卡托普利及合用氯沙坦对大鼠心肌梗死区早期重构影响的比较

卡托普利及合用氯沙坦对大鼠心肌梗死区早期重构影响的比较卡托普利及合用氯沙坦对大鼠心肌梗死区早期重构影响的比较

：张晓霞，吴学思，韩志红，米树华

【

卡托普利及合用氯沙坦对大鼠心肌梗死区早期重构影响的比较

合用组，n=17），模型组（n=18）.卡托普利以2g/L浓度溶于动物饮水中，自由饮水；氯沙坦以20mg/kg灌胃，每日晨1次.共干预2wk.术后第5，10日尾套法测定各组大鼠血压.

1.2.3血流淌力学检测100g/L水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，分别右颈动脉，插入颈动脉插管，并经换能器连接至生理分析仪，待动脉压力波形稳定后，选取6个压力周期波形，由分析系统自动计算主动脉收缩压(SBP)、舒张压(DBP).连续将颈动脉插管推动到左心室，待心室内压力波形稳定后，选取6个心动周期，计算左室收缩压（LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)和左室内压最大收缩和舒张速率(±dp/dt).

1.2.4左心室容积测量及病理切片的制备静脉注入100g/L氯化钾使心脏于舒张期停跳，快速取出心脏，置于100g/L冰氯化钾溶液中，使心脏舒张均一.持续以100g/L中性甲醛以13mm水柱压力灌注左心室40min，再将整个心脏浸入100g/L中性甲醛固定12h.去除右心室、心房及大血管，用1mL注射器直接测量心脏容积.从心脏中部垂直于心脏长轴横切左心室，取心尖部分石蜡包埋，自心底部向心尖部每隔1mm切取10μm切片，行HE染色.另在心脏中部切面切5μm切片行免疫组化分析.

1.2.5梗死面积和扩张指数测定［4］扫描左心室横截面切片，使用彩色病理图像分析系统测量各弧长、周长、面积和厚度.根据公式计算梗死面积，以瘢痕弧长百分数表示.梗死面积（%）＝瘢痕弧长/［(外周长+内周长)/2］×100%.选扩张最明显的截面（中截面）测量扩张指数.扩张指数=(左心室腔面积/左心室总面积)×(间隔厚度/瘢痕厚度).

1.2.6免疫组化检测切片常规脱蜡，经30g/L过氧化氢孵育10min,山羊血清室温下孵育20min后分别加入兔抗鼠Ⅰ型胶原抗体和αactinmAb，4℃冰箱过夜,依次滴加羊抗兔IgG二抗，SABC液37℃孵育30min，DAB显色试剂盒显色8min,苏木素复染,脱水透亮     ,中性树胶封片.彩色病理图像分析系统进行分析.统计分析中不包括血管自身胶原成分.每张切片任意选5个视野进行统计分析,求得平均值.

1.2.7RTPCR检测梗死区Ⅰ,Ⅲ型胶原水平术后2wk取心脏，分别梗死瘢痕区组织，使用Trizol(50～100g/L组织)提取总RNA，反转录PCR法检测胶原a1(Ⅰ)和a1(Ⅲ)的表达，琼脂糖凝胶电泳后扫描DNA条带灰度，以collagenα1(Ⅰ)和collagenα1(Ⅲ)与GAPDH的比值作为半定量指标.collagenα1（Ⅰ）sense：5′AAGAGGCGAGAGAGGTTTCC3′;antisense:5′ATCACCAGGTTCACCTTTCG3′；产物长度318bp；collagenα1（Ⅲ）sense：5′GCCTTCTACACCTGCTCCTG3′;antisense:5′GATCCAGGATGTCCAGAGGA3′；产物长度386bp；GAPDHsense：5′TGGAAAGCTGTGGCGTGATG3′；antisense：5′TCCACCACCCTGTTGCTGTAGC3′，产物长度359bp.以HO1与GAPDH的比值作为半定量指标.

统计学处理：数据以x±s表示，使用SPSS11.5统计软件进行方差分析和t检验.P0.05为差异具有统计学意义.

2结果

2.1血流淌力学转变结果显示，假手术大鼠无明显心肌梗死，无死亡.卡托普利组、合用组、模型组各存活12，12，11只大鼠，心肌梗死面积为35.6%～49.4％，各组大鼠心肌梗死面积差异无统计学意义（P0.05）.心肌梗死大鼠各血流淌力学参数显著劣于假手术组.卡托普利组与合用组血流淌力学参数较模型组显著改善；合用组收缩压/舒张压低于卡托普利组，左心室舒张末压有较卡托普利组增高的趋势（P=0.08），左室内压最大收缩和舒张速率差异无统计学意义（P0.05，表1）.表1合用卡托普利和氯沙坦与单用卡托普利对AMI大鼠血流淌力学影响

