基因扩增实验室室内质控SOP知识讲解

1目的：了解并控制实验室检测的精密度的变化2适用范围：核酸扩增荧光定量检测，使用Line-Gene基因扩增仪实验室3操作人：****4操作：4.1自制室内质控品：a)自制室内质控品来自临床收集的已知HBV4-6每收到一份冻存于-20℃。收集到约35ml时，取出样品，置室温复融。将各管倒入无菌带盖的小三角烧瓶中充分混匀。b)将以上的混合血清，以每管120ul，分装于0.5ml离心管内，分装若干管。剩余血清根据废物处理及生物防护操作程序处理。c)将上述取约23管装一小袋，其余20就从-70℃转移1小袋到-20℃冰箱备用。4.2基线测定及计算RCV：在准备开展质控工作当月的第一天取上述23管中的三管复溶，随病人标本、s、cv即R。_x一管，20天后计算各项目的测定结果的RCV的计算公式：此处的(x)2(xx)2n1xsxssncv100%xnn1_其中为RCV测定中所得23份结果的均值。Σ表示总和。xn表示结果的份数,n-1为自由度。4.3绘制RCV图_____a)计算+2S、-2S、+3S、-3S并在质控图的纵坐标上标出、xxxxx_x_±2S、±3S的位置，并将其具体值标在左侧标尺上。x__b)用红线笔画出±2S线，用蓝笔画出±3Sxx要仪器等，还应填上RCV中测定所得的X、S、CV，测定过程中的特殊情况，（附图4.4室内质控：病标本测定一管。b)在图纸下方“日期”的上一行相应的日期栏内将“测定值”按原始记录填入，边填写边核对。注意数据顺序应严格按照实际操情况，不得颠倒。未做因。c)画出每个检测值所对应的图点。4.5室内质控图的使用方法：4.5.1描点线为靶线_±2s为警告线，_±3s为失控线。_a)图中xxx对于同一批号的质控血清不论使用几个月，其质控图均不变化。只要将图纸上方的“起止日期”项填入每个月的实际起止日期即可。b)每天将该批号质控血清按有关规定程序复融随同病人的标本同时检测。将面的方法画出图上的对应点，用直线将该点与前一天的点连接起来。并进行图形分析和_c)月底计算当月全部质控血清检测结果的x小结，将质量控制图存入质控资料档案。4.5.2图形分析：做好的RCV图中描点。_a)若结果在±2S线内，报告可发出。x__b)若结果在±2S线外和±3S线以内或出现连续6点以上在一侧等规律变xx化，应向有关负责人反映并积极寻找原因，但当天检测结果可以发出。_d)若结果在+3Sxe)并将失控情况、必要时复测标本，然后方可发报告。并将失控情况、查找过程及处理结果等详细记录登记。4.5.3通过观察图形的规律变化进行误差分析，消除误差来源a)号的质控血清、操作规程人员的变换等。在找原因时应重点注意“漂移”前的发生了哪些变动性的因素。b)的降低等。c)连续多点分布在靶值同一则：目前，一般认为质控血清的检测结果连续66天以上出现在靶值同一则的可能性小于1.5%.因此凡出现连续6天以上出现在靶值同一则者均可能性存在非随机误差因告可以照常填发。d)4.5.4通过图形的资料对比进行误差分析，消除误差来源ssa)每个月的月底将该月的全部质控血清检测结果的和与该测定的和__xx_xs如果当月不同则表明检测的精密度发生了变化。sb)将使用同一批号的质控血清的CT值的和按月份列出。如果逐月上升，__xx_基本一致而s逐月加大，则主要提示常规工作的精密度下降，应重点从操x作、管理上找原因。c)在数年中，把每个月的CV和失控规律列成表，可用作检测质量的历史回顾和趋势性分析。4.6失控后的处理：4.6.1分析原始数据及初步估计失控原因：发生失控时，对同批实验检测的全部原始数据结合近期室内质控图和平时经验进行分析，估计失控原因的大体方向。4.6.2对具体检测过程进行回顾性分析，分析有无特殊情况出现。4.6.3通过选择性复查进一步分析判断失控原因，决定处理办法。选择性复查时应包括下述样品，以便一次性找出原因，及时发出报告:a)失控时使用的质控血清。b)重新打开一瓶相同批号的质控血清。c)失控时使用的标准品。d)重新打开一瓶相同批号的标准品。e)新在控并将失控情况、原因和解决方案在档案中详细记录（见表4.7该程序的变动程序：本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：检验科主任、