临床免疫 免疫学应用免疫学诊断

第12章免疫学应用第1节免疫学防治第2节免疫学诊断目录

第2节免疫学诊断学习目标掌握熟悉了解能理解抗原抗体检测的原理并能解释玻片凝集反应结果。熟悉常用的抗原抗体反应类型。了解免疫细胞及其功能检测。什么是免疫学检测？含义：应用免疫学原理检测抗原、抗体、免疫活性细胞、细胞因子等免疫相关物质及体液中的微量物质是免疫学检测的方法。包括：抗原抗体反应免疫细胞检测细胞因子检测皮肤试验应用：临床诊断,分析病情,调整治疗和判断预后一、检测抗原或抗体的体外试验1、原理：在一定条件下（温度、PH、离子浓度等）抗原与相应抗体在体外可特异性结合，并出现可见现象。2、应用：（1）定性检测（2）定量检测3、抗原或抗体检测的意义：诊断疾病4、抗原抗体反应的特点：（1）特异性；（2）比例性；（3）可逆性；（4）阶段性。抗原抗体反应的类型1.凝集反应2.沉淀反应3.免疫标记技术1.凝集反应概念：细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合，在一定条件下形成肉眼可见的凝集现象（1）直接凝集反应①玻片凝集反应②试管凝集反应（2）间接凝集反应（1）直接凝集反应①玻片凝集反应菌种鉴定或分型、ABO血型鉴定（2）间接凝集反应概念：将可溶性抗原（或抗体）吸附或偶联于与免疫无关的颗粒上，使之成为致敏颗粒，再与相应抗体（或抗原）作用，在一定条件下，出现特异性凝集现象应用：抗O试验、类风湿因子检测2.沉淀反应概念：可溶性抗原与相应抗体特异性结合，在一定条件下出现肉眼可见的沉淀现象。（1）单向琼脂扩散试验（2）双向琼脂扩散试验（3）免疫浊度测定（1）单向琼脂扩散试验（2）双向琼脂扩散试验AgAb双向扩散结果示意图3.免疫标记技术概念：用荧光素、酶、放射性核素、胶体金、发光剂等标记物对抗原或抗体进行标记，与相应未标记的抗体或抗原结合反应，通过对标记物的测定可确定待检物质的含量。特点：提高了检测的灵敏度。（1）酶免疫技术（2）荧光免疫技术（3）放射免疫技术（4）金标免疫技术（1）酶免疫技术概念：用酶作为标记物，检测抗原或抗体。反应中的酶与抗原抗体复合物结合在一起，并能催化随后加入的底物，使底物显色，根据颜色的有无和深浅判断抗原或抗体的有无和含量应用：酶联免疫吸附试验(ELISA)为目前应用最广泛的免疫检测技术；用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断（2）荧光免疫技术（3）放射免疫技术概念：是用放射性核素标记抗原或抗体进行免疫学检测的技术应用：人体各种微量蛋白质、激素、药物和肿瘤标志物的定量分析缺点：是放射性核素对人有一定危害，需要特殊的设备（4）金标免疫技术概念：是以胶体金作为标记物，用于抗原抗体检测的技术。通过观察颜色变化用于抗原抗体的定位或定性分析应用：体液中抗原或抗体的检测，如HCG、抗HCV、抗HIV的测定。斑点金免疫渗滤试验最常用二、免疫细胞检测1.T细胞数量检测2.T细胞功能检测3.T细胞亚群检测1.T细胞数量检测E花环试验正常值为60%～80%，若花环形成率下降，表明细胞免疫功能降低。E花环试验电镜图2.T细胞功能检测淋巴细胞转化试验3.T细胞亚群检测原理：不同的T细胞亚群带有不同的CD分子（如CD4、CD8），他们可以和荧光素标记的相应单克隆抗体结合，在荧光显微镜下，这些细胞呈现出荧光，借此可区分不同的T细胞亚群应用：了解机体的免疫状态和探讨免疫调节与自身免疫性疾病和肿瘤的发生发展的关系有重要临床意义三、细胞因子检测原理：免疫细胞间的相互作用常常是通过细胞因子来实现的，机体的炎症反应也是由细胞因子引起的方法：抗原抗体检测法、生物活性检测法、分子生物学检测法应用：评估机体的免疫状态，判定治疗效果及预后四、皮肤试验

(体内免疫学检测法)皮肤试验是检测机体免疫反应常用的一种体内试验方法。1.速发型(Ⅰ型)超敏反应皮肤试验2.迟发型(Ⅳ型)超敏反应皮肤试验1.速发型(Ⅰ型)超敏反应皮肤试验方法：将变应原如青霉素、异种动物血清、花粉等做皮内注射，20分钟后局部出现红晕，直径超过1cm或有皮疹即表示受试者对该变应原过敏应用：检测引起机体致敏的变应原，对速发型超敏反应性疾病的防治有重要意义2.迟发型(Ⅳ型)超敏反应皮肤试验方法：即结核菌素试验，是将抗原定量注入皮内，48～72小时后观察结果，若注射部位出现红肿、硬结为阳性反应小结免疫检测包括抗原抗体检测、免疫细胞及其功能测定两大类。抗原抗体反应可用于病原体或疾病相关因子的检测，常见的抗原抗体反应有凝集反应、沉淀反应、免疫标记技术，其中免疫标记技术是目前应用最广泛的免疫学检测技术。1.抗原抗体的结合是（）

A.分子表面的特异性结合B.不稳定的结合

C.随机结合D.不可逆结合E.无限量结合2.肥达反应是（）

A.直接凝集反应B.间接凝集反应

C.沉淀反应D.中和反应E.