卡托普利及合用氯沙坦对大鼠心肌梗死区早期重构影响的比较

的比较（x±s）组别n梗死面积（％）无创BP（mmHg）SBP（mmHg）DBP（mmHg）LVEDP（mmHg）dp/dt（mmHg/s）-dp/dt

2.2心脏容积与梗死区扩张指数心脏容积卡托普利组，合用组与模型组相比较均明显小于模型组，分别为［（1.75±0.17vs1.92±0.18），（1.76±0.15vs1.92±0.18），P0.05］，但卡托普利组与模型组组间心脏容积无显著性差异［(1.75±0.17vs1.76±0.15),P=0.87］.卡托普利组与合用组梗死区扩张指数均小于模型组［(1.12±0.14vs1.53±0.33），（1.25±0.13vs1.53±0.33),P0.05］，而合用组大于卡托普利组［（1.12±0.14vs1.25±0.13）,P0.05，图1］.

2.3Ⅰ型胶原面密度与肌纤维细胞比例合用组梗死区I型胶原面密度有低于模型组的趋势［（11.8±2.6vs14.4±2.6）,P=0.07］；而卡托普利组无明显减低［（12.8±3.2vs14.4±2.6）,P=0.36］.成纤维细胞中肌纤维细胞的比例合用组明显低于卡托普利组［（59.2±5.1vs70.8±8.5）,P0.05］和模型组［（59.2±5.1vs72.3±7.3）,P0.01］，而卡托普利组较模型组无明显减低［（70.8±8.5vs72.3±7.3），P=0.75，图2，3］.

2.4合用组及卡托普利组梗死区Ⅰ,Ⅲ型胶原的表达梗死区Ⅰ,Ⅲ型胶原α1链的表达合用组低于卡托普利组，分别为［（0.720±0.210vs0.996±0.162），（

0.488±0.113vs0.660±0.098），P0.05，图4］.

3争论

本试验发觉，单用卡托普利或同时应用氯沙坦均可有效改善心肌梗死后2wk梗死区和整个左心室的重构，但单用卡托普利时梗死区扩张指数小于两药合用时.扩张指数用于描述梗死区扩张的程序［4］，因此，提示单用卡托普利对梗死区较早期重构的改善作用优于与氯沙坦合用.并且，卡托普利组LVEDP也有低于合用组的趋势（P=0.08），单用卡托普利对AMI后较早期左心室功能的改善优于与氯沙坦合用.瘢痕愈合的速度和强度是影响梗死区扩张程度的重要因素之一.讨论［5］发觉，合用卡托普利和氯沙坦时梗死区羟脯氨酸浓度低于单用卡托普利.本试验发觉，与模型组相比较，卡托普利组梗死区Ⅰ型胶原面密度无显著减低，而合用组却有减低趋势（P=0.07），提示合用卡托普利和氯沙坦时梗死区Ⅰ型胶原沉积可能延缓.由于Ⅰ型胶原为粗纤维，抗张力作用强，梗死区胶原尤其Ⅰ型胶原沉积的延缓可能与合用组梗死区扩张程度大于卡托普利组有关.

本试验还发觉，合用组梗死区被αactin标记的成纤维细胞比例明显低于卡托普利组，提示肌纤维细胞的转化和增殖受到更强抑制，并且合用组Ⅰ，Ⅲ型胶原的表达低于卡托普利组，提示肌纤维细胞的胶原合成也受到更强抑制，这些可能均与胶原沉积的延缓相关.AMI后，首先发生梗死区扩张，继而引起边缘带变形、远隔区域室壁弧度转变和室壁张力增加，并始终持续到梗死区胶原瘢痕强度足以有效平衡扩张张力［6］.因此，梗死区扩张程度直接影响了整个左心室的晚期重构.合用组这种早期的相对劣势可能是其未能较单用ACEI或ARB进一步改善AMI预后的缘由.

综上所述，AMI早期不宜合用大剂量卡托普利和氯沙坦，合用的恰当时机尚需进一步试验讨论.

【

卡托普利及合用氯沙坦对大鼠心肌梗死区早期重构影响的比较

［2］SugieT,KagayaY,TakedaM,etal.ShouldincreasingthedoseoraddinganAT1receptorblockerfollowarelativelylowdoseofACEinhibitorinitiatedinacutemyocardialinfarction?［J］.CardiovascRes,2024,58(3):611-620.

［3］McMurrayJJ,OstergrenJ,SwedbergK,etal.Effectsofcandesartaninpatientswithchronicheartfailureandreducedleftventricularsystolicfunctiontakingangiotensinconvertingenzymeinhibitors:TheCHARMAddedtrial［J］.Lancet,2024,362(9386):767-771.

［4］FraccarolloD,GaluppoP,BauersachsJ,etal.Collagenaccumulationaftermyocardialinfarction:EffectsofETAreceptorblockadeandimplicationsforearlyremodeling［J］.CardiovascRes,2024,54:559-567.

［5］张晓霞，吴学思，姚海木，等.合用卡托普利和氯沙坦对大鼠急性心肌梗死后梗