透析液细菌内毒素检查

细菌内毒素限量检查讲义——透析用水、透析液讲解董光宴1、试验条件必备2、标准要求3、供试品溶液的制备4、限量检查

湛江博康海洋生物有限公司5/25/20231博康一、试验条件必备1、经过培训合格的实验人员；2、实验室条件；3、必备的实验材料。5/25/20232博康3必备的实验材料3.1必备材料①鲎试剂盒：具有国家批准文号，并依法检验合格。如：湛江博康海洋生物有限公司，卫药准字（88）SJ-04。5/25/20233博康试剂名称用途1鲎试剂反应主剂鲎试剂与2内毒素工作品阳性对照3检查用水样本溶解鲎试剂与样本溶解4酸性调节剂调节透析液的PH值【组成成份】每盒试剂组成每盒试剂配套试验耗材：无热原试管5ml×6支；无热原试管2ml×6支；无热原吸嘴0.25ml×15支。5/25/20234博康②

实验室要求洁净，无尘埃流通，室内温度要求20—25℃为宜。必要时应在超净工作台操作。5/25/20235博康③

恒温箱。④

旋涡振荡器。⑤

其它器具：消毒棉球，剪刀和封口膜等。5/25/20236博康3.2取样

取样器具必须符合2010年版《中国药品检验标准操作规范》310页——细菌内毒素检查法“3实验准备”规定：无外源性内毒素。必要时可以用真空采血管（无添加剂）取样。5/25/20237博康二、复用设备及用水要求《血液透析器复用操作规范》5.1.2水质要求：应定期检测复用用水细菌和内毒素的污染程度。应在血液透析器与复用系统连接处或尽可能接近此处进行水质检测。内毒素含量不得超过2EU/ml，干预限度为1EU/ml。当达到干预限度时，继续使用水处理系统是可以接受的，但应采取措施，防止系统污染进一步加重。5/25/20238博康5复用设备及用水要求5.1.3水质细菌学、内毒素检测时间：最初应每周检测1次，连续2次检测结果符合要求后，细菌学检测应每月1次，内毒素检测应每3个月至少1次。5/25/20239博康三、供试品溶液的制备

透析用水需进行稀释。一般要求供试品溶液的PH值在6.0～8.0的范围内。对于透析液，需调节PH值，可使用酸性调节剂调节PH值。5/25/202310博康四限量检查

透析用水、透析液已有内毒素检验标准，可直接进行内毒素检查。5/25/202311博康1、试剂和样品鲎试剂盒（生产单位：湛江博康海洋生物有限公司，灵敏度：0.125EU/ml）细菌内毒素检查用水细菌内毒素工作标准品（10EU）透析用水5/25/202312博康2、限值的确定内毒素限值L=1.0EU/ml。5/25/202313博康3、计算稀释倍数MVD=L/λ=1.0EU/ml/0.125EU/ml=8倍5/25/202314博康4、操作方法

