多种中药材中异丙威含量的检测方法与研究-学位论文

实验部分PAGE12多种中药材中异丙威含量的检测方法与研究摘要本实验的目的是对三七、木香和茯苓三种中药材中异丙威含量的检测方法与研究。异丙威是一种氨基甲酸酯类农药。在三七、木香和茯苓等很多中药材种植过程中都会用到。实验时采用高效液相色谱法，用丙酮作为提取溶剂，辅以超声提取，用无水硫酸钠和弗罗里硅土以一定比例作固相萃取柱净化，用甲醇和二氯甲烷冲洗，在测色谱时以一级水和乙腈作为流动相。该方法分离效果好，其他干扰小，能很好的完成本实验的测定任务。关键词：异丙威高效液相色谱法三七木香茯苓ABSTRACTTheaimofthisstudywastoofpanaxnotoginseng,woodyandporiacocosthreeChineseherbalmedicineofisopropylwillycontentdetectmethodandresearch.ExperimentbyHPLC,withacetoneasextractionsolvent,supplementedbyultrasonicextraction,withanhydroussodiumandFloridawithcertainproportionassiliconsoilsolid-phaseextractioncolumnpurification,withmethanolandmethylenechlorideinmeasurement,flushwithlevelwhenwaterandgcasmobilephaseacetonitrile.

