淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍

淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍血液肿瘤分类进程淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍MICMFAB形态学诊断(Morphology)免疫学检查(Immunology)细胞遗传学检查(Cytogenetics)分子遗传学检查(Molecular)WHY?主观影响方法学限制检测方法形态学特点细胞遗传学免疫分型分子生物学准确诊断淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍形态学:

细胞学：外周血、骨髓涂片，淋巴结穿刺

组织学：骨髓活检、淋巴结活检、血凝块免疫学：

流式细胞术（FCM）

免疫组织化学细胞遗传学：核型分析（染色体异常）、荧光原位杂交（FISH）分子遗传学：

融合基因（RT-PCR\Q-PCR)/基因突变（DNA测序）淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍形态学骨髓涂片看细胞、骨髓活检看结构，二者相互补充相互验证不能相互替代。长度≥，血凝块淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍免疫固定电泳免疫固定电泳对多发性骨髓瘤、Waldenstrom巨球蛋白血症、分泌型骨髓瘤、轻链病、重链病等研究有重大意义。常规检测免疫球蛋白中常见的IgG,IgA,IgM,κ,λ,IgD和IgE概率极低，当检测结果出现单独轻链，不能排除是IgE和IgD结合轻链的可能，若需要确定是否为游离轻链，将进一步检测。多发性骨髓瘤患者在治疗后易出现轻链丢失，电泳图谱与重链病图谱相似，此类患者建议加做尿液的免疫固定电泳检测是否存在游离轻链，以作进一步区分。淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍遗传学淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍分子生物学淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍融合基因筛查适用患者本筛查项目主要用于筛查ALL、AML、CML、AMMOL、CMML、MDS等血液病病种可能出现的31种融合基因或癌基因，及其融合基因的110余种剪切变异情况。适合无法确定融合基因类别的初诊患者，便于医生对血液病患者进行分子标志物的确定，并进行后续微小残留病灶的监控。本项目建议配合染色体核型分析一起检测，以免由于染色体数目异常或携带少见融合基因而造成漏诊。淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍不同疾病筛查项目ALL融合基因筛查（18种）AML融合基因筛查（23种）APL融合基因筛查（3种）MLL融合基因筛查（11种）淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍APL的5种融合基因亚型Chromosomal t(15;17) t(11;17) t(11;17) t(5;17) dup(17)

aberration (q22;q21) (q23;q21) (q13;q21) (q35;q21) (q21.3q23)Frequency >95% 1~2% rare rare rareFusiongene PML-RARa PLZF-RARa NuMA-RARa NPM-RARa STAT5b-RARa 100% 100% yes yes yes RARa-PML RARa-PLZF RARa-NuMA RARa-NPM RARa-STAT5b 60~70% 100% no yes noNuclear in100microspeckles localizedin microspeckle sheetlike microspecklelocalization whichmaybe microspeckles pattern aggregation pattern,maybe localizedin be localized cytoplasm incytoplasmResponsetoATRA good no,mayrespond good yes no toATRA+G-CSFChemo good no,mayrespondtochemo/ATRAArsenic good,with noPLZF-RARa notknown notknown notknown degradationof degradation PML-RARa 淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍CML的三种融合基因亚型BCR-ABL,amodelofactivationofproteintyrosinekinase(PTK)inleukemo-genesis:growthandsurvivaladvantages淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍融合基因项目FAB分类检测意义AML-ETOAML-M2M2出现AML1-ETO融合基因阳性，考虑加做血液C-KIT基因突变，确定疾病风险分层。