编号名称A样品管B样品阳性对照C阳性对照D阴性对照5/25/202315博康透析样用水8倍稀怕释液0.偿2m卫l图佣示4.夸1供试盯品溶巾液的陵制备1.解4m漠l5/败19截/2秤02骂316博康垄ww寄w.绞zj锈-h肤y.声co府m4.龙2阳性窜对照检验暖鲎试洽剂活掌性及贱试验雷有效饼性。4.坏3阴性凡对照检验惯试验沸操作斜及环燥境是敏否对烂试验拢有污迟染。0.下25垦EU巧/m诱l5/责19拣/2欺02虚317博康柱ww蹄w.娘zj拴-h姻y.爸co戏m补充心：内区毒素模标准咸品的极正确称开启代方法取细抛菌内剥毒素麻工作萝标准沉品一仙支，至轻弹倘瓶壁定，使脊粉末需落入潜瓶底护，然巨后用显砂轮挎在瓶菜颈上艘部轻叼轻划蠢痕，肃用75众%酒精池棉球忌擦拭桂后启街开，设启开伐过程酿应防袭止玻杨璃屑钟落入莫瓶内昆。正确（易睬折点宇）耍错竹误5/渴19兼/2遭02羊318博康匆ww皱w.刑zj堂-h撤y.勉co叼m注意砖：1、只植能在品安瓿隶的易垫折点电上部骄开启晃内毒散素，亚不能兰沿易榆折点拳开启善，防洪止振萍荡过叨程中甩内毒埋素粘魂在封毅口膜压上。2、只释能取1m睡l的细经菌内逆毒素更检查卷用水毕复溶蜜细菌宫内毒诉素工奴作标猫准品择。5/辆19伙/2摊02乓319博康哑ww胀w.肾zj养-h疑y.愈co碧m0.港25扔EU客/m旷l0.蜻2m悠l0.搬2m挪l1.道8m搬l0.镜6m凯l图筑示1E免U/铲ml10寺EU垒/m艘l5/仇19嚼/2圣02敏320博康再ww具w.牌zj粘-h罗y.茶co吵m4.恩4供试扣品阳才性对袋照目的英是为吩了验团证透恨析用浅水中脊有内闸毒素额可以贡被检松测出协来。0.截25蹄EU砌/m武l/8倍5/给19结/2靠02缩慧321博康叹ww胸w.急zj窝-h带y.谜co忙m5鲎试虾剂的验准备取规著格为0.役1m顿l/支的塌鲎试激剂8支，酒放在诉试管拴架上龙，排布成4列，秩每列2支。魂轻弹羽瓶壁咬使粉帅末落难入瓶浙底，山用75数%酒精惰棉球闻擦拭纵后启拨开备吐用，泽防止栋玻璃赶屑落光入瓶菌内。捉每支那加入0.滤1m隶l检查样用水技溶解蔽，轻宿轻转码动瓶姻壁，文使内探容物辽充分叠溶解替。5/仆19距/2妖02泪322博康关ww肝w.胆zj模-h动y.降co取m6加样其中2支加择入0.烤1m率l的0.己25婶EU鬼/m御l的内却毒素刺标准誓溶液僚作为巾阳性捏对照;微2支加笛入0.沟1m抵l的透怪析用验水8倍稀旧释液嘉作为率供试夫品管;2支加含入0.桐1m冶l的透区析用辈水8倍稀撞释液学和0.听1m惕l的0.码25录EU词/m建l的内卡毒素太标准晌溶液作为差供试乘品阳军性对致照;2支加稠入0.数2m睬l的检酬查用狼水作哭为阴轮性对杠照。5/迟19萍/2茶02存323博康泊ww载w.爆zj数-h尽y.丙co缎m加样鼻结束股后，另将鲎欣试剂基用医劣用胶顷布封嘴口，董轻轻秘振动如混匀敢，连改同试广管架踪蝶放入37℃水浴染或适厘宜恒千温器汪中，者试管猪架保谷持水及平状泊态，争保温60分钟扬。5/洲19及/2婆02季324博康廉ww榆w.丢zj扶-h浴y.俗co哲m7结果它判断保温60分钟±2分钟筋后观坏察结豪果。柱若阴宽性对尿照溶加液D的平避行管耽均为载阴性钩，供祝试品王阳性惯对照待溶液B的平纺行管饿均为横阳性曾，阳予性对侍照溶竖液C的平沉行管黎均为殖阳性举，试依验有贱效。5/退19宏/2始02尘325博康底ww缘瑞w.师zj阔-h骆y.美co武m若溶口液A的两换个平谷行管创均为李阴性暑，判淘供试摧品符担合规市定；蝴若溶纷液A的两煌个平走行管仙均为程阳性失，判悲供试虾品不肃符合符规定亚。若铁溶液A的两悲个平忌行管稍中的尺一管情为阳盲性，否另一耻管为立阴性娃，需哪进行鞭复试进。复伯试时动，溶响液A需做4支平桂行管荡，若缩慧所有变平行陈管均扬为阴距性，详判供祖试品水符合偿规定氏；否叔则判访供试弓品不意符合与规定乱。5/值19议/2济02勤326博康当ww营w.较zj测-h访y.滔co佛m供试品供试品阳性对照阳性对照阴性对照--++++--结果是否有效有效结果判断合格8结果窗记录5/田19欲/2因02窃327博康侦ww吩w.镰zj誉-h它y.丹co炒m湛江科博康敌海洋需生物俊有限散公司讲幼解团董锤光宴通信俗地址良：广米东省说湛江舰市麻渠章区伍瑞云情南路18乘8号邮政灶编码肃：52要40橡94联系锦电话购：07忙59眠