Keywords:Isopropylweihighperformanceliquidchromatography

引言1.1异丙威异丙威,英文通用名称isoprocarb(MIPC)。又名灭扑散、叶蝉散，化学名称：邻丙基苯基甲基氨基甲酸酯。化学结构为：其纯品为白色结晶粉末；工业原药为粉红色片状结晶。不溶于卤代烷烃和水，难溶于芳烃，可溶于丙酮、甲醇、乙醇、二甲亚砜、乙酸乙酯等有机溶剂。无致癌、致畸、致突变作用。该品种于1978年由联邦德国公司推荐用作杀虫剂，是一种氨基甲酸酯类的广谱杀虫剂，具有胃毒触杀和熏蒸作用。具有较强的触杀作用，击倒力强，药效迅速，致使害虫快速麻痹死亡。对稻飞虱、叶蝉科害虫具有特效。可兼治蓟马和蚂蟥，对飞虱天敌、蜘蛛类安全。选择性强，对多种作物安全。可以和大多数杀菌剂或杀虫剂混用。用于防治果树、棉花、蔬菜、粮食、烟草、观赏植物上的各种蚜虫，对有机磷产生抗性的蚜虫十分有效。2.1关于三种中药材本实验主要针对三种药材即三七、茯苓和木香中的异丙威进行检测。三七又名田七，明代著名的药学家李时珍称其为“金不换”。三七是名贵中药材，生用可止血化瘀、消肿止痛，是云南白药主要成分，其花叶也能入药，当茶饮。三七粉是用三七主根打成的粉，别名：田七粉。产自于云南文山。三七粉可以治一切血病。是一味非常好的中药材。茯苓，俗称云苓、松苓、茯灵，为寄生在松树根上的菌类植物，形状像甘薯，有利尿作用、抗菌作用、抗肿瘤作用等。其原生物为多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核，多寄生于马尾松或赤松的根部。产于云南、安徽、湖北、河南、四川等地。古人称茯苓为“四时神药”，因为它功效非常广泛，不分四季，将它与各种药物配伍，不管寒、温、风、湿诸疾，都能发挥其独特功效。木香是菊科植物云木香和川木香的通称。云木香（学名：Saussureacostus）气对胃肠道有兴奋或抑制双向作用,有促进消化液分泌,利胆,松弛气管平滑肌,抑菌,利尿,等作用。原产于印度,从广州进口,习称“广木香”.现栽培于云南丽江,迪庆,大理,四川涪陵等地.又称“云木香”。川木香有解痉作用,能缓解乙酰胆碱所致的豚鼠回肠痉挛;有利胆作用,能促进大鼠的胆汁分泌。川木香（学名：Dolomiaeasouliei）是菊科川木香属的植物，均是中国的特有植物。分布在中国大陆的四川、云南、西藏等地，多生长在高山草地和灌丛中，为野生植物，尚未由人工引种栽培。这两种植物的根茎都是重要的中草药。这三种药材属于常见中药材，故对三七、茯苓和木香中的异丙威进行检测具有十分重要的意义。实验部分三七、茯苓和木香均是我国常见的名贵中药材，对治疗很多疾病都有其独特疗效。在我国的中药材之中占着很重要的地位。现在也有越来越多的人们开始培育这些中药材，不可避免的会在培育时喷洒大量农药，从而影响了这些药材的药效以及发展前景。因此，对这些中药材之中的农药残留的检测方法与研究就显得相当及时与必要。本实验就是针对三七、茯苓和木香这三种中药材中异丙威的含量的检测方法与研究进行的。2.1仪器与试剂2.11仪器福立FL2200液相色谱仪(浙江福立分析仪器有限公司）；超声波（上海科导超声仪仪器有限公司，KUDOS）；电热干燥箱（南京实验仪器厂，DG30/14-Ⅱ；HG202-2）；旋转蒸发仪（上好爱朗仪器有限公司，N-1001）；离心机（上海安亭科学仪器厂制造，TDL80-2B)；予华牌循环真空泵；水浴锅（上海爱朗仪器有限公司，OSB-2000）；分析天平（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司，AR1140）；摩尔超纯水机（上海摩勒科学仪器有限公司，元素型1820d，08-03-210）；冰箱（河南新飞冰箱长，BCD-260A)；层析柱（15*250mm）2.12试剂及配置2.121试剂标品：异丙威（isoprocarb）农药标准对照品。配置浓度为mg/ml；mg/ml。甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙腈、无水硫酸钠、弗罗里硅土、一级水色谱级：甲醇（色谱级，美国天地）乙腈（色谱级，美国天地）2.122试剂的配置准确称取1mg/ml异丙威标准品1ml，至100ml容量瓶中，用甲醇定容，得到mg/ml异丙威标准对照品。准确称取mg/ml的异丙威标准品0.5ml，至10ml容量瓶中，用甲醇定容，得到mg/ml异丙威标准对照品。2.2样品预处理2.21样品的预处理准确称取3.5g样品于小烧杯中，加入适量甲醇，然后准确加入1.4mlmg/ml异丙威标品，搅匀，置于抽风机中，打开风箱，使其变干。供实验使用。2.22无水硫酸钠的处理2.23弗罗里硅土的预处理2.3样品的提取准确称取0.5000g样品于100ml锥形瓶之中，加入10ml丙酮，于超声仪中超声10min（59KHZ,100%功率），将其转移到10ml离心管中，用离心机离心10min（2600r/min），取上清液，转移至50ml圆底烧瓶中，然后在旋转蒸发仪上浓缩至近干，温度控制在50℃左右。待上样。2.4样品的净化准确称取0.4000g无水硫酸钠至层析柱中，继续准确装填1.0000g弗罗里硅土和0.4000g无水硫酸钠。用10ml甲醇：二氯甲烷=1:9（V/V）预淋洗，然后用5ml甲醇：二氯甲烷=1:9（V/V）洗涤样品瓶后倒入层析柱中，再用10ml甲醇：二氯甲烷=1:9（V/V）洗涤，收集洗脱液于50ml圆底烧瓶中，在旋转蒸发仪上浓缩至近干，取甲醇定容至5ml，封口后待检测。2.5液相色谱测定条件色谱柱（UltimateXB-C185μm4.6*250mm)；柱温：30℃；紫外检测器波长：210nm；进样量：10μl；流动相：乙腈：一级水=55:45；流速：1.00ml/min；泵控制方式：高压二元梯度；一级水用前先用0.45μm滤膜过滤，乙腈和一级水都要在超声仪上超声20min。第三章结果与讨论3.1净化条件的选择中药材成分复杂，含有许多影响实验准确性的成分，为避免这些成分影响实验效果，需要对其进行净化实验，出去不必要的杂质。本实验采用层析柱法对其进行净化。层析柱自下向上装填活化过的无水硫酸钠、弗罗里硅土和无水硫酸钠。通过改变无水硫酸钠与弗罗里硅土的重量比来确定其最佳比例，即0.3：1:0.3、0.4:1:0.4和0.5:1:0.5，分别按此比例做柱前加标和柱后加标对比试验，最后确定当比例为0.4:1:0.4时净化效果最佳。表3-1无水硫酸钠与弗罗里硅土质量比柱前柱后样品无水弗洛里无水样品无水弗洛里无水0.3:1:0.30.50050.30031.00010.30020.50040.30051.00070.30080.50020.30001.00080.30080.50050.30071.00090.30030.4:1:0.40.50000.40021.00030.40000.50060.40071.00050.40040.50010.40001.00020.40010.50040.40001.00010.40020.5:1:0.50.50070.50071.00040.50040.50020.50011.00020.50070.50080.50041.00030.50000.50010.50001.00070.50000.5：1：0.5前1--20.4：1：0.4前23.2标准工作曲线取mg/ml异丙威标准溶液，用高效液相色谱法测定，设定其进样量分别为1μl、5μl、10μl、15μl、20μl和25μl。在相同条件下测定。以进样量对峰面积作标准曲线。线性相关系数为0.9996。其线性相关性良好，得到线性回归方程表3-2标准曲线数据进样量（μl）峰面积（mAu）质量（μg）12335.1510980.11021405.51532380.12044257.72554086.43.3回收率3.4农药残留分析在本实验中分别在四个位置中添加了农药，即在第一次旋转蒸发后、过柱时、过柱后以及直接在样品中添加（即预处理的样品）。通过测定分析这四个位置的异丙威的峰面积，可对异丙威损失大小的位置进行排序。结果如下：表3-3面积平均面积柱后加标150599.351479.3柱后加标252204.7柱后加标351634.3柱前加标142689.042725.1柱前加标242378.8柱前加标343107.5旋蒸加标133084.332968.3旋蒸加标231284.7旋蒸加标334535.8样品加标15571.85525.8样品加标25539.9样品加标35465.74结语本实验对三七、木香和茯苓三种中药材异丙威的含量进行检测与研究，考察了这次的毕业论文设计总结是在我的