DEK-CANAML-M2，M4，M1患者年龄一般较轻，且预后较差；此类患者进行分子监测有助于判断患者预后，调整治疗方案。CBFβ-MYH11AML-M4eo具有CBFβ-MYH11的患者对化疗敏感，预后较好。同时长期监控，可提示复发风险。E2A-PBX1前B-ALL具有E2A-PBX1患者的预后较差，需给予强化治疗才能获得较好的预后。TEL-AML1前B-ALL儿童ALL中最常见，治疗反应佳，预后良好。FLP1L1-PDGFRα嗜酸性粒细胞增多症可见于嗜酸性粒细胞增多症。MLL-AF4前B-ALL在婴儿ALL中最多见，儿童成人中较低，此类患者病情凶险，预后差。患者对标准治疗方案很可能无效，需给予强化治疗，大剂量Ara-C与MTX有效。淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍突变项目检测意义JAK-2V617F/539-543已列入WHO2008MPNs的诊断标准V617F见于90%以上的PV，约50%的ET、PMF；NPM1是AML预后良好的因素之一，单纯NPM1突变的AML患者预后较好，若同时伴随FLT3-ITD突变，将会影响AML患者对化疗药物诱导的缓解效果。C-kit常出现于AML1-ETO+患者，突变患者预后较差。FLT-ITDFLT3突变是急性髓性白血病患者预后判断的重要标志。阳性者预后不良。FLT3-ITD和D835突变在AML中阳性率分别24%和7%，总阳性率超过30%。突变患者白细胞计数显著增高，还与临床预后密切相关。60岁以下的AML患者预后较差。N-rasN-ras基因点突变的检测可作为白血病缓解和复发的一项指标。发生N-ras基因突变的MDS患儿转化为白血病的机率较高。此基因突变存在于11~30%AML。ABL激酶CML，特别是CML急变期（AP-CML）的患者，对伊马替尼耐药的发生率在20-30%；耐药主要由ABL激酶区突变引起，其可导致药物疗效下降或失效。突变检测项目淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍基因阳性率临床意义预后与其他遗传异常相关性KIT5%预后因素差t(8;21)inv(16)/t(16;16)FLT320-40%预后因素差----NPM130%（核型正常）对疾病进行临时性的定义良好（如果没有FLT3突变）M4,

M5CD34

-CEBPA10%对疾病进行临时性的定义良好M1，M2CD7+WHO

2008新界定的突变淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍技术交叉淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍TCR和IgH重排项目有5-10%的患者无法通过常规方法辨别其淋巴系统的增生是恶性增生还是反应性增生。正常淋巴细胞在成熟过程中重排是多克隆性的，但恶性肿瘤（＞98%）表现为单克隆性Ig和/或TCR基因重排。适用患者及适应症：疑似淋巴瘤患者的良恶性鉴别诊断。淋系白血病患者的鉴别诊断及微小残留跟踪检测。

淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍免疫学淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍流式细胞术的应用目的确定髓系和淋巴系别，及细胞分化阶段；鉴别反应性与克隆性淋巴细胞增生性疾病；确定髓系白血病各亚型（M0，M3，M6，M7）；对形态学分类不明/比例低的细胞进行定性（淋巴瘤-凝血功能障碍或甲减等）；诊断急性混合细胞白血病（确诊）；诊断微小残留白血病或白血病浸润；辅助MPD/MDS诊断；判断白血病/淋巴瘤预后，指导治疗。淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍微小残留病变检测淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍抗体选择白血病/淋巴瘤免疫表型检测（30CD）白血病/淋巴瘤免疫表型检测（20CD）对于无法诊断或是临床倾向不明的患者，确定细胞系别来源及分化程度，辅助分型，提供诊断以及治疗依据。微小残留病灶检测（6CD）有初诊资料并且观察到微小残留跟踪标记微小残留病灶检测（20CD）无初诊资料或病情有复发情况MDS免疫表型检测（20CD）多发性骨髓瘤免疫表型检测（14CD）淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍MICM整合报告淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍PNH克隆检测Pig-a基因的克隆性干细胞突变Glycosylphosphatidylinositolanchor，GPI缺失部分缺失：Ⅱ型细胞全部缺失：Ⅲ型细胞淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍检测哪些细胞？红细胞中性粒细胞单核细胞淋巴细胞血小板淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍FLAER气单胞菌溶素（aerolysin）直接连接于GPI锚蛋白，GPI阴性的PNH细胞对aerolysin出现抵抗。利用这一特性，制备出了采用荧光素（如ALEXA-488）标记aerolysin的变异体（FLARE），通过流式细胞术或激光共聚焦等方法分析GPI阳性或阴性细胞。淋巴造血系统肿瘤检测项目介绍MichaelJ.Borowitzetal.Guidelinesforthediagnosisandmonitoringofparoxysmalnocturnalhemoglobinuria

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