元足梯度存--磨--服需比例灰阀一丝式个泵--跪低压悬梯度专片业羊诚笑信吗优洋质躬高横效三、抛液相烤色谱撕基本驼构造3.轿分离乓系统3.书1色伴谱柱色谱浙柱是欣HP声LC群分离妹系统颤的关近键！色谱良柱分智类：左可根傍据柱管汉、类串型、猾规格窄大小宋、填户料、帅分离赢类型进行膀分类册。色谱寸柱标骑签的礼识别族：专辰业醒诚动信名优各质年高尝效三、土液相小色谱谋基本掏构造3.高2帐柱温缩慧箱柱温锁箱的好作用纠：控温蛙系统窝大多峡数并捎不是对HP扰LC采的必影须备酿件，恭凝胶团系统茎一般夸是要惭求控帖温的娱，采丈用示鞋差检钢测最治好配虫置控添温箱洁，离民子色微谱也列同样缓。有咏些仪炮器除淹了加友热的良控温电系统氧外，滚还自索带低抱温冰翁箱。液相属色谱饮常规增分析趟的柱无温在致20尸-6田0度。不同够温度糖对样夕品的冲保留工时间皇有很炕大的参影响算。柱温颤箱的冰优点给：分析直结果影重现兰性好提高杨柱效降低疑柱压保证酒检测员稳定坊性专芽业岭诚搏信膝优摘质赵高庄效三、袖液相寒色谱误基本项构造4.胃检测查系统灵敏袖度分累级pp罚m级佳p厦er滋p度ar展ts概o抵f垃mi竟ll障io程npp抹b级饺pe梢r性pa萍rt升s仗of飞b贼il厕li颠onpp黎t级隙p俱er傻p取ar棕ts腊o铅f庭tr肥il摩li挖on如：刚浓度么及浓举度换吊算单甩位醉1市pp寨m=春10钱00主pp羡b;兼1p东pb效=1陆00岭0p羽pt1p班pm捡即：范mg手/L1p验pb喝即：隐ug肠/L1p悔pt他即：破ng布/L专强业魂诚汽信买优锁质摊高此效专斧业拉诚抹信掩优味质铁高误效三、垃液相旱色谱时基本芬构造1、建紫外础-可摇见光块检测侨器（U奇V）专叶业总诚轧信盘优岸质丑高袜效专绘业贪诚俭信痕优弱质握高份效2、二村极管劈燕阵列亡检测宾器（D块AD泉）用光眠电二放极管竿取代栋了是蹈传统喉的光伤电倍英增管哀，在唱一次惧色谱策操作弊中可辈同时鉴获得赏多波宅长的得吸光苦度，由并且耗可以历采用宾现代凶微机赶技术疫将各犯组份束的保派留时谅间、剩吸收舅波长锯和吸比光度目汇合台一起谦，绘沾制三松维谱军图，抢提供芒既定晚量又雄定性瓜的色悔谱信劲息。三、烫液相粪色谱狠基本岗构造专征业险诚身信疫优流质损高出效专袄业租诚腿信斥优统质纹高物效3、兽荧光芹检测沃器（F敏LD殿）高灵欣敏度敞：1驻0-1酬2～1民0-1填3g/途mL锅;高选债择性狂：对掉多环垫芳烃岂，维党生素装B、桑黄曲仙霉素再、卟搭啉类创化合访物、拉农药现、药艇物、味氨基脆酸、伏甾类催化合异物等旱有响览应对蠢温度绩和流址动相纽奉的流穷速变徒化不饮敏感所需馆试样楚少，叛适合恒量分竭析三、却液相假色谱欣基本恭构造专价业封诚旗信土优甩质隶高制效专孩业胞诚伐信手优拖质安高烈效4、抄蒸发赞光散谎射检防测器（E端LS贫D）雾化蒸发散射光源光电倍增管流动相载气D0D蒸发光散射检测原理是利绝用样捧品组炊分雾限化和竭蒸发柔形成列固体绍微粒熊后对劝光的泰散射翼现象鸽来检滚测色衬谱流杂出组报分的泳方法腹（可昏检测泪任何尽挥发模性低膝于流防动相槽的样刚品。光碳水腥化合亭物，框类脂鉴化合闻物，扭表面足活性广剂，阵聚合盯物，离药物炼，氨呜基酸双和天覆然产垃物。响）三、确液相衰色谱省基本叼构造专啄业容诚肺信锡优程质更高疫效专院业命诚钉信付优们质崭高目效EL肤SD彻的原甘理:雾化检测溶剂疗的蒸碌发检测医器的抗响应泥值仅姑与光唐束中身溶质膀颗粒务的大左小和席数量宪有关倡。而旗与溶消质的述化学喊性质践无关声。三、框液相坟色谱最基本述构造专杀业黎诚纽奉信呆优堡质煤高碎效专叹业起诚碌信蜘优春质庭高扒效5、盾其他胳检测热器Re绍fr盾ac考ti老ve冶i甘nd锐ex脚d息et菌ec冬to扁rs塔（R鞋I，万示差唐检测纪器）Ma啄ss栗s捷pe蚂ct续ro撕me焰tr孙ic赏d深et株ec验to逝rs贫（M粘s，亩质谱块检测绳器）CA谁D酸de练te设ct墨or岁s（筛CA娇D，树电喷号雾检促测器莲）El俭ec惊tr济oc绪he亭mi勺ca撇l派de丝式te豪cr腊or誓s（找EC技D，帝电化励学检懂测器坡）……以……三、委液相弟色谱妙基本迎构造专奶业百诚业信送优匹质河高废效四、算液相傅色谱签工作棍原理专障业超诚扭信专优坡质间高谁效专赏业趴诚印信芹优登质滥高薄效